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1、實(shí)驗(yàn)三魚類的急性毒性實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師：劉汝濤山東大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院目錄目的與要求實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料3實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)報(bào)告注意事項(xiàng)64125CompanyLogo通過本實(shí)驗(yàn)，熟悉和掌握魚類急性毒性試驗(yàn)的設(shè)計(jì)、條件、操作步驟，以及試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算、分析和報(bào)告等全過程。目的與要求1CompanyLogo魚類對(duì)水環(huán)境的變化反應(yīng)十分靈敏，當(dāng)水體中的污染物達(dá)到一定程度時(shí)，就會(huì)引起一系列中毒反應(yīng)，例如行為異常、生理功能紊亂、組織細(xì)胞病變、直至死亡。在規(guī)定的條件下，使魚接觸含不同濃度受試物的水溶液，實(shí)驗(yàn)至少進(jìn)行24h，最好以96h為一個(gè)實(shí)驗(yàn)周期，在24h、48h、72h、96h時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)
2、魚的死亡率，確定魚類死亡50％時(shí)的受試物濃度。魚類毒性試驗(yàn)在研究水污染及水環(huán)境質(zhì)量中占重要地位。通過魚類急性毒性試驗(yàn)可以評(píng)價(jià)受試物對(duì)水生生物可能產(chǎn)生的影響，以短期暴露效應(yīng)表明受試物的毒害性。魚類急性毒性試驗(yàn)不僅用于測定化學(xué)物質(zhì)毒性強(qiáng)度、測定水體污染程度、檢查廢水處理的有效程度，也為制定水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)、評(píng)價(jià)環(huán)境質(zhì)量和管理廢水排放提供環(huán)境依據(jù)。實(shí)驗(yàn)原理2CompanyLogo1．實(shí)驗(yàn)魚的選擇與馴養(yǎng)試驗(yàn)用的魚必須對(duì)毒物敏感，具有一定的代表性，便于實(shí)驗(yàn)條件下飼養(yǎng)，來源豐富，個(gè)體健康。我國可采用的試驗(yàn)魚有四大養(yǎng)殖淡水魚（青魚、草魚、鰱魚和鳙魚）、金魚、鯽魚、野生的食蚊魚等。本實(shí)驗(yàn)
3、選用鯽魚作為實(shí)驗(yàn)魚。在同一實(shí)驗(yàn)中要求試驗(yàn)魚必須同屬、同種、同齡，最好是當(dāng)年生。魚的平均體長以7cm以下為合適。金魚體短、身寬，一般以3cm以下較為合適。同組魚中最大的體長不應(yīng)超過最小的體長的1.5倍。實(shí)驗(yàn)材料3CompanyLogo選用的試驗(yàn)魚在試驗(yàn)前必須在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)經(jīng)過馴養(yǎng)，使之適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室條件的生活環(huán)境和進(jìn)行健康選擇。馴養(yǎng)魚應(yīng)該與試驗(yàn)相同水質(zhì)水溫的水體中至少馴養(yǎng)7d，使其適應(yīng)試驗(yàn)環(huán)境，不應(yīng)長期養(yǎng)殖（＜2個(gè)月）。馴養(yǎng)期間，應(yīng)每天換水，可每天喂食1-2次，但在試驗(yàn)前一天應(yīng)停止喂食，以免試驗(yàn)時(shí)，剩余餌料及糞便影響水質(zhì)。馴養(yǎng)期間試驗(yàn)魚死亡率不得超過5％，否則，可以認(rèn)為這批
4、魚不符合試驗(yàn)魚的要求，應(yīng)該繼續(xù)馴養(yǎng)或者重新更換試驗(yàn)魚進(jìn)行馴養(yǎng)。試驗(yàn)前必須挑選健康的魚，即選擇體色光澤、魚鰭完整舒展、行動(dòng)活潑、逆水性強(qiáng)、大小無太大懸殊、無任何疾病的魚作為試驗(yàn)魚。任何畸形魚、外觀上反常態(tài)的魚都不得作試驗(yàn)魚。實(shí)驗(yàn)材料3CompanyLogo2．實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備（1）實(shí)驗(yàn)容器實(shí)驗(yàn)容器一般用玻璃或其他化學(xué)惰性材質(zhì)制成的水族箱或水槽。容器體積可根據(jù)試驗(yàn)魚的體重確定，通常以每升水中魚的負(fù)荷不得超過2g（最好為1g）。一些小型魚類幼魚可選擇500mL或1000mL燒杯為實(shí)驗(yàn)容器。容器的深度必須超過16cm，水體表面積越大越好。同一實(shí)驗(yàn)應(yīng)采用相同規(guī)格和質(zhì)量的容器。為
5、防止魚類跳出容器，可在容器上加上網(wǎng)罩。實(shí)驗(yàn)容器使用后，必須徹底洗凈，以除去所有毒性殘留物。（2）其他溶解氧測定儀、水硬度計(jì)、溫度控制儀、pH計(jì)、分析天平。實(shí)驗(yàn)材料3CompanyLogo3．實(shí)驗(yàn)用水（稀釋水）及水質(zhì)條件用來馴養(yǎng)和配置實(shí)驗(yàn)液的水，必須是未受污染的清潔水。一般可采用天然河水、湖水或地下水，但需過濾以除去大的懸浮物質(zhì)。也可用自來水代替，但必須進(jìn)行人工曝氣或放置3d以上脫氯。如果試驗(yàn)?zāi)康氖窃u(píng)價(jià)工業(yè)廢水或化學(xué)物質(zhì)對(duì)接納水體的影響時(shí)，則最好采用接納水體的污染源上游水作為試驗(yàn)用稀釋水。蒸餾水不適合做稀釋水，因?yàn)檎麴s水中已除去了自然界水中的鹽類，與實(shí)際差距太大，另
6、外由于蒸餾器的影響，有時(shí)使蒸餾水中帶有對(duì)魚類不利的金屬離子，影響試驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)材料3CompanyLogo實(shí)驗(yàn)用水的水質(zhì)條件一般是指水的溫度、pH、溶解氧、硬度、水中的有機(jī)物和水量等。（1）水溫實(shí)驗(yàn)中應(yīng)保持魚類原來的適應(yīng)溫度，一般冷水魚在12～18℃，溫水魚在20～28℃。為使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠，在同一實(shí)驗(yàn)中，溫度的波動(dòng)范圍不要超過4℃（即±2℃）。冬天可以通過加熱室內(nèi)的空氣溫度而達(dá)到調(diào)節(jié)水溫的目的，也可以采用電熱棒直接控制調(diào)節(jié)水溫。實(shí)驗(yàn)材料3CompanyLogo（2）pH水的pH與水生生物的代謝作用有密切關(guān)系。對(duì)毒物的毒性作用也有一定的影響。因此，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)維持p
7、H在魚類適宜范圍內(nèi)。一般實(shí)驗(yàn)液的pH在6.7～8.5為宜。如需調(diào)節(jié)pH，可用1M或0.1M的HCl和NaOH來調(diào)節(jié)受試物貯備液的pH。調(diào)節(jié)貯備液的pH時(shí)不能使受試物濃度明顯改變，或發(fā)生化學(xué)反應(yīng)或沉淀。（3）溶解氧溶解氧是魚類生存的必要條件，它能影響魚類對(duì)毒物的敏感性。一般溫水魚要求溶解氧在4mg/L以上，冷水魚要求溶解氧在5mg/L以上。（4）硬度水的總硬度為10～250mg/L（以CaCO3計(jì)）。實(shí)驗(yàn)材料3CompanyLogo1．預(yù)實(shí)驗(yàn)用確定正式實(shí)驗(yàn)所需濃度范圍，可選擇較大范圍的濃度系列，如1000mg/L、100mg/L、10mg/L、1mg/L、0.1mg
8、/L。每個(gè)
