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《產(chǎn)耐熱蛋白酶乳酸菌的篩選、產(chǎn)酶條件及其酶學性質(zhì)的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、※生物工程食品科學2008,Vol.29,No.10375產(chǎn)耐熱蛋白酶乳酸菌的篩選、產(chǎn)酶條件及其酶學性質(zhì)的研究方芳,冀林立,張彥斌,張和平,孟和畢力格*(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學乳品生物技術與工程教育部重點實驗室,內(nèi)蒙古呼和浩特010018)摘要:從內(nèi)蒙古部分傳統(tǒng)發(fā)酵乳樣品以及酸菜湯中分離到105株乳酸菌,用檢測蛋白酶產(chǎn)生水解圈和福林酚蛋白酶活性測定相結合的方法,從中篩選出一株耐熱蛋白酶產(chǎn)生菌株WH29-3-1,該菌株經(jīng)初步鑒定為Enterococcusfaecium。同時,對其產(chǎn)酶條件及酶學性質(zhì)進行研究。結果表明,菌株WH29-3-1是在以葡萄糖為碳源、蛋白胨+牛肉膏+酵母粉為氮源、碳氮比為
2、0.8、pH7.0的最適產(chǎn)酶培養(yǎng)基中45℃、接種量為4%的條件下發(fā)酵培養(yǎng)30h,具有最大產(chǎn)酶量13.13U/ml,且K2HPO4、MgSO4有促進蛋白酶產(chǎn)生的作用。由菌株WH29-3-1產(chǎn)生的耐熱蛋白酶的最適作用pH值為7,最適作用溫度為50℃。結果表明,該菌是一株具有進一步改造利用價值的產(chǎn)蛋白酶菌株。關鍵詞:乳酸菌;耐熱蛋白酶;酶活力ScreeningofThermoduricProteinase-ProducingLacticAcidBacteria,ConditionsofEnzymeProductionandPropertiesofProducedThermoduricPro
3、teinaseFANGFang,JILin-li,ZHANGYan-bin,ZHANGHe-ping,MENGHEBILIGE*(KeyLaboratoryofDairyBiotechnologyandEngineering,MinistryofEducation,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Huhhot010018,China)Abstracts:105strainsoflacticacidbacteriawereisolatedandidentifiedfromdairyproductsandsourcabbagesoupinBayan
4、haotefoInnerMongolia,andastrainproducingthermoduricproteinase,namedEnterococcusfaecium,wasscreenedfromthelacticacidbacteriabydetectinghydrolysiscircleofproteinaseanditsactivity.Theexperimentalresultsrevealedthattheoptimalconditionsforproducingthermoduricproteinaseareasfollows:glucoseascarbonand
5、peptoneplusbeefextractplusyeastpowderasnitrogensources,carbon-nitrogenratio0.8;inoculumsize4%,pH7.0,fermentationtemperature45℃andfermentationtime30h.Undertheseconditions,theyieldofthermoduricproteinaseis13.13U/ml.ItwasfoundthatK2HPO4andMgSO4canpromotetheproductionofthermoduricproteinase.Theacti
6、vityofthisenzymeisthehighestatpH7and50℃.Basedontheaboveresults,thestrainispromisinginproducingthermophilicproteinase.Keywords:lacticacidbacteria;thermoduricproteinase;proteinaseactivity中圖分類號:TS201.3文獻標識碼:A文章編號:1002-6630(2008)10-0375-05蛋白酶是一種重要的工業(yè)用酶,其生產(chǎn)幾乎占酶制限制[4]。耐熱蛋白酶是一類在高溫下仍能保持一定活性劑市場的65%以上[1]
7、,廣泛運用于食品、藥物、皮革的蛋白酶的總稱。它來源于高溫微生物(即生長溫度在制備、蛋白水解和紡織工業(yè)等[2-3]。常溫蛋白酶作為生45~55℃范圍的微生物[8])、嗜熱微生物(即在55℃以上能物大分子的活性物質(zhì),因其在保存和應用的過程中常常生長的微生物[9])。耐熱蛋白酶由于具有顯著的熱穩(wěn)定性出現(xiàn)不穩(wěn)定的現(xiàn)象,特別是在高溫、強酸、強堿和高及其對有機溶劑、去垢劑和變性劑有較強的抗性而在蛋滲等極端的條件下易失活,在工業(yè)應用上受到了較大的白酶應用的各個領域顯示出