實(shí)驗(yàn) 維生素C測(cè).ppt

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1、實(shí)驗(yàn)四維生素C測(cè)定固藍(lán)鹽B分光光度法【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆展趟{(lán)鹽B分光光度法測(cè)定維生素C的原理;2.熟悉固藍(lán)鹽B分光光度法測(cè)定維生素C的測(cè)定方法?!緦?shí)驗(yàn)原理】在乙酸溶液中,維生素C與固藍(lán)鹽B反應(yīng)生成黃色的草酰肼-2-羥基丁酰內(nèi)酯衍生物。在420nm處測(cè)定吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。儀器紫外可見分光光度計(jì)試劑乙酸鋅溶液:亞鐵氰化鉀溶液:乙酸溶液(2mol/L):乙酸溶液(0.5mol/L):乙二胺四乙酸二鈉溶液(0.25mol/L);固藍(lán)鹽B溶液(2g/L):抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(2.0g/L):抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(0.1g/L):(臨用時(shí)配制)。【方法】1.基本步驟:用

2、框或圖形表示流程。2.操作:(1)試樣溶液的制備蔬菜、水果:稱取鮮樣可食部分600g獼猴桃于搗碎機(jī)中,加等量的乙酸溶液(2mol/L),搗碎、混勻。取20ml均漿至100ml容量瓶中,用水稀釋至刻度,混勻。濾紙過濾,濾液備用。不易過濾的試樣可用離心機(jī)離心后,上清液供測(cè)定。(2)樣品測(cè)定管號(hào)12345679樣品vitaC標(biāo)使液0ml0.2ml0.4ml0.6ml0.8ml1.0ml1.5ml2.0ml20ml乙二胺四乙酸二鈉溶液各0.3ml(搖勻)0.5mol/L乙酸溶液各0.5ml固藍(lán)鹽B溶液搖勻各1.25ml蒸餾水至10ml,混勻(2)樣品測(cè)定將上述10個(gè)管,靜置

3、20分鐘以后,用1cm比色皿,以標(biāo)準(zhǔn)0管調(diào)節(jié)零點(diǎn),在分光光度計(jì)420nm處測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度。以測(cè)出的吸光度對(duì)維生素C含量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算回歸方程。計(jì)算X─樣品中抗壞血酸含量,單位為mg/KgA─測(cè)定液吸光度m──試樣質(zhì)量,單位為g【注意事項(xiàng)】1.抗壞血酸有較強(qiáng)的還原性,很容易被氧化,因此操作過程要迅速,并盡量避免與金屬離子接觸。2.本法適用于各類食品中還原型抗壞血酸的測(cè)定,不適用于脫氫型抗壞血酸的測(cè)定。【檢測(cè)結(jié)果意義】維生素C促進(jìn)體內(nèi)膠原的形成,促進(jìn)鐵的吸收,降低血膽固醇,減緩動(dòng)脈粥樣硬化,增強(qiáng)免疫力,促進(jìn)傷口愈合,具有防癌抗癌的作用;缺乏時(shí)可引起牙齦出血、皮

4、膚出現(xiàn)淤血點(diǎn)、骨鈣化不正常、傷口愈合緩慢、出現(xiàn)壞血病。

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