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《高溫蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選及其產(chǎn)酶條件和酶學(xué)性質(zhì)分析》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、生物技術(shù)通報·研究報告·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2011年第3期高溫蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選及其產(chǎn)酶條件和酶學(xué)性質(zhì)分析廉立慧高麗君王德才張顯忠李艷玲(泰山醫(yī)學(xué)院生物科學(xué)系，泰安271000)摘要:從徂徠山溫泉附近土樣中分離到9株產(chǎn)高溫蛋白酶菌株，選取一株堿性蛋白酶高產(chǎn)菌株L7為出發(fā)菌株，進(jìn)行顯微形態(tài)、16SrRNA基因序列分析，將其初步鑒定為短芽孢桿菌(Brevibacillussp．)。研究該菌株發(fā)酵條件，確定產(chǎn)酶的最佳培養(yǎng)基組成為葡萄糖40g/L，蛋白胨20g/L，磷酸氫二鈉1．4g/L，氯化鈣0．6g/L，硫酸鎂0．4g/L，通過培養(yǎng)基優(yōu)化，酶活
2、達(dá)到103．08U/mL。最佳培養(yǎng)條件為250mL三角燒瓶中裝液量50mL、pH8．0、培養(yǎng)溫度為55℃、培養(yǎng)時間為24h。對該菌株酶學(xué)性質(zhì)研究，L7菌株所產(chǎn)高溫蛋白酶的最適溫度為55℃，最適pH為10，并且具有良好的溫度穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性，酶活性受PMSF強(qiáng)烈抑制。關(guān)鍵詞:短芽孢桿菌高溫蛋白酶發(fā)酵條件酶學(xué)性質(zhì)ScreeningofThermostableProtease-producingBacteriumandAnalysisofFermentationConditionsandProteasePropertiesLianLihuiGaoLijunWangDe
3、caiZhangXianzhongLiYanling(DepartmentofBiologicalSciences，TaishanMedicalCollege，Taian271000)Abstract:NinethermophilicbacterialstrainswiththermophilicproteaseactivitywerecollectedfromthesoilaroundahotspringinMountainCulai．Thestrainwhichshowedhighproteaseactivitywasselectedforproteaseas
4、sayandnamedasL7．Basedonmorpho-logicalcharacteristicsand16SrRNAgenesequenceanalysis，strainL7wasidentifiedasBrevibacillussp．．Theoptimalmediumcom-ponentswereglucose40g/L，peptone20g/L，Na2HPO41．4g/L，CaCl20．6g/L，MgCl20．4g/L．Theproteaseactivitycanachieve103．08U/mLthroughthemediumoptimization
5、．Theoptimalcultureconditionswere50mLmediumin250mLErlenmeyerflask，ini-tialpH8．0，at55℃for24h．Enzymaticpropertiesshowedthattheenzymeoptimaltemperatureis55℃，optimumpH10.0．Theen-zymeexhibitedhighthermalstabilityandstableatawiderangeofpH，anditsactivityisintensivelyconstrainedbyPMSF．Keywords
6、:Brevibacillussp．ThermophilicproteaseFermentationconditionEnzymaticproperties蛋白酶作為一類廣泛用于工業(yè)生產(chǎn)和研究用的產(chǎn)高溫蛋白酶的高溫短芽孢桿菌，命名為Brevi-酶，在洗滌劑、制革脫毛、生絲脫膠、有機(jī)合成、酒類bacillussp．strainL7，對其產(chǎn)酶條件及一些酶性質(zhì)澄清、明膠及蛋白胨生產(chǎn)、肉質(zhì)嫩化和醫(yī)藥等方面應(yīng)進(jìn)行研究。［1］用廣泛，占酶制劑市場65%的份額。高溫蛋白酶1材料與方法具有耐熱、耐變性劑和耐有機(jī)溶劑等優(yōu)點(diǎn)，在蛋白酶1．1材料［2］應(yīng)用的各個領(lǐng)域顯示出極大的潛力。20
7、世紀(jì)50、采集土壤來自徂徠山溫泉周圍。在溫泉周圍60年代，國外學(xué)者已開始了高溫菌產(chǎn)高溫蛋白酶的［7］［3，4］16個方位采集土樣，－20℃冷凍保存。研究，至今有許多這方面的報道。國內(nèi)對高溫菌的研究起步較晚，所篩選到的菌株產(chǎn)高溫蛋白酶1．2主要培養(yǎng)基［5，6］分離培養(yǎng)基(1L):酵母膏1g，蛋白胨2g，硫的能力也不高。本研究從溫泉樣品中篩選得到一株活性較高酸銨3g，硫酸鉀0.5g，氯化鉀0.1g，甘氨酸0.7收稿日期:2010-08-24基金項(xiàng)目:泰山醫(yī)學(xué)院青年基金項(xiàng)目作者簡介:廉立慧，女，碩士，講師，研究方向:微生物學(xué);E-mail:lianlihui@yahoo
8、．com．
