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《西醫(yī)綜合考研——生化輔導(dǎo)》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、DNA蛋白質(zhì)復(fù)制轉(zhuǎn)錄反(逆)轉(zhuǎn)錄翻譯RNA復(fù)制遺傳中心法則第三部分基因信息的傳遞DNA復(fù)制要點(diǎn)一、DNA半保留復(fù)制二、DNA復(fù)制的酶學(xué)三、復(fù)制基本過程(端粒酶)四、DNA損傷(突變)及其修復(fù)五、逆轉(zhuǎn)錄及逆轉(zhuǎn)錄酶一、DNA復(fù)制的含義:DNA分子為模板合成新的DNA分子的過程,稱為DNA復(fù)制。二、復(fù)制的方式——半保留復(fù)制指經(jīng)復(fù)制后,子代DNA分子中一條鏈完整來自親代DNA,而另一條鏈則完全重新合成,且與母鏈堿基互補(bǔ)。DNA的半保留復(fù)制DNA復(fù)制的酶學(xué)一、酶——DNA聚合酶(簡稱DNA-pol,全稱依賴
2、DNA的DNA聚合酶,DNA-dependentDNApolymerase,DDDP)主要特點(diǎn):(1)催化5??3?的合成方向(2)具核酸外切酶活性(3)底物——dNTP大腸桿菌DNA聚合酶3??5?外切5??3?外切酶活性酶活性功能種類DNA-polI??校讀、修復(fù)、填補(bǔ)缺口(催化延長約20個核苷酸)DNA-polII??不詳DNA-polIII??復(fù)制真核生物DNA聚合酶?????酶活性5??3?聚合酶活性?????3??5?外切酶活性?????構(gòu)成亞基數(shù)44425分子大小(kd)>25036
3、-38163-300170256細(xì)胞內(nèi)定位核核線粒體核核功能隨從鏈修復(fù)復(fù)制領(lǐng)頭鏈校讀、修復(fù)制(無其它復(fù)制復(fù)、填補(bǔ)DNA-pol時)DNA聚合酶通過其3??5?核酸外切酶的作用發(fā)揮較正功能二、引物——寡聚核苷酸(RNA片段)三、模板——解開成單鏈的DNA母鏈為模板四、其它酶類和蛋白質(zhì)因子解螺旋酶(即DnaB蛋白或Rep蛋白)——解開DNA雙鏈。DnaA——辨認(rèn)復(fù)制起始點(diǎn)。DnaC——協(xié)助解螺旋酶,使其在起始點(diǎn)上結(jié)合并打開雙鏈。DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶——理順DNA鏈,即通過切斷、旋轉(zhuǎn)和再連結(jié)作用,把正超螺旋
4、變?yōu)樨?fù)螺旋。單鏈結(jié)合蛋白(SSB)——穩(wěn)定解開的單鏈DNADNA連接酶——催化復(fù)制中兩條不連續(xù)的鏈片段間的磷酸二酯鍵形成。解旋、解鏈作用DNA復(fù)制的基本過程起始延長終止5?5?5?3?3?3?5?領(lǐng)頭鏈隨從鏈解鏈方向不連續(xù)復(fù)制復(fù)制叉岡奇片段連續(xù)復(fù)制起始點(diǎn)(Ori)復(fù)制叉與雙向復(fù)制引發(fā)體的形成3、引物的生成起始復(fù)制方向(5`?3`)(不)連續(xù)復(fù)制岡崎片段領(lǐng)頭鏈隨從鏈延長終止引物水解補(bǔ)缺連接端粒酶含義:它有蛋白質(zhì)和RNA兩部分組成,是一種特殊的反轉(zhuǎn)錄酶。它以自身的RNA為模板,在隨從鏈模板DNA的3′
5、-OH末端延長DNA,再以這種延長的DNA為引物,繼續(xù)合成隨從鏈,直至一定長度。端粒酶(真核生物)1、突變(基因突變)的含義——指DNA分子(基因)上堿基的改變。2、分類:錯配(點(diǎn)突變)——DNA分子上1個堿基的變異缺失——一個或一段核苷酸鏈片段的丟失插入——原來沒有的1個堿基或一段核苷酸鏈插入分子重排(重組)——DNA分子內(nèi)發(fā)生較大片段的交換。移位的DNA片段在新位點(diǎn)上可顛倒方向反置(倒位),也可以發(fā)生在染色體之間。DNA損傷(突變)與修復(fù)3、引發(fā)突變的因素(1)物理因素:紫外線和輻射——紫外線
6、常發(fā)生嘧啶二聚體,致復(fù)制和轉(zhuǎn)錄受阻。(2)化學(xué)因素:化學(xué)誘變劑——5-溴尿嘧啶(5-BU)、羥胺類(NH2OH)、亞硝酸鹽、烷化劑(氮芥類)等胸腺嘧啶嘧啶二聚體光修復(fù)酶4、DNA損傷的修復(fù):(1)光修復(fù)——通過光修復(fù)酶催化,使嘧啶二聚體解聚,但需要光照射(2)切除修復(fù)——特異核酸內(nèi)切酶、DNA-polI和連接酶共同完成重組修復(fù)(3)重組修復(fù)——(4)SOS修復(fù)——細(xì)胞處危急狀態(tài)的一種修復(fù)。此時可誘導(dǎo)一種可催化DNA合成的特殊酶,其對堿基識辨能力差,易出錯。盡管如此,還是可以提高細(xì)胞存活率。逆轉(zhuǎn)錄作
7、用——指以RNA為模板合成DNA的過程。逆轉(zhuǎn)錄酶——三種酶活性(1)RNA為模板催化DNA合成(2)水解雜化雙鏈上RNA(3)DNA為模板催化DNA合成逆(反)轉(zhuǎn)錄作用和逆(反)轉(zhuǎn)錄酶起始點(diǎn)多點(diǎn)單點(diǎn)速度慢(原核的1/10)快引物大小短(約10個核苷酸)長(約數(shù)十個核苷酸)岡奇片段少(約100~200個)多(約1000~2000個)酶DNA聚合酶-?DNA聚合酶III端粒酶有無真核生物原核生物真核與原核生物復(fù)制的主要區(qū)別轉(zhuǎn)錄以DNA為模板合成RNA的過程,稱為轉(zhuǎn)錄。要點(diǎn)1、RNA的不對稱轉(zhuǎn)錄(轉(zhuǎn)錄的
8、模板、酶及基本過程)2、RNA轉(zhuǎn)錄后的加工修飾3、核酶RNA聚合酶一、RNA聚合酶(全稱依賴DNA的RNA聚合酶,DNA-dependentRNApolymerase,DDRP;亦稱轉(zhuǎn)錄酶)特點(diǎn):1、催化5??3?的合成方向2、底物為NTP3、摸板DNA4、不需要引物5、產(chǎn)物是RNA大腸桿菌RNA聚合酶組分及功能二、原核生物RNA聚合酶?2???——核心酶?全酶亞基分子量功能?36512決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄?150618與轉(zhuǎn)錄全過程有關(guān)(催化)?‘155613結(jié)合DNA模板(開鏈)?