探討慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞表面共刺激分子的表達(dá)變化及臨床意義.doc

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1、探討慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞表面共刺激分子的表達(dá)變化及臨床意義摘要:目的探討慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞表面共刺激分子的表達(dá)變化及臨床意義。方法選取南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的慢性乙型肝炎患者40例作為觀察組,所有患者均予以外周血T淋巴細(xì)胞表面CD4*、CD8*、CD4*/CD8*比值、CTLA-4等共刺激分子的表達(dá)變化測定,同時選取健康患者39例作為對照組,統(tǒng)計(jì)兩組患者的測定結(jié)果。結(jié)果觀察組中治療組、治療無效組、治療有效組CD4*、CD8*T淋巴細(xì)胞亞群絕對表達(dá)量均明顯下降,低于對照組(P關(guān)鍵詞:

2、慢性乙型肝炎;外周血;T淋巴細(xì)胞;共刺激分子;表達(dá)變化慢性乙型肝炎源于機(jī)體細(xì)胞免疫功能紊亂,不能有效清除體內(nèi)病毒,其中T淋巴細(xì)胞在主導(dǎo)機(jī)體免疫功能方面發(fā)揮著重要的作用[1]。筆者主要探討慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞表面共刺激分子的表達(dá)變化及臨床意義,將結(jié)果報(bào)告如下:1資料與方法1.1一般資料本次選取的40例研究對象均為南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院于2013年4月?2015年1月收治的慢性乙型肝炎患者作為觀察組,所有患者均知情同意,其中男29例,女11例,年齡37?68歲,平均年齡(45.3+5.6)歲;職業(yè):教師

3、16例、農(nóng)民工4例、企業(yè)高管8例、退休在家12例。所有患者經(jīng)檢查,均符合慢性乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn),排除神經(jīng)系統(tǒng)障礙、嚴(yán)重心腦血管疾病、全身免疫系統(tǒng)疾病、凝血及造血功能障礙、甲型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎等患者。同時選取健康患者39例作為對照組,其中男30例,女9例,年齡36?69歲,平均年齡(45.8±5.7)歲;職業(yè):教師15例、農(nóng)民工5例、企業(yè)高管9例、退休在家11例。兩組患者在性別、年齡等資料方面無顯著差異(P>0.05),具有可比性。1.2方法121試劑在測定過程中,需要用到的試劑:鼠抗人CD3-APC、

4、CD8-FIT、CTLA-4-PE、PD-1-PE熒光素標(biāo)記單克隆抗體,LgG-FITC>IgG-PE.IgG-APC同型對照融血劑,由美國BD公司提供;另外需要乙型肝炎病毒及耐藥突變檢測試劑盒、HBV標(biāo)志物檢測試劑盒、ALT檢測試劑盒。1.2.2儀器流式細(xì)胞儀、擴(kuò)增儀、高速冷凍離心機(jī)、全自動生化分析儀、全自動酶免分析儀、低溫冰箱。1.2.3測定外周血T淋巴細(xì)胞表面共刺激分子檢測具體方法:患者晨起空腹抽取外周靜脈血3ml,抗凝混勻后分別置于5支不同的測定管中:其中第一管加入CD3、CD8、CD28,第二管中加

5、入單抗CD3、CD8、CTLA-4,第三管中加入CD3、CD8、PD-1,第四管中加入單抗CD3、CD8、Tim-3,第五管中加入IgG-FTTCIgG-PEIgG-APC作為同型對照管,所有試管中均加入單抗20U1,搖勻后在常溫下狀態(tài)下放置30min,然后加入新鮮配置的溶血劑搖勻,在光線暗處放置15min并離心5min,使用磷酸鹽緩沖液進(jìn)行3次洗滌,并且每管中加入0.3mlPBS,在4。C中放置后在Id內(nèi)檢測。為了使結(jié)果更加精準(zhǔn),輔助測定方法:并采用定時熒光定量PCR檢測技術(shù)測定血清中HBV(乙型肝炎病毒)

6、、DNA(脫氧核糖核酸)含量;采用雙抗體夾心時間分辨熒光免疫分析法檢測乙型肝炎病毒;采用全自動生化分析儀監(jiān)測丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量。1.3觀察指標(biāo)將觀察組分為為治療組、治療無效組、治療有效組,與對照組作比較。分析兩組患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群相對表達(dá)量[2]。分析兩組患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群絕對表達(dá)量[3]。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SSPS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理與分析,表示計(jì)量數(shù)據(jù)資料,采用t檢驗(yàn),(%)表示計(jì)數(shù)資料,并進(jìn)行%2檢驗(yàn),P

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