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《高產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件的優(yōu)化.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、ScreeningandIdentificationofEfficientCellulase-producingFungusandOptimizationofTheFermentationConditionbyLUChenAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScience1nBiochemistryandMolecularBiologyinCentralSouthUniversityofForestryandTech
2、nology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangshaHunan410004，ER．CHINASupervisorProfessorChenJienanandProfessorWANGYiqiangDecember,2012㈣III1111111111IUlIIIY2259341中南林業(yè)科技大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導師的指導下獨立進行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品，也不包含為
3、獲得中南林業(yè)科技大學或其他教育機構的學位或證書所使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式表明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名：磚曲f乙年f2月lf日中南林業(yè)科技大學學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件或電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權中南林業(yè)科技大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于：1、保密
4、口，在年解密后適用本授權書。2、不保密口。，作者簽名：?壤導師簽名：嘶辛糾孟aof二年(≯月lf日跏c許f≯月If日碩十學位論文高產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件的優(yōu)化摘要木質(zhì)纖維是自然界最豐富的可再生資源，約占整個植物細胞干重的90％左右。一般來說，木質(zhì)纖維素中含纖維素45％、半纖維素25％和木質(zhì)素30％。利用纖維素酶的催化作用，可以將纖維素組分降解為還原糖形式應用于乙醇發(fā)酵等領域，并且不會對環(huán)境造成污染和產(chǎn)生能量消耗。就目前國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，纖維素酶活力不高是限制木質(zhì)纖維資源利用的主要因素之一，高產(chǎn)纖維素酶菌種的選育成為關鍵。利
5、用羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)法、剛果紅染色法、濾紙崩解法和胞外纖維素酶活性測定法，從湖北神農(nóng)架保護區(qū)不同區(qū)域采集的森林腐質(zhì)土壤中分離篩選得到一株纖維素酶高產(chǎn)菌B．5。結合菌落形態(tài)觀察、顯微鏡觀察和ITS序列同源性分析，確定該菌株為鐮刀菌屬(Fusariumsp)，與木賊鐮刀菌(FusariumEquiseti)lfH{以度達99％。濾紙崩解實驗顯示該菌72h對濾紙具有明顯崩解能力，失重率達37．9％。以羧甲基纖維素鈉為碳源，蛋白胨為氮源，28℃，180r／min，培養(yǎng)4d，其初始酶活為FPA酶活(FPase)2．09IU／mL，CMC酶活
6、(CMCase)5．20IU／mL。通過產(chǎn)酶條件優(yōu)化，確定稻草秸稈粉為唯一碳源，250mL的三角瓶中裝發(fā)酵液80mL，培養(yǎng)基初始pH為6．1，氮源添加量為1．0％，碳源添加量為2．5％，鼠李糖脂加量為O．1％，在溫度為28℃，搖床轉速為180r／min的條件下培養(yǎng)120h，最終B．5菌FPA酶活達到2．504IU／mL。研究得到鐮刀菌B一5所產(chǎn)纖維素酶酶促反應的較適條件：4000r／min，10min離心條件獲得粗酶液，溫度控制在55。C，初始pH調(diào)至5．0，反應時間為標準的60min。在10mmol／L濃度下，不同金屬離子對鐮刀
7、菌B．5所產(chǎn)纖維素酶酶活性的影響結果為：C02+、Mn2+、Mf+和Fe2+是酶促離子，Na+、K+和Ca2+對酶活無明顯作用，cu2+和Zn2+對纖維素酶的活性有抑制作用，其中Cu2+的抑制作用較強。關鍵詞：纖維素酶；真菌；篩選鑒定；條件優(yōu)化碩士學位論文高產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件的優(yōu)化AbstractLignocelluloseisthemostabundantrenewableresourceinnature，accountingformorethan90％ofplantcelldryweight．Ingeneral，
8、lignocelluloseiscomposedof45％cellulose，25％hemicelluloseand30％lignin．Celluloseasthepredominentcomponentcanbedegradatedintored
