資源描述：
《轉(zhuǎn)基因作物檢測技術(shù)研究進(jìn)展.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技2014（５）：９８～１０１InnerMongoliaAgriculturalScienceAndTechnology轉(zhuǎn)基因作物檢測技術(shù)研究進(jìn)展呼斯樂1222111，白晨，張惠忠，李曉東，菊花，王良，賈敢敢（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，內(nèi)蒙古呼和浩特010019；2.內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010031）摘要：目前基因工程技術(shù)已經(jīng)在多種農(nóng)作物中得到應(yīng)用和發(fā)展，隨著轉(zhuǎn)基因作物的不斷增多，轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性問題引起世人的關(guān)注，因此需要建立快速、有效的轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)。文章對轉(zhuǎn)基因作物檢測技術(shù)的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，介紹了酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白
2、質(zhì)雜交印跡技術(shù)、PCR技術(shù)、基因芯片、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等在轉(zhuǎn)基因檢測中的最新應(yīng)用情況，同時介紹了其他新型檢測技術(shù)的研究概況。關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因作物；核酸；蛋白質(zhì)中圖分類號:Ｓ１８８文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A10.3969/j.issn.1007-0907.2014.05.0４８文章編號:1007-0907(2014)05-00９８-0４AdvancesoftheTransgenicCropsDetectionTechnologyHＵSile1,BAIChen2,LIXiaodong2,ZHANGHuizhong2（1.InnerMongoliaAgricultu
3、ralUniversity,Hohhot010019,China;2.InnerMongoliaAcademyofAgricultural&AnimalHusbandrySciences,Hohhot010031,China）Abstract:Atpresent,geneticengineeringtechnologyhasbeenappliedanddevelopedinmanykindsofcrops,withtheincreasingofgeneticallymodifiedcrops,thesafetyofgeneticallymodifi
4、edproductshasattractedmoreandmoreworldwideattention,soitisnecessarytoestablisharapidandeffectivetransgenicdetectiontechnology.ThetransgenicdetectiontechnologiessuchasELISA,Westernblot,PCR,genechiptechnology,theloop-mediatedisothermalamplification,andsomenewdetectiontechnologyw
5、erefocusedoninthispaper.Keywords:Geneticallymodifiedcrops;Nucleicacid;Protein自1996年轉(zhuǎn)基因作物被批準(zhǔn)商業(yè)應(yīng)用以來，轉(zhuǎn)基因作物的測定法，對轉(zhuǎn)基因玉米中的Bt表達(dá)蛋白進(jìn)行定量檢測。與酶標(biāo)商品化種植得到迅速發(fā)展。目前商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因作物已有抗體相比，量子點(diǎn)具有吸收波長寬、發(fā)射波長窄和檢測靈敏度高上百種，種植面積達(dá)到17500萬hm2的特點(diǎn)，這種獨(dú)特的光化學(xué)穩(wěn)定性使其廣泛應(yīng)用于生物領(lǐng)域[6]，這樣使得轉(zhuǎn)基因技術(shù)迅速。發(fā)展起來。至2013年共有59個國家和地區(qū)得到批準(zhǔn)進(jìn)口轉(zhuǎn)基
6、酶聯(lián)免疫吸附法具有快速、簡便、費(fèi)用低等特點(diǎn)，但其準(zhǔn)確性易因作物，根據(jù)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)應(yīng)用國際服務(wù)組織(ISAAA)統(tǒng)計(jì)，全受復(fù)雜基質(zhì)的干擾，檢測范圍受限制。球共有29個國家種植轉(zhuǎn)基因作物17500萬hm2，比2012年增1.2蛋白質(zhì)雜交印跡技術(shù)加了3%[1]。隨著轉(zhuǎn)基因作物種植面積的不斷擴(kuò)大，快速、有效的蛋白質(zhì)雜交印跡技術(shù)（WesternBlot）是檢測轉(zhuǎn)基因作物外檢測技術(shù)不但有利于轉(zhuǎn)基因作物育種工作，而且節(jié)省了不少的源蛋白表達(dá)的經(jīng)典方法，是一種蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移電泳技術(shù)，其原理是時間和成本。目前轉(zhuǎn)基因檢測方法主要是外源蛋白質(zhì)檢測和核把聚丙烯酰胺凝膠電泳分離的
7、目的蛋白原位固定于固相膜上，酸檢測，包括酶聯(lián)免疫吸附法、Westernblot檢測、PCR技術(shù)、基再用高濃度蛋白質(zhì)溶液溫浴固相膜，然后用含有放射性標(biāo)記或因芯片、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等。酶標(biāo)記的特定抗體進(jìn)行雜交，使抗原-抗體特異性結(jié)合，最后通1蛋白質(zhì)檢測技術(shù)過放射自顯影觀察外源基因的表達(dá)。Westernblot具有從多克隆1.1酶聯(lián)免疫吸附法抗體中檢測出單克隆抗體,檢測靈敏度高（可檢出限為ng級）、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)是利用抗原和抗體特異性結(jié)合，待受體反應(yīng)均一性好、保存時間長等優(yōu)點(diǎn)。Qiu等[7]采用Western雜交檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體復(fù)合物結(jié)合，加入酶反應(yīng)
8、底物后形成可以檢測測轉(zhuǎn)基因水稻中稻瘟菌蛋白激發(fā)子，結(jié)果表明，該蛋白的表達(dá)具的有色產(chǎn)物來進(jìn)行檢測，此技術(shù)已在轉(zhuǎn)基因外源蛋白的
