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1、二、志賀氏菌的檢驗(yàn)志賀氏菌的檢驗(yàn)志賀氏菌屬于腸桿菌科志賀氏菌屬,根據(jù)生化特性不同將其分為四個(gè)群:A群--痢疾志賀氏菌;B群----福氏志賀氏菌C群--鮑氏志賀氏菌;D群----宋內(nèi)氏志賀氏菌志賀氏菌屬的細(xì)菌統(tǒng)稱痢疾桿菌.臨床上能引起痢疾癥狀的病原微生物很多,如志賀氏菌屬、沙門氏菌屬、變形桿菌屬、埃希氏菌屬等,還有阿米巴原蟲及病毒等。其中以志賀氏菌屬引起的細(xì)菌性痢疾最為常見,是細(xì)菌性痢疾的主要病原菌。通過食品和飲水傳播,引起人的疾病。人對(duì)志賀氏菌的易感性很高,人是它的唯一宿主。所以在食物和飲用水的衛(wèi)生檢驗(yàn)時(shí),常以是否含有志賀氏菌作為指標(biāo)。志賀氏菌的檢驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庵?/p>
2、賀氏菌生物學(xué)特性及原理掌握志賀氏菌檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)志賀氏菌的方法很多,但食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)具有法規(guī)性,檢驗(yàn)必須采用國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法。近年來發(fā)展了許多快速檢驗(yàn)的新方法,如技術(shù)等。我們下面介紹的方法即是國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法。要弄清檢驗(yàn)原理,首先需要了解志賀氏菌的生物學(xué)特性。志賀氏菌的檢驗(yàn)二、志賀氏菌的生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色:革蘭氏陰性無芽胞桿菌,無莢膜,無鞭毛,不運(yùn)動(dòng),有菌毛。革蘭氏陰性鮑氏志賀菌志賀氏菌的菌毛志賀氏菌掃描電鏡照片志賀氏菌掃描電鏡照片志賀氏菌的透射電鏡照片二、志賀氏菌的生物學(xué)特性2、志賀氏菌的培養(yǎng)特性:需氧或兼性厭氧。營養(yǎng)要求不高,能在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng),最適
3、溫度為37℃,最適pH為6.4-7.8。37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)后菌落呈圓形、微凸、光滑濕潤、無色、半透明、邊緣整齊,直徑約2mm,宋內(nèi)氏菌菌落一般較大,較不透明,并常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長(zhǎng),一般不形成沉淀,無菌膜形成。菌落形態(tài)學(xué)關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等,都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。福氏志賀氏菌的菌落特征宋內(nèi)志賀菌乳糖遲發(fā)酵菌株在麥康凱平板上的菌落特征細(xì)菌在肉湯培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)均勻渾濁生長(zhǎng)是什么意思?二、志賀氏菌的生物學(xué)特性3、志賀氏菌的生化特性:本菌屬都能分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。大多不發(fā)酵乳糖,僅宋內(nèi)氏菌遲緩發(fā)酵乳糖。靛
4、基質(zhì)產(chǎn)生不定,甲基紅陽性,VP試驗(yàn)陰性,不分解尿素,不產(chǎn)生H2S。與腸桿菌科各屬細(xì)菌相比較,志賀氏菌的主要鑒別特征為不運(yùn)動(dòng),對(duì)各種糖的利用能力較差,并且在含糖的培養(yǎng)基內(nèi)一般不形成可見氣體。根據(jù)生化反應(yīng)可進(jìn)行初步分類。不發(fā)酵乳糖和發(fā)酵乳糖菌落二、志賀氏菌的生物學(xué)特性4、志賀氏菌的抗原構(gòu)造與分型:志賀氏菌屬細(xì)菌的抗原結(jié)構(gòu)由菌體抗原(O)及表面抗原(K)組成。主要抗原有三種:型特異性抗原、群特異性抗原、表面抗原(K抗原)。根據(jù)抗原構(gòu)造的不同,按最新國際分類法,將本屬細(xì)菌分為四個(gè)群、39個(gè)血清型(包括亞型)附:志賀氏菌抗原分類。附:志賀氏菌抗原分類抗原構(gòu)造與分型:志賀氏菌屬細(xì)
5、菌的抗原結(jié)構(gòu)由菌體抗原(O)及表面抗原(K)組成。主要抗原有三種:型特異性抗原:型多糖抗原為菌體抗原的一種,是光滑型菌株所含有的重要抗原。當(dāng)菌株變?yōu)榇植谛蜁r(shí),此抗原也常隨之消失,各菌型所含的型抗原不同,可用于區(qū)別菌種的型別。群特異性抗原:為光滑型菌株的次要抗原,也是菌體抗原的一種。特異性較低,常在數(shù)種近似的菌內(nèi)出現(xiàn)。在福氏菌株中,由于所含群抗原不同,可將某些菌型分為多種亞型,如福氏菌2型,根據(jù)群抗原不同,可分成2a、2b兩個(gè)亞型。表面抗原(K抗原):在新分離的某些菌株菌體表面含有此種抗原。不耐熱,加熱100℃1小時(shí)即被破壞。具有此種抗原的菌株,可阻止菌體抗原與相應(yīng)免疫
6、血清發(fā)生凝集。志賀氏菌屬的四個(gè)群根據(jù)抗原構(gòu)造的不同,按最新國際分類法,將本屬細(xì)菌分為四個(gè)群、39個(gè)血清型(包括亞型)A群:也稱志賀氏菌群,有10個(gè)血清型。不發(fā)酵甘露醇,無鳥氨酸脫羧酶,與其他各群細(xì)菌無血清學(xué)聯(lián)系。B群:也稱福氏菌群,已有13個(gè)血清型(包括亞型和變種)。最近又發(fā)現(xiàn)3個(gè)亞型(1c、4c、5b)。發(fā)酵甘露醇,無鳥氨酸脫羧酶??乖Y(jié)構(gòu)較復(fù)雜,各型間有交叉凝集。每一福氏菌型具有二種抗原,即型特異性抗原和群抗原,前者只存在于同型菌株中,后者有許多種,存在于福氏各菌型中。例如福氏1b型除含有1型特異性抗原外,尚含有4、6群抗原。C群:也稱鮑氏菌群,有15個(gè)血清型,分
7、解甘露醇,無鳥氨酸脫羧酶。各型內(nèi)無交叉凝集。D群:也稱宋內(nèi)氏菌群,僅有一個(gè)血清型。分解甘露醇,有鳥氨酸脫羧酶,遲緩發(fā)酵乳糖。有Ⅰ(S相光滑菌落)、Ⅱ相(R粗糙菌落)之分。福氏志賀菌在HE瓊脂平板上的菌落特征藍(lán)綠色大腸埃希菌紅色較大二、志賀氏菌的生物學(xué)特性5、志賀氏菌的抵抗力:志賀氏菌屬與沙門氏菌屬及其他腸道桿菌相比,對(duì)理化因素抵抗力較低,對(duì)酸較敏感,必須使用含有緩沖劑的培養(yǎng)基。在外界環(huán)境中的生存力,以宋內(nèi)氏最強(qiáng),福氏菌次之,痢疾志賀氏菌最弱。一般在潮濕土壤中能存活34天,37℃水中存活20天,在糞便內(nèi)(室溫)存活11天。日光直接照射30分鐘,56-6