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1、免疫膠體金技術的應用與展望陳俊彥，肖瓊(南京信息工程大學濱江學院，南京210044)摘要免疫膠體金技術是一種新型固相標記免疫檢測技術，因其獨特的性質在許多領域得到廣泛應用和快速發(fā)展。簡述了免疫膠體金技術在電鏡、光鏡快速檢測診斷中的發(fā)展以及在生物醫(yī)學、免疫組織化學和細胞生物學等領域的研究和應用。未來免疫膠體金技術在提高膠體金制備質量的同時將實現(xiàn)定量和多元化檢測。關鍵詞免疫膠體金技術；快速診斷；生物醫(yī)學；應用中圖分類號：O657文獻標識碼：A文章編號：1008–6145(2014)01–0101–04Applicationa
2、ndProspectofImmuneColloidalGoldTechniqueChenJunyan，XiaoQiong(NanjingUniversityofInformationScience&Technology,BinJiangInstitute，Nanjing210044，China)AbstractImmunecolloidalgoldtechniqueisanewkindofsolidphasemarkedimmunedetectiontechnology，itiswidelyappliedinmanyfi
3、eldsanddevelopedrapidlyowetoitsuniquecharacteristics.Theresearchandapplicationoftheimmunecolloidalgoldtechniqueintherapiddiagnosiswithelectronmicroscope，lightmicroscope，andthefieldofbiomedical，immunohistochemicalandcellbiologywerebrieflydiscussed.Inthefuture，thet
4、echniqueofimmunecolloidalgoldwillimprovethequalityofcolloidgoldandachievequantitativeanddiversitydetectionatthesametime.Keywordsimmunecolloidalgoldtechnique;rapiddiagnosis;biomedical;application分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程［6］。利用還原法從氯金酸溶液中可制備直徑1～150nm大小不同的膠體金顆粒。溶膠的顏色與粒徑大小相對
5、應：5～20nm溶膠呈葡萄酒紅色；20～40nm液體為深紅色；60nm以上金溶液呈紫紅色［7］。在適宜條件下，抗原和抗體與膠體金顆粒反應產生聚集，達到一定的密度時，大量聚集的標記物顯示出肉眼可見的紅色或粉紅色斑點。因此免疫膠體金技術在基礎研究和檢驗檢疫中定性或半定量的快速檢測中得到廣泛的應用［8］。2免疫膠體金在電鏡水平的應用免疫膠體金電鏡技術是在分子水平上對細胞抗原進行形態(tài)學研究較為理想的方法［9］，其最大優(yōu)點是通過不同大小金顆粒或結合酶標進行雙標記或多標記，在同一標本上顯示兩種不同抗原，有助于細胞內生物活性物質的定位
6、，同時觀察不同抗原及受體在細胞表面和細胞結構中的定位，了解細胞組織中的相互關系及代謝過程。Jia等應用免疫膠體金電鏡技術對蠶豆葉片細胞研究，發(fā)現(xiàn)蠶豆幼嫩葉片和成熟葉片葉肉細胞中金顆粒分布的不同。陳以峰等研究發(fā)現(xiàn)煙草受精前后卵細胞內吲哚乙酸(IAA)的分布變化。免疫膠體金技術(immunecolloidalgoldtechnique，ICG)是以膠體金為標記物，利用特異性抗原抗體反應進行的固相標記免疫檢測技術。繼熒光素、放射性同位素和酶檢測技術之后，免疫膠體金技術已廣泛應用于生物醫(yī)學、免疫組織化學和細胞生物學等研究領域。1
7、971年Faulk等［1］首次將膠體金與抗體結合應用于免疫電鏡，研究沙門菌壁細菌表面抗原的分布。1977年Geoghegan等［2］應用免疫膠體金染色技術(immuno-goldstaining，IGS)，在光鏡水平檢測B淋巴細胞表面膜免疫球蛋白。1983年Holgatet等［3］在膠體金染色的基礎上，增加了銀顯影技術，免疫金銀染色技術(immuno-goldsilverstaining，IGSS)取代了傳統(tǒng)的熒光素和酶等物質。隨著研究的不斷深入，以肉眼觀察水平的免疫膠體金快速診斷技術在快速檢測中得到了廣泛的應用和發(fā)展［
8、4］。1免疫膠體金技術的基本原理膠體金是氯金酸(chloroaurieacid，HAuCl4)在還原劑(白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉和鞣酸等)作用下，聚合成帶負電的疏水膠溶液。膠體以金顆粒為核，表面吸附AuCl4和H+雙層離子，與蛋白質分子及其它非共價的生物大分子(毒素、酶、抗生素、激素、多肽等)正電荷基團形成靜電結合，
