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《一株高產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件(》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、一株高產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件*基金項目:廣東高校特色調(diào)味品工程技術(shù)開發(fā)中心建設(shè)項目(GCZX-B1103),廣東省教育部產(chǎn)學研結(jié)合項目(2012B091000040),廣東輕工職業(yè)技術(shù)學院自然科學啟動基金項目(KJ201307),廣東輕工職業(yè)技術(shù)學院自然科學啟動基金項目(KJ201203)。第一作者簡介:林玩莊(1994.11-),女,研究方向為生物技術(shù)。林玩莊,林淑娜,陳汶聰,劉榮蓮,黃可佳,黃丹敏,謝桂仁,陳宇豹,鄧毛程,王瑤,李靜廣東輕工職業(yè)技術(shù)學院,廣州,510300摘要:為了提高水產(chǎn)行業(yè)蛋白質(zhì)資源的綜合利用率,從南海海域大型魚類的腸道中篩選蛋白酶高產(chǎn)菌株。采
2、用平板透明圈法和搖瓶發(fā)酵法進行篩選,獲得一株蛋白酶高產(chǎn)菌株P(guān)E11。通過菌體形態(tài)觀察、生理生化實驗和16SrDNA鑒定,菌株P(guān)E11被鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)。通過搖瓶發(fā)酵試驗,優(yōu)選出可溶性淀粉和牛肉膏分別為最佳的碳源和氮源,并確定菌株P(guān)E11產(chǎn)蛋白酶的最佳條件為:溫度30°C、初始pH7.0、轉(zhuǎn)速200rpm和時間36h。在最佳的產(chǎn)酶條件下,發(fā)酵液中的蛋白酶活力可達376U/mL。關(guān)鍵詞:蛋白酶;高產(chǎn);篩選;產(chǎn)酶條件Studyonscreeningandenzyme-producingconditionsofahighpro
3、teaseproducingstrainLINGWan-zhuang,LINGShu-Na,CHENWen-cong,LIURong-lian,HUANGKe-jia,HUANGDan-min,XIEGui-ren,CHENYu-bao,DENGMao-cheng,WANGYao,LIJing(GuangdongIndustryTechnicalCollege,Guangzhou510300)Abstract:Inordertoimprovethecomprehensiveutilizationrateofproteinresourcesfromaquaticindustry
4、,strainshavingtheabilitytoproduceproteasewereisolatedandscreenedfromthegastrointestinaltractoflargefishofSouthChinaSea.Usingflattransparentcircleandshakeflaskfermentationtest,ahighproducingproteasestrainPE11wasobtained.ThestrainPE11wasidentifiedasBacillusamyloliquefaciensthroughthesystemati
5、cinvestigationsofmorphology,physiologicalandbiochemicalcharacteristicsand16SrDNAsequencesanalysis.Bymeansofshakeflaskfermentationtests,theoptimalcarbonresourceandnitrogenresourceforstrainPE11weresolublestarchandbeefextract,respectively.Inaddition,thebestconditionsforprotease-producingwerede
6、terminedastemperatureof30°C,initialpHof7.0androtationspeedof200rpm.Attheoptimalcondition,thehighestproteaseactivityoffermentationbrothreached376U/mL.Keywords:protease;highproducing;screening;enzyme-producingcondition引言近年來,我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖量和加工量一直居世界首位[1-2]。但是,在捕撈和加工過程中,低值水產(chǎn)品往往占總產(chǎn)量的30%~50%[3-4]。如果這些低值
7、水產(chǎn)品得不到高值化利用,將造成大量蛋白質(zhì)資源的浪費。隨著人們對低值水產(chǎn)品綜合利用的重視,蛋白酶及其高產(chǎn)菌種的應(yīng)用日益增加。為了直接利用高產(chǎn)蛋白酶菌種對低值水產(chǎn)品進行開發(fā)高值化產(chǎn)品,本實驗主要篩選蛋白酶高產(chǎn)菌種,以及初步研究所得菌種的產(chǎn)酶條件。1材料與方法1.1篩選材料與試劑篩選材料:南海海域大型魚類的腸道組織;酪氨酸:分析純,市售;Folin試劑及其它試劑:分析純,市售。1.2培養(yǎng)基富集培養(yǎng)基:葡萄糖40g/L,蛋白胨10g/L,酵母膏5g/L,Na2HPO42g/L,KH2PO41g/L,MgSO4·