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《一株高產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件（.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、一株高產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件*基金項目：廣東高校特色調(diào)味品工程技術(shù)開發(fā)中心建設(shè)項目（GCZX-B1103），廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項目（2012B091000040），廣東輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院自然科學(xué)啟動基金項目（KJ201307），廣東輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院自然科學(xué)啟動基金項目（KJ201203）。第一作者簡介：林玩莊（1994.11-），女，研究方向為生物技術(shù)。林玩莊，林淑娜，陳汶聰，劉榮蓮，黃可佳，黃丹敏，謝桂仁，陳宇豹，鄧毛程，王瑤，李靜廣東輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣州，510300摘要：為了提
2、高水產(chǎn)行業(yè)蛋白質(zhì)資源的綜合利用率，從南海海域大型魚類的腸道中篩選蛋白酶高產(chǎn)菌株。采用平板透明圈法和搖瓶發(fā)酵法進行篩選，獲得一株蛋白酶高產(chǎn)菌株P(guān)E11。通過菌體形態(tài)觀察、生理生化實驗和16SrDNA鑒定，菌株P(guān)E11被鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)。通過搖瓶發(fā)酵試驗，優(yōu)選出可溶性淀粉和牛肉膏分別為最佳的碳源和氮源，并確定菌株P(guān)E11產(chǎn)蛋白酶的最佳條件為：溫度30°C、初始pH7.0、轉(zhuǎn)速200rpm和時間36h。在最佳的產(chǎn)酶條件下，發(fā)酵液中的蛋白酶活力可
3、達376U/mL。關(guān)鍵詞：蛋白酶；高產(chǎn)；篩選；產(chǎn)酶條件Studyonscreeningandenzyme-producingconditionsofahighproteaseproducingstrainLINGWan-zhuang,LINGShu-Na,CHENWen-cong,LIURong-lian,HUANGKe-jia,HUANGDan-min,XIEGui-ren,CHENYu-bao,DENGMao-cheng,WANGYao,LIJing(GuangdongIndustryTec
4、hnicalCollege,Guangzhou510300)Abstract：Inordertoimprovethecomprehensiveutilizationrateofproteinresourcesfromaquaticindustry,strainshavingtheabilitytoproduceproteasewereisolatedandscreenedfromthegastrointestinaltractoflargefishofSouthChinaSea.Usingfla
5、ttransparentcircleandshakeflaskfermentationtest,ahighproducingproteasestrainPE11wasobtained.ThestrainPE11wasidentifiedasBacillusamyloliquefaciensthroughthesystematicinvestigationsofmorphology,physiologicalandbiochemicalcharacteristicsand16SrDNAsequen
6、cesanalysis.Bymeansofshakeflaskfermentationtests,theoptimalcarbonresourceandnitrogenresourceforstrainPE11weresolublestarchandbeefextract,respectively.Inaddition,thebestconditionsforprotease-producingweredeterminedastemperatureof30°C,initialpHof7.0and
7、rotationspeedof200rpm.Attheoptimalcondition,thehighestproteaseactivityoffermentationbrothreached376U/mL.Keywords：protease；highproducing；screening；enzyme-producingcondition引言近年來，我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖量和加工量一直居世界首位[1-2]。但是，在捕撈和加工過程中，低值水產(chǎn)品往往占總產(chǎn)量的30%~50%[3-4]。如果這些低值水產(chǎn)品得
8、不到高值化利用，將造成大量蛋白質(zhì)資源的浪費。隨著人們對低值水產(chǎn)品綜合利用的重視，蛋白酶及其高產(chǎn)菌種的應(yīng)用日益增加。為了直接利用高產(chǎn)蛋白酶菌種對低值水產(chǎn)品進行開發(fā)高值化產(chǎn)品，本實驗主要篩選蛋白酶高產(chǎn)菌種，以及初步研究所得菌種的產(chǎn)酶條件。1材料與方法1.1篩選材料與試劑篩選材料：南海海域大型魚類的腸道組織；酪氨酸：分析純，市售；Folin試劑及其它試劑：分析純，市售。1.2培養(yǎng)基富集培養(yǎng)基：葡萄糖40g/L，蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，Na2HPO42g/L，KH2PO41g/L，MgSO4·
