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《高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定不同畜禽配合飼料中伏馬毒素的含量.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、第43卷分析化學(xué)(FENXIHUAXUE)研究簡(jiǎn)報(bào)第3期2015年3月ChineseJournalofAnalyticalChemistry4l4～4l8DOI：10．11895／j．issn．0253-3820．140809高效液相色譜．串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定不同畜禽配合飼料中伏馬毒素的含量郭文博楊俊花’韓錚陳慧英孫真真趙志輝(上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，上海201403)(上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海201306)摘要為摸清復(fù)雜基質(zhì)中FB。和FB污染的準(zhǔn)確水平，本研究建立了高效液相色譜。串聯(lián)質(zhì)譜法(LC—MS／MS)測(cè)定不同畜禽配合飼料中伏馬毒
2、素B。(FB．)和B(FB)的分析方法。樣品用乙腈一水(50：50．V／V)提取，MAX強(qiáng)陰離子固相萃取柱富集凈化后，以0．1％甲酸和甲醇為流動(dòng)相，經(jīng)ThermoC．色譜柱(100mm×2．1mm，5Ixm)分離，采用電噴霧正電離(ESI)多反應(yīng)模式(MRM)監(jiān)測(cè)，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明：不同飼料樣品中FB和FB2在1～500g／kg之間線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)(R。)均大于0．9990，定量限分別為0．098和0．197us／kg，檢出限分別為0．328和0．656kg；低、中、高濃度加標(biāo)回收率為89．7％95．1％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3．2％～8．6％
3、。用本方法對(duì)市場(chǎng)上采集的106份不同畜禽配合飼料中FB．和F含量進(jìn)行測(cè)定，樣品檢出率為98．11％。本方法適用于基質(zhì)復(fù)雜的畜禽配合飼料中伏馬毒素FB．和FB，的準(zhǔn)確、快速定性與定量分析。關(guān)鍵詞伏馬毒素；陰離子固相萃取柱；液相色譜．串聯(lián)質(zhì)譜法；畜禽配合飼料1引言伏馬毒素是20世紀(jì)80年代末發(fā)現(xiàn)，由串珠鐮刀菌(Fusariummoniliforme)在一定溫度和濕度條件下產(chǎn)生的，以污染玉米及其制品為主的水溶性次級(jí)代謝產(chǎn)物_1]，由多氫醇與丙三羧酸組成的雙酯類化合物，與人或動(dòng)物機(jī)體內(nèi)神經(jīng)鞘氨醇結(jié)構(gòu)極為相似，在神經(jīng)鞘脂代謝過(guò)程中能競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合神經(jīng)鞘氨醇N-2酰基轉(zhuǎn)移
4、酶，從而抑制神經(jīng)鞘氨醇的生物合成、阻礙鞘脂類代謝，引發(fā)各種疾病[2]。研究證實(shí)，伏馬毒素能引起馬大腦白質(zhì)軟化癥(Equineleuc0encephal0malacia’ELEM)，豬肺水腫綜合征(Porcinepulmo．naryedema，PPE)；小鼠實(shí)驗(yàn)也表明，伏馬毒素對(duì)肝臟或腎臟容易造成損傷_3．4]。此外，伏馬毒素還具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性及免疫毒性，與人類食道癌的發(fā)生密切相關(guān)J。因此，國(guó)際癌癥研究中心(InternationalAgencyforResearchonCancer，IARC)將伏馬毒素列為2B級(jí)致癌物作為人類潛在的致癌物質(zhì)。伏馬毒素主要分
5、布在玉米及玉米制品中，嚴(yán)重威脅畜禽及人類健康_6]。玉米作為畜禽配合飼料的最主要原料，是畜牧業(yè)賴以發(fā)展的重要基礎(chǔ)。因此，伏馬毒素含量水平的準(zhǔn)確檢測(cè)對(duì)于畜禽配合飼料中伏馬毒素的防控和預(yù)警具有重要意義。目前，關(guān)于飼料中伏馬毒素的檢測(cè)方法主要有柱前衍生高效液相色譜法I8]、氣相色譜法]、薄層色譜法[1o]、酶聯(lián)免疫法ll1]等，這些方法前處理復(fù)雜且靈敏度較低，不能滿足快速痕量檢測(cè)的要求。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)于玉米及其制品中伏馬毒素的檢測(cè)主要采用高效液相色譜法和熒光光度法l，選用液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法(LC—MS／MS)作為仲裁法l，也有采用LC．MS／MS測(cè)定谷物中的伏
6、馬毒素的報(bào)道1，]，但這些方法都存在前處理復(fù)雜、靈敏度低等問(wèn)題。此外，畜禽配合飼料由玉米、小麥、麩皮、棉粕、豆粕等多種原料混合而成，基質(zhì)復(fù)雜多樣，容易產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)，且不同動(dòng)物飼料隨生理性影響組成各有差異，迫切需要一種能適應(yīng)不同配合飼料基質(zhì)、快速有效的檢測(cè)方法，以適應(yīng)飼料行業(yè)監(jiān)督檢查和畜牧業(yè)生產(chǎn)的需求。在前人研究的基礎(chǔ)上，本研究采用MAX陰離子固相萃取柱富集凈化，改進(jìn)流動(dòng)相洗脫程序，縮短分析時(shí)間，有效消除基質(zhì)效應(yīng)，并用LC．MS／MS進(jìn)行分析，提高檢測(cè)靈敏度，可用于大批量畜禽配合飼料中FB和FB，檢測(cè)分析，為不同畜禽配合飼料中伏馬毒素的2014-09-09收稿
7、：2015-01-05接受本文系上海市農(nóng)委科技興農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目滬農(nóng)科攻字(2013)第38號(hào)，滬農(nóng)科攻字(2014)第3-2號(hào)項(xiàng)目資助E—mail：zhao9912@hotmail．corn第3期郭文博等：高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定不同畜禽配合飼料中伏馬毒素的含量415準(zhǔn)確定量分析提供技術(shù)支撐。2實(shí)驗(yàn)部分2．1儀器與試劑液相色譜．串聯(lián)質(zhì)譜：TSQQuant配Surveyor液相操作系統(tǒng)(美國(guó)ThermoFisherscientific公司)；MAX柱(200mg，6mL，美國(guó)Waters公司)。HeraeusMuhifugeX3高速離心機(jī)(ThermoFi
8、sherScientific中國(guó)有限公司)。甲醇、乙
