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1、第二節(jié)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖與變異(一)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件1.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2.溫度3.pH4.氣體一、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖1.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖需要豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),包括水、碳水化合物、氮化物、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等。2.溫度依據(jù)細(xì)菌對(duì)溫度的需求不同,可以將其分為嗜冷菌、嗜溫菌、嗜熱菌三大類。病原菌一般為嗜溫菌,適宜的生長(zhǎng)溫度為15~40℃,并且大多數(shù)病原菌的最適溫度為37℃。3.pH大多數(shù)細(xì)菌的最適pH為7.2~7.6,許多細(xì)菌在代謝過(guò)程中分解糖,產(chǎn)生酸,使pH下降,抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。4.氣體與細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖有關(guān)的氣體主要是氧氣和二氧化碳,此外,有些固氮菌能夠固定
2、空氣中的氮?dú)?。根?jù)細(xì)菌對(duì)氧的需要情況分為:專性需氧菌(aerobe):必須在有氧的環(huán)境中才能生長(zhǎng)繁殖。如結(jié)核分枝桿菌專性厭氧菌(anaerobe):缺乏呼吸酶,只有在無(wú)氧狀態(tài)下才能生長(zhǎng)。如破傷風(fēng)芽胞梭菌兼性厭氧菌(facultativeanaerobe):在有氧或無(wú)氧狀態(tài)下均能生長(zhǎng),但在有氧時(shí)生長(zhǎng)較好。大多數(shù)病原菌屬于此類。微需氧菌:在低氧狀態(tài)下生長(zhǎng)最好。(二)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方式與速度細(xì)菌主要以二分裂方式進(jìn)行無(wú)性繁殖,一個(gè)細(xì)菌分為兩個(gè)菌體所需的時(shí)間稱為世代時(shí)間,簡(jiǎn)稱世代。在適宜的人工條件下,多數(shù)細(xì)菌的世代為20~30min。如果按20min
3、繁殖一代計(jì)算,10h后,一個(gè)細(xì)菌可以繁殖10億個(gè)以上的細(xì)菌。細(xì)菌細(xì)胞的分裂是從染色體的復(fù)制開(kāi)始的。為了使遺傳物質(zhì)能均等地分配給兩個(gè)子代細(xì)胞,染色體的復(fù)制與細(xì)胞分裂需要配合密切。(三)細(xì)菌群體生長(zhǎng)及生長(zhǎng)曲線細(xì)菌生長(zhǎng)曲線是專指單細(xì)胞微生物的。它是將少量的單細(xì)胞微生物接種純種到一定容積的液體培養(yǎng)基后,在適宜的條件下培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量。以細(xì)胞增長(zhǎng)數(shù)目的對(duì)數(shù)做縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間做橫坐標(biāo),繪制一條如圖所示的曲線,我們稱這條曲線為細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線。根據(jù)生長(zhǎng)曲線的變化規(guī)律,可以把生長(zhǎng)曲線分為四個(gè)時(shí)期:延遲期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期。1.延遲期又稱停滯
4、期,是微生物細(xì)胞進(jìn)入一個(gè)新環(huán)境的適應(yīng)時(shí)期。此時(shí)的微生物數(shù)量不增加,細(xì)胞的形態(tài)變大或者變長(zhǎng)。處在延遲期的細(xì)胞代謝能力強(qiáng),對(duì)外界的理化因素敏感,細(xì)胞代謝活躍,積累了足夠的酶、輔酶和中間代謝產(chǎn)物。為細(xì)胞分裂增殖做準(zhǔn)備。2.對(duì)數(shù)期又稱指數(shù)期,是細(xì)菌細(xì)胞適應(yīng)了新的環(huán)境后生長(zhǎng)最為旺盛的一個(gè)時(shí)期,在此時(shí)期細(xì)胞的數(shù)目以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),故稱對(duì)數(shù)期。對(duì)數(shù)期有以下幾個(gè)特點(diǎn):1)生長(zhǎng)速率常數(shù)最大2)細(xì)胞平衡生長(zhǎng),菌體內(nèi)的成分最為均勻3)酶系活躍,代謝旺盛從以上幾個(gè)特點(diǎn)可以看出,此時(shí)期是研究菌體的最佳時(shí)期。3.穩(wěn)定期又稱恒定期或最高生長(zhǎng)期。這個(gè)時(shí)期的特點(diǎn)是生長(zhǎng)速率常數(shù)
5、為0,即新繁殖的細(xì)胞數(shù)目與死亡的細(xì)胞數(shù)目相等。這時(shí)菌體的產(chǎn)量達(dá)到最高點(diǎn)。在穩(wěn)定期,細(xì)胞開(kāi)始儲(chǔ)藏糖原、異染粒和脂肪等貯藏物,多數(shù)的芽孢菌在這時(shí)產(chǎn)生芽孢,有些微生物在穩(wěn)定期時(shí)還開(kāi)始合成抗生素等次生代謝產(chǎn)物。4.衰亡期在衰亡期中,個(gè)體的死亡速度超過(guò)個(gè)體的新生速度,因此,整個(gè)群體就呈現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng),活細(xì)胞的數(shù)目明顯下降。這時(shí),細(xì)胞形態(tài)多樣,例如會(huì)產(chǎn)生很多膨大、不規(guī)則的退化形態(tài);有些微生物因蛋白水解酶活力的增強(qiáng)而發(fā)生自溶;有些微生物會(huì)在此時(shí)期釋放對(duì)人類有用的抗生素等次生代謝產(chǎn)物;在芽孢桿菌中,芽孢的釋放往往也發(fā)生在這一時(shí)期。微生物生長(zhǎng)規(guī)律對(duì)工業(yè)生產(chǎn)的指導(dǎo):
6、(1)縮短延遲期延遲期的存在則使發(fā)酵周期延長(zhǎng),為提高設(shè)備的使用率及降低生產(chǎn)成本則需縮短延遲期。(2)把握對(duì)數(shù)期連續(xù)投放或補(bǔ)加發(fā)酵原料,會(huì)使菌體隨營(yíng)養(yǎng)濃度增加而生長(zhǎng)速率上升,從而可獲得大量的菌體。微生物生長(zhǎng)規(guī)律對(duì)工業(yè)生產(chǎn)的指導(dǎo):(3)延長(zhǎng)穩(wěn)定期對(duì)于合成產(chǎn)物與微生物細(xì)胞的形成過(guò)程同步的,穩(wěn)定期的末期為最佳收獲期,因此,延長(zhǎng)穩(wěn)定期可以獲得更多的產(chǎn)品。(4)監(jiān)控衰亡期微生物在衰亡期,細(xì)胞活力明顯下降,同時(shí)由于逐漸積累的代謝毒物可能會(huì)與代謝產(chǎn)物起某種反應(yīng)或影響提純,或使其分解。因而必須掌握時(shí)間,在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候結(jié)束發(fā)酵。(三)細(xì)菌的人工培養(yǎng)培養(yǎng)基:用人工
7、方法配制的適合于細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。一、培養(yǎng)基(一)按培養(yǎng)基的物理性狀不同分類液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基(二)按培養(yǎng)基的用途不同分類:基礎(chǔ)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基二、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌膜生長(zhǎng)沉淀生長(zhǎng)混濁生長(zhǎng)對(duì)照二、細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象沿穿剌線生長(zhǎng)向四周擴(kuò)散生長(zhǎng)二、細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落:由單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖后形成一堆肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集團(tuán)。可根據(jù)菌落大小、形狀、顏色、邊緣、氣味、透明度、表面光滑度、濕潤(rùn)度及溶血情況等特片初步鑒定細(xì)菌。各種細(xì)菌的菌落三、人工培養(yǎng)細(xì)菌的意義:細(xì)菌性疾病
8、的診斷細(xì)菌的鑒定與研究生物制品的制備細(xì)菌學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和基因工程中的應(yīng)用二細(xì)菌的代謝產(chǎn)物一、與致病有關(guān)的代謝產(chǎn)物1.毒素(toxins)包括內(nèi)毒素和外毒素外毒素(exo