丙泊酚對鼠腦細胞ATR及PPAR-γ表達的影響.pdf

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1、丙泊酚對鼠腦細胞ATR及PPAR-γ表達的影響研究生：胡燕梅導師：曾慶繁專業(yè)：麻醉摘要：目的觀察丙泊酚對鼠腦細胞中血管緊張素受體（ATR）及過氧化物酶體增殖物激活受體-γ（PPAR-γ）表達的影響，探究丙泊酚對腦保護作用的可能機制。方法將16只成年雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠隨機分為2組，丙泊酚組（WP,n=8）連續(xù)三天腹腔首次注射丙泊酚100mg/kg，后每隔一小時注射50mg/kg，連續(xù)2小時(共注射3次)；對照組（W,n=8）同期注射等容量的生理鹽水，第3日注射第3次后3小時斷頭處死

2、取腦組織，-80℃冰箱保存待檢。Elisa法檢測半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3），血管緊張素Ⅱ1受體（AT1R）、血管緊張素Ⅱ2受體（AT2R）及過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-γ)的含量；流式細胞術(shù)(flowcytometryassay,FCA)檢測腦細胞凋亡率。結(jié)果WP組AT1R（205.38±2.48）與W組（211.50±10.62）比較表達顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；WP組AT2R（154.90±4.74）與W組（145.71±4.74）比較表達顯著升高，差異有統(tǒng)

3、計學意義（P＜0.05）；WP組PPAR-γ（268.76±8.61）與W組（243.39±9.41）比較表達顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;WP組Caspase-3（44.75±2.41）與W組（39.44±1.02）比較表達顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；WP組細胞凋亡率（3.26±2.51）與W組（16.16±4.06）比較顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；結(jié)論丙泊酚降低AT1R表達，促進AT2R及PPAR-γ表達，可激活神經(jīng)細胞內(nèi)源性保護機制。關(guān)鍵詞丙泊酚；腦細

4、胞；血管緊張素Ⅱ受體；過氧化物酶體增殖物激活受體前言麻醉藥對腦細胞的保護或損害作用及其細胞、分子機制是麻醉領(lǐng)域研究的熱點。丙泊酚是臨床上常用的全身麻醉藥物，對生理及病理狀態(tài)下的腦神經(jīng)細胞功能產(chǎn)生不同的影響[1]。對如腦缺血再灌注、腦損傷的神經(jīng)細胞會產(chǎn)生保護作用[1],可能的機制有：使腦細胞代謝率下降、抑制線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP,mitoch-ondrialpermeabilitytransitionpore）[2]、可降低一氧化氮合酶（NOS)活性、抑制一氧化氮（NO）的合成[3]、激活磷脂酰肌醇

5、-3激酶/Akt(Phosphatidylinositol-3-kinase/Akt，PI-3K/Akt)信號轉(zhuǎn)導通路[4]、影響細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（extracellularsignal-regulatedkinase，ERK）信號轉(zhuǎn)導通路活性[5]、抑制細胞凋亡等[6]。對生長發(fā)育期（新生鼠、小兒）或退行性變（老年病人）患者有損害作用，促進神經(jīng)細胞的凋亡[7]，可使患者的學習和記憶能力在一定時期內(nèi)產(chǎn)生不同程度障礙[8,9]。研究表明：腦內(nèi)有獨立存在的腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS)[10]，并且和局部

6、RAS一起參與腦結(jié)構(gòu)和功能的調(diào)節(jié)，RAS中主要成分是血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)，AngⅡ可引起新生鼠神經(jīng)細胞凋亡、老年癡呆、帕金森氏病[11,12]等。AngⅡ通過與受體結(jié)合，經(jīng)由促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號傳導體系對細胞內(nèi)各種生物學效應進行適當?shù)恼{(diào)節(jié)。ERK是將信號從細胞表面受體傳導至細胞核的重要環(huán)節(jié)，它是MAPK家族里重要的成員，通過本身絲/蘇氨酸磷酸化，發(fā)揮信號傳遞的功能[13]。在激活ERK底物蛋白主要分布在細胞質(zhì)或細胞核中的特異性發(fā)揮生理作用，導致蛋白的表達或激活特定的蛋白質(zhì)在細胞中的現(xiàn)

7、象，對細胞的增殖、分化和凋亡等進行調(diào)控[14]。目前研究證實，AngⅡ?qū)е碌淖饔弥饕峭ㄟ^AT1R介導，而AT2R激活有可能起到對抗AT1R的作用。近年來的研究提示，AngⅡ的腦保護作用可能是通過AT2R實現(xiàn)的。在Fournier[15]的研究表明，在動物模型后預后腦室注射氯沙坦能顯著提高動物，但當AT2受體阻滯劑（PD123177）阻斷后，氯沙坦的腦保護作用即消失。AT2R基因敲除小鼠，經(jīng)實驗證實，與野生型相比AT2R基因敲除小鼠大腦中動脈閉塞的缺血性腦損傷引起的更嚴重，更嚴重的腦血流量減少，過氧化物

8、的產(chǎn)生明顯增加[16]。這些提示了AT2R在腦保護方面有著重要的作用。過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisomeproliferater-activatedreceptor，PPARs)是配體激活的核轉(zhuǎn)錄因子，屬于Ⅱ型核受體超家族成員。包括三種亞型（PPAR-α、PPAR-β和PPAR-γ）。其中PPAR-γ在1990年首次發(fā)現(xiàn)存在于脂肪細胞的調(diào)控通路中。受體的DNA反應元件及其配體的活性和特異性結(jié)合，在體內(nèi)許多生理和病理過程，如血糖