磷脂酶D高效產(chǎn)生菌的篩選及鑒定

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1、磷脂酶D高效產(chǎn)生菌的篩選及鑒定代書玲'張江'商軍彳(1.上海農(nóng)林職業(yè)技術學院,上海松江:201600;2.上海市獸跖飼料檢測所,上海:201103)摘要:采用蛋黃平板法,從河南某香油作坊附近土樣中篩選到兩株降解磷脂的菌株X2和X10,產(chǎn)物分析和酶活測定表明,X2所產(chǎn)磷脂酶主要為磷脂酶D,隠活3.2U/mL,X10除產(chǎn)少量磷脂酶D外,可能還產(chǎn)礴脂酶A。根據(jù)形態(tài)觀察、/理心化特征和BIOLOGH動微牛物分析系統(tǒng)的鑒定,初步判定X2為蠟狀芽他^(Bacilluscereus)^X10為嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌(SlenolrophomonasmaltophiliaA

2、關鍵詞:磷脂酚D;菌株篩選;鑒定ScreeningandIdentificationoftheHighPhospholipaseD-producingStrainsDaiShuling,ZhangJiang,ShangJun"(1.ShanghaiVocationalandTechnicalCollegeofAgricultureandForestry,Songjiang,Shanghai,201600;2.ShanghaiInstituteforVeterinaryDrug&Feedscontrol,Shanghai,201103)Abstract:T

3、heresearchaimedtoscreenandidentifyhighproducingstrainsofPhospholipaseD?StrainswereisolatedfromsoilnearasesameoilworkshopinHenanbythemethodofeggyolkplateandidentifiedaccordingtotheirshapes,physiologicalandbiochemicalcharacteristics,aswellasBIOLOGautomaticmicrobiologyanalysissystem

4、.TwodegradatingphospholipidsstrainsX2andXI0wereobtained.TheanalysesofthedegradationproductsandPhospholipaseDactivityshowedthatstrainX2mainlyproducedphospholipaseDandtheactivitywasupto3.2U/mL.whileX10producedotherphospholipaseinadditiontoasmallamountofphospholipaseD.Accordingtothe

5、resultofidentificationstrainsX2andX10werePreliminarilyidentifiedasBacilluscereusandStenotrophomonasmaltophiliarespectively.PhospholipaseDproducedstrainswereisolatedandX2wasascertainedasthefurtherexperimentalstrainofproducingphospholipaseD.Keywords:phospholipaseD,strainsscreening,

6、identification磷脂酶D(phospholipaseD),簡稱PLD,是一?類特殊的酯鍵水解酶,它能催化水解磷脂分子中的磷酸和拜基化合物(如膽堿、乙醇胺等)的輕基成酯的P-0鍵,水解產(chǎn)物為磷脂酸和輕基化合物。除水解作用外,在特定條件下,還能催化-些含輕基的化合物結合到磷脂的?;?,形成新的磷脂,這一特性稱為PLD的磷脂?;D移特性,通常也稱作堿基交換反應。因此,利用PLI)能夠在休外成功的對磷脂進行改性⑴,特別是PI,D催化的堿基交換反應為制備單一磷脂和稀冇磷脂捉供了方便的途徑2鐵PLD廣泛存在于各種植物中,在動物和微生物中也有分布。微生物P

7、LD是本世紀60年代發(fā)現(xiàn)的,至今已報道的產(chǎn)PLD的微牛物種類主要有鏈霉菌l^(streptomyces)^棒狀桿菌屬(corynebacterium丿、人腸桿菌屬(Escherichia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)沙門氏桿菌屬(Salmonella)>副流感嗜血-桿菌(Haemophilusparainfluenzae)等國外所篩選的產(chǎn)PLD的菌株以鏈霉菌屬的微生物居多,且具有較高的轉磷酯酰基活性,但鏈霉菌生長周期長(近7d);國內(nèi)目前所報道的產(chǎn)PLD的微生物主要有鏈霉菌屬、假單胞菌屬及作為布主細胞的大腸桿菌等,但活力普遍不高,離產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)還

8、有一定距離。本文通過人量篩選,以期獲得高產(chǎn)PLD的細菌。1材料與方法1」材料1.

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