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1、痹痛方鎮(zhèn)痛抗炎作用探究摘要：目的：觀察痹痛方鎮(zhèn)痛抗炎方面藥效學(xué)作用，探討其治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥理學(xué)基礎(chǔ)。方法：鎮(zhèn)痛實驗用熱板法與扭體法；抗炎實驗采用毛細(xì)血管通透性實驗、棉球肉芽腫實驗及佐劑性關(guān)節(jié)炎模型；觀察藥物對內(nèi)毒素引起的TNF-a產(chǎn)生的影響。結(jié)果：在熱板法與扭體法實驗中痹痛方能明顯提髙小鼠痛閾；具有抑制毛細(xì)血管通透性、減輕棉球肉芽腫質(zhì)量；顯著抑制大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎急性足爪腫脹，對繼發(fā)性的足腫脹也有明顯的抑制作用。并能明顯減少內(nèi)毒素引起的TNF-a產(chǎn)生。結(jié)論：痹痛方具有明顯鎮(zhèn)痛抗炎作用。鎮(zhèn)痛作用機制可
2、能通過外周與中樞兩種機制介導(dǎo)；而免疫調(diào)節(jié)作用可能為其抗風(fēng)濕炎癥的機制之一。?關(guān)鍵詞：痹痛方；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；鎮(zhèn)痛；抗炎；腫瘤環(huán)死因子?中圖分類號：R285.5文獻標(biāo)識碼：A文章編號:1673-7717(2007)04-0788-03痹痛方多年來在臨床主要用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，具有一定的臨床療效。主要由全蝎、蟆蚣、制附子、川葦、延胡索、芍藥、丹皮等組成，具有搜風(fēng)通絡(luò)、行氣止痛等功效。本試驗利用弗氏完全佐劑誘導(dǎo)的大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎(AdjuvantArthritis,AA)等模型，從動物實驗角度對痹痛方的鎮(zhèn)
3、痛抗炎作用進行藥效學(xué)評價。?1材料與方法?1.1實驗動物與試劑NIH小鼠，普通級，BW(20±1)g,雌雄兼用；SD大鼠，普通級，BW(200±5)g,雄性，均由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供。鹽酸布洛芬(ibuprofen中美史克)、醋酸潑尼松片(prednisone,仙居制藥)，弗氏完全佐劑(GIBCOBRL)o脂多糖(lipololysaccharide,LPS,fromEscherichiacoli0111：B4Sigma)oTNF-aELISA測試盒(RND)o痹痛方為院內(nèi)制劑，由中藥飲片水提濃縮
4、而成，實驗中用蒸溜水配成所需濃度。小劑量每mL含0.3g生藥，大劑量每mL含0.6g生藥。本研究中小鼠實驗給藥20mL/kg體重、大鼠給藥10mL/kg體重。?1.2小鼠熱板實驗［11NIH小鼠置于(55±0.5)￡的水浴燒杯上，以舔后足所需時間為痛閾(s),各組動物均測兩次給藥前的正常閾值，取平均值為基線，剔除基線閾值在30s以上、閾值10s以內(nèi)以及跳躍的小鼠。然后分組給藥。對照組給等容積蒸憎水，小劑量組給0.3g/mL痹痛方20mL/kg；大劑量組給0.6g/mL痹痛方20mL/kg,西藥組灌胃給鹽
5、酸布諾芬0.0105g/kg,給藥后30、60、90、120min分別測各組小鼠的痛閾，如小鼠在熱板上60s仍無痛反應(yīng)，取出按60s1.3小鼠扭體實驗［2］NIH小鼠分別給等容積蒸館水、小劑量中藥、大劑量中藥及鹽酸布諾芬(0.0105g/kg),給藥后0.5h,每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.加L,觀察注射后20min內(nèi)各鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)。?1.4小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實驗［31NIH小鼠同上給藥0.5h后尾靜脈注射0.5%伊文斯藍生理鹽水溶液10mL/kgBW,隨即腹腔注射0.6%醋酸10mL/kgB
6、W,20min后脫頸椎處死，剪開腹部皮膚肌肉，用6mL生理鹽水分?jǐn)?shù)次洗滌腹腔，吸管吸出洗滌液、合并后加入生理鹽水至10mL,3000r/min離心15min；取上清液于590nm比色測定OD值。?1.5大鼠棉球肉芽腫實驗［3］SD大鼠雄性，乙瞇麻醉左側(cè)腹股溝皮下切口，植入滅菌棉球30mg,分組連續(xù)給藥7天(對照組每天給予等容積水，小劑量組給0.3g/mL痹痛方10mL/kg,大劑量組給0.6g/mL痹痛方10mL/kg,西藥組給醋酸潑尼松片0.005g/kg),8天頸椎脫臼處死，取出棉球在6(TC烘箱放
7、置12h稱重，減去原棉球重量即為肉芽腫凈重。?1.6佐劑關(guān)節(jié)炎實驗［4］SD大鼠，測左、右足容積，取均值作為給藥前容積，右后足跖皮內(nèi)注射弗氏完全佐劑0.ImL,對照組不注射佐劑。每天各組動物給予相應(yīng)受試藥物，對照組與模型組每天給予等容積水，小劑量組給0.3g/mL痹痛方10mL/kg,大劑量組給0.6g/mL痹痛方10mL/kg,西藥組給醋酸潑尼松片0.005g/kgo動物每天給藥1次，連續(xù)30天。給予佐劑后2、5、10、15、20、25、30天測右足容積1次，并于第10天起加測左足容積。足腫脹度計算方
8、法:腫脹度（％）=（致炎后足容積-致炎前足容積）/致炎前足容積。?1.7內(nèi)毒素誘導(dǎo)佐劑關(guān)節(jié)炎大鼠TNF-a產(chǎn)生［5］上述佐劑關(guān)節(jié)炎實驗第30天，每只大鼠給予腹腔注射lOOug/kg月旨多糖（lipololysaccharide,LPS,fromEscherichiacoli0111：B4,生理鹽水配制）,3h后,采血ELISA法測血漿TNF-a水平。?1.8統(tǒng)計學(xué)分析所有數(shù)據(jù)用mean土SD表達。用SPSS11.0軟件進行t檢驗，P
