體外過敏原檢測系統(tǒng)臨床應用價值探析

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1、體外過敏原檢測系統(tǒng)臨床應用價值探析［中圖分類號］R446.11［文獻標識碼］A［文章編號］1005-0019(2009)9-0066-01過敏是最常見的一種變態(tài)反應，涉及面廣，最常見的是過敏性鼻炎、花粉癥及過敏性哮喘。國內現(xiàn)有的檢測手段僅能測定總IgE和有限的幾種最常見的特異性IgE,而在很多情況下，尚無法確定過敏原是什么，因而導致過敏源的檢測在很多領域中未能引起應有的關注而加以推廣應用，與國外的進展相差甚遠，存在較多的空白領域。防治過敏反應性疾病的關鍵在于發(fā)現(xiàn)過敏原并有效避免與之接觸。傳統(tǒng)皮試方法既痛苦又受藥物方面的影響，對于高敏體質患者具有一定的生命危險性，因此

2、過敏原體外檢測方法已成為一種必然的趨勢。我科07年從德國引進的體外過敏原檢測系統(tǒng)填補了這一領域的空白，克服了傳統(tǒng)方法的缺點。定量檢測人的血清中特異性IgE,用于輔助診治各種過敏性性疾病，本文通過近兩年的臨床實踐探討其應用價值。1資料和方法1.1一般資料：2007年7月一2009年3月，在我科門診及病房患者233例，男99例，女134例，年齡5-70歲，平均年齡52歲。靜脈采血4ml,分離血清，冷藏備用。1.2方法與材料1.2.1方法：采靜脈血4ml并分離血清。根據(jù)操作手冊步驟如下：（1）從冰箱里取出試劑盒，放至室溫，在測試板上用記號筆編號。（2）在測試板的膜條上加入

3、400ul起始液（藍色），讓其停留數(shù)秒鐘，然后倒空并在吸水紙上拍擊測試板，盡量去除膜條上的洗液。（3）立即吸取400ul血清標本加到每塊測試板膜條上，使其在常溫搖床上振動孵育45分鐘，將血清標本倒空，用4ml沖洗液沖洗兩次，加入400ul沖洗液在搖床上常溫孵育5分鐘，用4ml的沖洗液沖洗兩次,然后倒空并在吸水紙上拍擊測試板，盡量去除膜條上的洗液。（4）吸取400ul第一抗體（綠色）加到每塊測試板膜條上,常溫搖床上振動孵育45分鐘，倒空用4ml的沖洗液沖洗兩次，并在吸水紙上拍擊測試板，盡量去除膜條上的洗液。（5）吸取400ul第二抗體（白色）加到每塊測試板的膜條上，常

4、溫搖床上振動孵育20分鐘，倒空用4m1的沖洗液沖洗兩次，并在吸水紙上拍擊測試板，盡量去除膜條上的洗液。（6）吸取400ul底物溶液（黑色）加到每塊測試板的膜條上，在避光處加蓋常溫搖床上振動孵育20分鐘，倒空用4ml的沖洗液沖洗兩次，并在吸水紙上拍擊測試板，盡量去除膜條上的洗液。在空氣中干燥約15分鐘，然后利用平板掃描裝置和計算機系統(tǒng)進行測定。1.2.2儀器：德國PCA過敏原檢測儀。1.2.3試劑：德國PCA專用試劑。1.2.4結果判斷：采用獨特的固相酶斑點專利技術，用于定量檢測血清中的抗過敏原特異性IgE抗體，使用PCA專用軟件和平板掃描裝置，經過六條標準帶產生的標

5、準曲線對比并自動計算，即可得到精確的過敏原濃度，分成0—6級，其中0—6級代表濃度分別為：陰性；臨床可疑，常常沒有過敏癥候；弱陽性，經常有過敏癥候；陽性，經常有過敏癥候；強陽性，經常過敏；強陽性；極強陽性。2各種疾病檢測陽性結果分析花粉癥，鼻炎季節(jié)性發(fā)病，過敏性哮喘陽性結果多為艾草、屋塵蟻、粉塵蟻、楊樹、獸毛等，尤其艾草有的高達6級，尊麻疹等皮膚過敏患者多為蛋白、魚蝦、蘋果、獸毛等。3討論3.1近年來，過敏性疾病發(fā)病率日趨升高，涉及的疾病也極其廣泛，患各種過敏性反應性疾病如：花粉癥、特異性濕疹、外因性氣喘時，患者血清中存在特異性過敏原。檢測特異性過敏原對診斷引起變態(tài)

6、反應的物質基礎及選擇合適免疫治療具有重要價值，我科過敏原檢測中，大多數(shù)為過敏性鼻炎、哮喘，濕疹也很多見，前者多為吸入方面的原因,如：花粉、塵嚇、動物毛皮屑等，后者在食物方面常見，有魚、蝦等，因此通過過敏原檢測尋找病因，將成為診斷疾病的重要手段。3.2呼吸科各類發(fā)病的病例中，過敏原也是較為常見的致病因素，70%是由過敏原致病的。支氣管哮喘是一種常見的變態(tài)反應，簡稱哮喘，是一種以嗜酸性粒細胞、肥大細胞反應為主的氣道變態(tài)炎癥和呼吸道高反應性為特性的疾病。臨床表現(xiàn)為反復發(fā)作性伴有哮鳴音的呼氣性呼吸困難、胸悶或咳嗽，可自行或治療后緩解，臨床上分為外源性哮喘和內源性哮喘。外源性

7、哮喘是由變應原引起的，在緩解期應作特異性過敏原檢測，這樣可以避免或消除引起哮喘發(fā)作的變應原。3.3兒科中的過敏性反應性疾病也較為常見。在兒童慢性咳嗽中，過敏原是重要的原因之一。氣喘或敏感性呼吸道是氣管在接受過敏原或非過敏原刺激物（如：二手煙、污染的空氣）刺激后，氣管內產生平滑肌收縮、黏膜水腫、分泌物增加、炎細胞侵潤等炎癥現(xiàn)象。過敏性嬰兒濕疹，小兒遺尿、小兒乳糜瀉等都是常見的過敏反應。預防小兒過敏性疾病的產生，要從出生起即開始避免接觸過敏原。高過敏家庭中懷孕婦女，最好從4個月起就要避免接觸過敏原。新生兒于出生后的六個月內，最好母乳喂養(yǎng)并盡量減少接觸粉塵、二手煙、貓