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1、移液器(加樣槍)使用、校準(zhǔn)及日常維護(hù)2021/7/21河北醫(yī)科大學(xué)新藥安全評價研究中心王勇1,移液器的基礎(chǔ)知識2,移液器的使用方法3,移液器的使用注意事項4,移液器快速校準(zhǔn)的方法5,移液器的日常維護(hù)保養(yǎng)內(nèi)容簡介移液器的基礎(chǔ)知識吸頭套筒容量顯示窗吸頭脫卸按鈕體積調(diào)節(jié)旋鈕移液器的基本結(jié)構(gòu)排氣式移液器是指移液器活塞與吸入液體上表面之間有空氣柱,在操作中,被移取的液體與活塞體之間因為空氣柱的存在,將無法直接接觸;容積式移液器是指移液器活塞與吸入液體上表面之間沒有空氣柱,在操作中,被移取的液體與活塞體之間因為沒有空氣柱的存在,將可以直接接觸。移液
2、器的基本分類標(biāo)稱容量:在給定的有效量程范圍內(nèi)最大的容量例如標(biāo)稱容量為100μl的可調(diào)式移液器,其有效量程是10μl-100μl,但實際上,其最小值可調(diào)節(jié)到7μl左右,最大值可調(diào)節(jié)到110μl左右,但這個范圍7μl-110μl并不是廠家所宣稱的量程,也不是該移液器的有效量程。移液器的容量識別移液器的使用正向吸液:吸液時,將移液器按鈕按到第一檔吸液,釋放按鈕。放液時,先按到第一檔,打出大部分液體,再按下第二檔,將余液排出。移液器的移液方式反向吸液:適用于粘稠液體和易揮發(fā)液體。吸液時將按鈕直接按到第二檔再釋放,這樣會多吸入一些液體,打出液體時
3、只要按到第一檔即可。此時,吸頭內(nèi)部還有多余液體,可以補(bǔ)償吸頭內(nèi)部的表面吸附。移液器的移液方式1選擇量程合適的移液器移液器只能在特定量程范圍內(nèi)準(zhǔn)確移取液體,如超出最低或最大量程,會損壞移液器并導(dǎo)致計量不準(zhǔn);2設(shè)定容量值2.1粗調(diào):通過調(diào)節(jié)旋鈕將容量值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值;2.2細(xì)調(diào):當(dāng)容量值接近設(shè)定值以后,應(yīng)將移液器刻度顯示窗平行放至自己的眼前,通過調(diào)節(jié)旋鈕慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值,從而避免視覺誤差所造成的影響;2.3設(shè)定容量值時的注意事項:在調(diào)節(jié)量程時,如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,旋轉(zhuǎn)旋鈕即可。但如果要從小體積
4、調(diào)為大體積時,則應(yīng)先旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。移液器的操作方法3吸液嘴(吸頭)的裝配:把白套筒頂端插入吸液嘴,在輕輕用力下壓的同時,把手中的移液器按逆時針方向旋轉(zhuǎn)至吸液嘴卡緊。切記用力不能過猛,更不能采取剁吸頭的方法來進(jìn)行安裝。吸液嘴卡緊的標(biāo)志是略為超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈;4預(yù)洗吸液嘴:在安裝了新的吸液嘴或增大了容量值以后,應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放兩到三次,確保移液工作的精度和準(zhǔn)度;移液器的操作方法5吸液:先將四指并攏握住移液器上部,用拇指按住塞桿頂端的按
5、鈕,向下按到第一停點,再將吸頭垂直浸入液面2~3mm,緩慢平穩(wěn)松開按鈕,吸上液體,并停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間);移液器的操作方法6移液:緩慢抬起移液器取出吸液嘴,確保吸液嘴外壁無殘留液體??捎枚ㄐ詾V紙抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿觸及吸液嘴口;7目測吸入的液體體積是否合理;8放液:將吸液嘴貼到容器內(nèi)壁并保持20°-40°傾斜,平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點,停1-2s(粘性大的液體要加長停留時間)后,繼續(xù)按壓到第二停點,排出殘余液體。松開按鈕,然后將吸液嘴沿著內(nèi)壁向上移開;9按吸頭彈射器除去吸頭,吸取不同樣本液體時必須更
6、換吸頭;移液器的操作方法1正確填充吸頭當(dāng)某一吸頭的建議(標(biāo)稱)范圍為最大吸頭容量(標(biāo)稱容量)的10%至100%時,可在35%至100%這一較小以及優(yōu)化的范圍內(nèi)實現(xiàn)最高精確度。在此范圍內(nèi)移液會減少對操作人員技法的要求,并可將結(jié)果準(zhǔn)確度提高。當(dāng)達(dá)到標(biāo)稱容量的50%時可提供最佳結(jié)果。2吸液時保持垂直入液角使入液角盡可能地接近垂直位置,否則垂直液柱較小,這樣將會吸入過多樣品。分液時,吸頭應(yīng)當(dāng)與容器壁保持較小角度,從而確保良好的排液效果。3分液技法對于大多數(shù)應(yīng)用而言,建議在分液時將吸頭的末端貼靠容器壁。這可減少或者消除分液后殘留在吸頭上的樣品。沿
7、側(cè)壁向上滑動吸頭末端將移液器撤下,從而去除吸頭孔處的任何殘留液滴。移液器的使用注意事項4吸頭入液深度正確的吸頭入液深度對于微量移液器尤為重要。如果吸頭入液過深,則隨著壓力的加大,吸液量將會增多。保留在吸頭表面的液體會影響結(jié)果。如果吸頭入液太淺,則會造成空氣進(jìn)入,從而產(chǎn)生氣泡以及導(dǎo)致容量不準(zhǔn)確。正確的入液深度可使準(zhǔn)確度提高達(dá)5%。移液器容量入液深度2與10ul1mm20與100ul2-3mm200與1000ul3-6mm5000ul與10ML6-10mm移液器的使用注意事項5吸頭入液時間在將樣品吸入吸頭時,在樣品中的入液時間是良好移液技法
8、中的關(guān)鍵因素。在平穩(wěn)松開定位銷按鈕之后,必須進(jìn)行短暫暫停,然后再從樣品中取出,以確保將全量樣品吸入吸頭中。如果量較大以及對于粘性物質(zhì)而言,必須在等候較長時間后再取出,因為移液器中的氣室需要一秒鐘的時間才能實