資源描述：
《蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、.蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選組別：第*組班級：生工**班組員：***指導(dǎo)老師：***一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)從自然界中分離蛋白酶產(chǎn)生菌范文.二、實驗內(nèi)容蛋白酶產(chǎn)生菌的分離三、實驗原理許多細(xì)菌和霉菌產(chǎn)生蛋白酶，細(xì)菌中的芽孢桿菌是最常見的蛋白酶產(chǎn)生菌。本實驗將土壤樣品懸液加熱處理，殺死非芽孢細(xì)菌及其他微生物后進行劃線分離得到芽孢桿菌，將其接種到奶粉培養(yǎng)平板并進行培養(yǎng)，根據(jù)奶粉平板的水解圈做初篩。將初篩的蛋白酶產(chǎn)生菌接入產(chǎn)酶培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，測定蛋白酶的活力，最終得到產(chǎn)蛋白酶的芽孢桿菌。也可直接將細(xì)菌接種到奶粉培養(yǎng)平板進行培養(yǎng)，分離篩選其他蛋白酶產(chǎn)生菌。四、實驗材
2、料和用具1.材料：土壤樣品2.試劑：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)及平板、奶粉培養(yǎng)基平板、45mL無菌水（帶玻璃珠）、芽孢染色液、3.儀器及用具：紫外分光光度計、顯微鏡、恒溫水浴鍋、搖床、酒精燈、接種針、游標(biāo)卡尺、無菌移液管、無菌試管、量筒、容量瓶、漏斗、試劑瓶、漏斗、載玻片、濾紙、擦鏡紙。五、操作步驟范文.（一）配制所需培養(yǎng)基按照以下配方配制所需的培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏0.5g，蛋白胨1g，NaCl0.5g，瓊脂1.5～2.0g，水100ml，pH7.2配制200mL奶粉培養(yǎng)基：牛肉膏0.5g，蛋白胨1g，NaCl0.5g，瓊脂2.0g，水1
3、00ml，pH7.0～7.2脫脂奶粉3g，配制200mL（二）分離1.采集土壤樣品，用無菌水植被1:10土壤懸液。2.取1:10土壤懸液5mL，注入已滅過菌的試管中，將此試管放入75～80℃水浴中熱處理10min以殺死非芽孢細(xì)菌。3.取加熱處理過的土壤懸液100～200μL，涂布接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)平板，后將平板倒置，于30～32℃下培養(yǎng)24～48h.4.對長出的單菌落進行編號，選擇表面干燥、粗糙、不透明的菌落，挑取少許菌苔涂片，做芽孢染色，判斷是否為芽孢桿菌。（三）篩選1、從判定為芽孢桿菌的菌落處，分別挑取少許菌苔，先接種奶粉斜面培養(yǎng)基
4、，再轉(zhuǎn)接奶粉培養(yǎng)基平板上，30～32℃范文.下培養(yǎng)24～48h。2、選擇水解圈直徑與菌落直徑比值大的菌，接入牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基30-32℃振蕩培養(yǎng)48小時，將發(fā)酵液過濾或離心，取清夜檢測蛋白酶活力進行復(fù)篩。六、實驗結(jié)果：相關(guān)圖片：范文.范文.（2）菌株的分離根據(jù)菌落大小、形狀、表面光澤、隆起程度、透明程度、邊緣性狀和菌落顏色的差別，最終從培養(yǎng)基上篩選出23個菌落。（3）將分離到的菌株分別接種到含脫脂奶粉的培養(yǎng)基上，置于32℃培養(yǎng)60h，于室溫下觀察是否產(chǎn)生細(xì)胞外蛋白酶，分解培養(yǎng)基中的脫脂牛奶，進而產(chǎn)生肉眼可見的水解透明圈。結(jié)果表明，在接種的
5、23株菌落中，共有18株產(chǎn)生胞外蛋白酶分解脫脂牛奶，形成肉眼可見的透明圈。從中篩選出9株水解圈與菌落直徑比值較大的菌株。如下表：菌株編號123456789比值+++++++++++++說明：“+”表示：水解圈與菌落直徑比值約為3：1，“++”范文.表示：水解圈與菌落直徑大于3：1.。六、結(jié)果分析在奶粉培養(yǎng)基平板上，蛋白質(zhì)被孢芽桿菌產(chǎn)生的蛋白酶水解，形成透明圈（見實驗相關(guān)圖片）。不同種類的微生物產(chǎn)生的蛋白酶的種類和活力各不相同，起對奶粉中蛋白質(zhì)的水解能力各不相同，所形成的水解圈與菌落大小比值故而不同，因而根據(jù)其比值可初步斷定其對奶粉中蛋白質(zhì)的
6、水解能力。組員簽字：歡迎您的光臨，wdrd文檔下載后可以修改編輯。雙擊可以刪除頁眉頁腳。謝謝！單純的課本內(nèi)容，并不能滿足學(xué)生的需要，通過補充，達(dá)到內(nèi)容的完善教育之通病是教用腦的人不用手，不教用手的人用腦，所以一無所能。教育革命的對策是手腦聯(lián)盟，結(jié)果是手與腦的力量都可以大到不可思議。范文
