越橘組織培養(yǎng)研究進(jìn)展

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1、越橘組織培養(yǎng)研究進(jìn)展論文摘要：研究越橘離體繁殖影響因素，篩選越橘離體所需最佳啟動(dòng)、增殖和生根培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件。為發(fā)展越橘產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)及建立越橘工廠化育苗，越橘商品基地的建立提供充足優(yōu)良的苗木及提供技術(shù)支撐。論文關(guān)鍵詞：越橘，組織培養(yǎng)，快速繁殖越橘，又稱藍(lán)莓，屬于杜鵑花科烏飯樹B(Vaccinum),為多年生落葉或常綠果樹，呈灌木狀生長(zhǎng)。果實(shí)為漿果，藍(lán)色，近形;單果重0?5~2?5g,最大可達(dá)3.5?5.0g果肉細(xì)膩，種子極小，甜酸適中，具有宜人的香氣，可鮮食，也可加土成果汁飲料、果酒等飲品。越橘果實(shí)深藍(lán)色，富含花色昔，低糖、低脂肪，抗

2、氧化能力名列所有果品、蔬菜之首，對(duì)防止人體細(xì)胞衰老，預(yù)防老年性疾病，如心臟病、白內(nèi)障、癌癥、記憶力衰退等，具有特殊的功效，是國(guó)際糧農(nóng)組織公布的五大健康食品之一，在美國(guó)、日本等發(fā)達(dá)國(guó)家都已引起重視，成為一種很有發(fā)展前途的小果類果樹。越橘是一種新興的保健水果，在醫(yī)藥、化妝、食用色素和食品加工等方面有廣泛用途。越橘果實(shí)深藍(lán)色，抗氧化能力名列果蔬之首。果實(shí)所含的花青素是迄今已被利用的最佳天然色素，加工穩(wěn)定性高，色澤呈深紅、紫紅或藍(lán)紫，作為藥物或高級(jí)化妝品的原料均具有十分廣闊的前景。近幾年，其鮮果和加工品風(fēng)靡歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家，雖然價(jià)格昂貴但仍供

3、不應(yīng)求。北美地區(qū)的產(chǎn)量已遠(yuǎn)不能滿足本地和國(guó)際市場(chǎng)的需求，為此荷蘭、加拿大、澳大利亞、日本、智利等國(guó)家先后引種栽培，現(xiàn)已初具商品產(chǎn)量。1組織培養(yǎng)技術(shù)研究1.1無(wú)菌繁殖系的建立越橘的離體培養(yǎng)已成為快速繁育無(wú)病毒苗木的主要途徑。隨著品種的更新?lián)Q代及生產(chǎn)上對(duì)優(yōu)良品種的無(wú)病毒苗木的大量需求，越橘莖尖和葉片培養(yǎng)將更為迅速的發(fā)展，并發(fā)揮越來(lái)越大的作用。在莖尖和葉片培養(yǎng)中，無(wú)菌繁殖系建立是整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程的基礎(chǔ)，遇到的困難也較多，其中降低外植體接種的污染率、提高分化率是最為首要的間題。為減少各個(gè)過(guò)程中組織培養(yǎng)褐變的發(fā)生，加入活性炭和抗壞血酸都能達(dá)到明顯

4、的效果，而且抗壞血酸的效果要比活性炭更好，在其濃度為100mg/L時(shí)，褐化率僅為13%,而且褐化率與實(shí)踐長(zhǎng)短成正相關(guān)。目前誘導(dǎo)越橘芽再生的激素主要是ZIP、ZT、ZTR和TDZ,ZIP使用中通常濃度較高，雖然ZT和ZTR的不定芽誘導(dǎo)率通常是ZIP的數(shù)倍，但ZT、ZIP價(jià)格昂貴。TDZ對(duì)越橘的一些品種不能實(shí)現(xiàn)再生，并且ZIP、ZT和ZTR也不能在所有越橘品種中實(shí)現(xiàn)再生。Samir(2005)以莖段為外植體，在對(duì)越橘的3個(gè)栽培種('Regal'、

5、中發(fā)現(xiàn)，碳源的種類、濃度及它們之間的相互作用對(duì)枝條再生具有影響。在葡萄糖、山梨醇和蔗糖3種碳源中，雖然葡萄糖對(duì)促進(jìn)再生枝條的生長(zhǎng)與蔗糖具有同樣的作用，而且在葡萄糖濃度為10g/L,時(shí)，對(duì)'NL*種的培養(yǎng)效果好于蔗糖，但蔗糖為20g/L時(shí)培養(yǎng)效果最好，包括外植體的培養(yǎng)反應(yīng)和芽再生潛力；碳源的濃度對(duì)于腋芽的萌發(fā)幾乎沒有影響。再生培養(yǎng)基中蔗糖的濃度變化對(duì)立體葉片的再生頻率和平均不定芽數(shù)有著明顯的影響。再生培養(yǎng)基中蔗糖濃度為20g/L時(shí)最適宜越橘莖尖的不定芽的發(fā)生，再生頻率和平均不定芽數(shù)最高。1.1.1取材時(shí)間外植體的種類是影響組織培養(yǎng)的重

6、要因素之一。不同組織和器官，因?yàn)槠洳煌纳L(zhǎng)發(fā)育階段和特性，在組織培養(yǎng)中產(chǎn)生的效果是不同的。許多植物以莖段作為外植體誘導(dǎo)愈傷組織的成功率要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于用其他外植體誘導(dǎo)(李淡等，2003L對(duì)于越橘而言，外植體采集最好選擇水培后萌發(fā)的芽或在春季采集，此時(shí)不僅植株生長(zhǎng)旺盛，并且能夠有效降低污染率，幼齡植株的分化能力也較強(qiáng)。同時(shí)應(yīng)盡可能選擇在一年生或當(dāng)年生枝條上采集外植體。不同時(shí)期獲取的植物莖段，會(huì)產(chǎn)生不同的分化效果。Sidorocich.EA等，認(rèn)為4月時(shí)莖段獲取的最適宜時(shí)段。莖段分化芽多，且不產(chǎn)生愈傷組織。其他時(shí)期的莖段培養(yǎng)，愈傷組織較多，

7、芽分化水平低，生長(zhǎng)慢，且有褐變發(fā)生。王連潤(rùn)等人以夏普藍(lán)、戴安娜等六個(gè)藍(lán)莓品種為外植體于立10月中旬從田間健康生長(zhǎng)的植株上選取帶壯芽的休眠枝條，去除葉片后用洗潔精溶液洗凈，流水沖洗20raino在超凈臺(tái)上將枝條剪成3-4cm莖段，每個(gè)莖段帶1-2個(gè)隱芽。結(jié)果顯示，以帶隱芽的健壯材料建立無(wú)菌苗，其污染率低，最高不超過(guò)8%,成苗率高，90%以上的芽能抽梢形成正常的綠苗。1.1.2外植體的選擇與滅菌在越橘上已能從葉片、胚(HrlskoD.1993)等外植體上誘導(dǎo)出不定芽，根的外植體誘導(dǎo)尚未成功。大部分報(bào)道都是進(jìn)行越橘誘導(dǎo)葉片直接再生不定芽。

8、據(jù)報(bào)道，高叢越橘，兔眼越橘研究表明，可以通過(guò)葉片誘導(dǎo)分化不定芽。矮叢越橘的組織培養(yǎng)產(chǎn)生不定芽和愈傷組織則通過(guò)子葉或胚偶爾獲得。利用非子葉葉片器官誘導(dǎo)不定芽再生也有一些報(bào)道。Chernik等（1992）對(duì)上胚軸直接誘導(dǎo)不定芽進(jìn)行了研究，