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1、一.原核生物基因表達(dá)調(diào)控概述隨著生物個(gè)體的發(fā)育,DNA分子能有序地將其所承載的遺傳信息,通過密碼子-反密碼子系統(tǒng)轉(zhuǎn)變成蛋白質(zhì),執(zhí)行各種生理生化功能。科學(xué)家把從DNA到蛋白質(zhì)的過程稱為基因表達(dá)(geneexpression),對這個(gè)過程的調(diào)節(jié)就稱為基因表達(dá)調(diào)控(generegulation或genecontrol)。1.基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義適應(yīng)環(huán)境、維持生長和增殖維持個(gè)體發(fā)育與分化2.原核基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)1)原核生物基因表達(dá)調(diào)控包括在DNA水平、轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平和翻譯水平,但轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)是最有
2、效、最經(jīng)濟(jì)的方式,也是最主要的調(diào)節(jié)方式。2)原核生物基因的表達(dá)調(diào)控多以操縱子為單位進(jìn)行,即:將功能相關(guān)的基因組織在一起,同時(shí)開啟或關(guān)閉基因表達(dá)。3)基因調(diào)控的模式可分成兩大類,正調(diào)控和負(fù)調(diào)控,原核生物以負(fù)調(diào)控為主。3.原核基因表達(dá)調(diào)控的幾個(gè)概念1)順式作用元件和反式作用因子基因表達(dá)的產(chǎn)物(蛋白質(zhì)或RNA)從合成的場所擴(kuò)散到目標(biāo)場所而發(fā)揮作用的過程稱為反式作用(trans-acting),此基因表達(dá)產(chǎn)物被稱為反式作用因子(trans-actingfactor)。反式作用因子通常為的蛋白質(zhì)或RNA。順式作用
3、(cis-acting):任一不轉(zhuǎn)變?yōu)槿魏纹渌问降腄NA序列在原位發(fā)揮作用,影響與其相連的其它DNA序列的活性。順式作用元件(cis-actingfactor):指對基因表達(dá)有調(diào)節(jié)活性的DNA序列,其活性只影響與其自身同處在一個(gè)DNA分子上的基因。順式作用元件通常不編碼蛋白質(zhì),多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。如:位于轉(zhuǎn)錄單位開始和結(jié)束位置上的啟動(dòng)子和終止子,都是典型的順式作用元件?;蚧钚缘恼{(diào)控主要通過反式作用因子和順式作用元件相互作用而實(shí)現(xiàn)。2)結(jié)構(gòu)基因和調(diào)節(jié)基因組成基因/管家基因(constitutiv
4、egene,housekeepinggene)是指不大受環(huán)境變動(dòng)而持續(xù)表達(dá)的一類基因。如DNA聚合酶,RNA聚合酶等代謝過程中十分必需的酶或蛋白質(zhì)的基因。調(diào)節(jié)基因(regulatedgene)指環(huán)境的變化容易使其表達(dá)水平變動(dòng)的一類基因。如:不同生長發(fā)育時(shí)期表達(dá)的一些基因。3)正調(diào)控和負(fù)調(diào)控正調(diào)控(positivecontrol)在沒有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)存在時(shí)基因是關(guān)閉的,加入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因活性就被開啟,這樣的調(diào)控為正轉(zhuǎn)錄調(diào)控。調(diào)節(jié)基因操縱基因結(jié)構(gòu)基因mRNA酶蛋白調(diào)節(jié)蛋白負(fù)調(diào)控(negativecontro
5、l)在沒有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)存在時(shí)基因是表達(dá)的,加入這種調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)后基因表達(dá)活性便被關(guān)閉,這樣的調(diào)控負(fù)轉(zhuǎn)錄調(diào)控。調(diào)節(jié)基因操縱基因結(jié)構(gòu)基因阻遏蛋白不轉(zhuǎn)錄,基因封閉4)激活蛋白和阻遏蛋白激活蛋白(activator),在正調(diào)控系統(tǒng)中,調(diào)節(jié)蛋白稱誘導(dǎo)蛋白或激活蛋白。和操縱基因結(jié)合后引起基因表達(dá)開放。阻遏蛋白(repressor),是負(fù)調(diào)控系統(tǒng)中由調(diào)節(jié)基因編碼的調(diào)節(jié)蛋白。和操縱基因結(jié)合后引起基因表達(dá)關(guān)閉。倒位片段阻遏蛋白二、DNA水平調(diào)控1.細(xì)菌DNA重排對基因表達(dá)的影響鼠傷寒沙門菌鞭毛素基因的調(diào)節(jié)鼠傷寒沙門氏菌(S.
6、typhimrium)的相轉(zhuǎn)變(phasevariation)2.σ因子對原核生物轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控σ因子:原核生物RNA聚合酶的一個(gè)亞基,是轉(zhuǎn)錄起始所必需的因子,主要影響RNA聚合酶對轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的正確識別,這種σ因子稱σ70,此外還有分子量不同,功能不同的其他σ因子。在轉(zhuǎn)錄起始階段,σ因子識別特異啟動(dòng)序列;不同的σ因子決定特異編碼基因的轉(zhuǎn)錄激活,也決定不同RNA(mRNA、rRNA和tRNA)基因的轉(zhuǎn)錄。σ亞基在轉(zhuǎn)錄延長時(shí)脫落。在E.coli,不同類型的啟動(dòng)子需要不同類型的σ因子σ32調(diào)控?zé)嵝菘嘶颍╤
7、eatshockgenes)σ54/60調(diào)控氮代謝基因σF調(diào)控鞭毛基因σ43調(diào)控噬菌體基因枯草桿菌(B.subtilis)1.操縱子學(xué)說(theoryofoperon)1961年,法國巴斯德研究院的FrancoisJacob(雅各布)與JacquesMonod(莫洛)提出獲1965年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)三.操縱子對基因表達(dá)的調(diào)控2.操縱子:是原核生物在分子水平上基因表達(dá)調(diào)控的單位,由啟動(dòng)子、操縱基因及其所控制的一組功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因所組成。操縱基因受調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物的控制。操縱子可視為原核生物的轉(zhuǎn)錄單位,
8、它可以逐個(gè)地從原核生物基因組中分離出來,對其結(jié)構(gòu)功能加以研究。OP3.乳糖操縱子1)乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)蛋白(阻遏蛋白)啟動(dòng)子操縱基因結(jié)構(gòu)基因Z編碼β-半乳糖苷酶:將乳糖水解成葡萄糖和半乳糖,還能將乳糖轉(zhuǎn)變?yōu)楫悩?gòu)乳糖Y編碼β-半乳糖苷透過酶:使外界的β-半乳糖苷(如乳糖)能透過大腸桿菌細(xì)胞壁和原生質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。A編碼β-半乳糖苷乙?;D(zhuǎn)移酶:乙酰輔酶A上的乙?;D(zhuǎn)到β-半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖。3個(gè)編碼的結(jié)構(gòu)基因乳糖操縱子的控制模型,其