一個(gè)參與擬南芥鉛脅迫應(yīng)答調(diào)節(jié)的基因功能解析.pdf

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1、FunctionalanalysisofthegeneinvolvedintheregulationofleadstressresponseinArabidopsis2011年4月合肥工業(yè)大學(xué)本論文經(jīng)答辯委員會(huì)全體委員審查,確認(rèn)符合合肥工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文質(zhì)量要求。答辯委員會(huì)簽名:(工作單位、職稱)、主委導(dǎo)師:教授中國(guó)科技大學(xué)教授<合肥工業(yè)大學(xué)教授丁捌合肥工業(yè)大學(xué)副教授專八I砂乞合肥工業(yè)大學(xué)副教授教授獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加

2、以標(biāo)志和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不包含為獲得金避王些態(tài)堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。靴做儲(chǔ)替撤簽字隰29『,年如壚學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解金目曼王些盔堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán),允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)盒墅王些太堂一可以將學(xué)位論文的全部或部分論文內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描

3、等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))學(xué)位論文者簽名.馬、中超導(dǎo)師簽名.簽字日期:0『1年g-月4日學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向:工作單位:通訊地址:勘方簽字日期:7力I廣妒妒日z力“D’電話:郵編:.一個(gè)參與擬南芥鉛脅迫響應(yīng)調(diào)節(jié)的基因的功能解析摘要重金屬污染極大地影響了植物的生長(zhǎng)和發(fā)育,是農(nóng)作物減產(chǎn)的重要原因之一。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高作物抗逆性具有重要理論與經(jīng)濟(jì)意義,而這項(xiàng)工作的關(guān)鍵在于克隆關(guān)鍵基因及認(rèn)識(shí)植物抗逆分子機(jī)理。隨著擬南芥基因組測(cè)序的完成和基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)的釋放,反向遺傳學(xué)已

4、成為解析基因功能的一個(gè)重要手段。利用基因表達(dá)譜分析,發(fā)現(xiàn)擬南芥中一個(gè)編碼乳酸脫氫酶的基因LDH能夠被重金屬鉛誘導(dǎo)表達(dá)。為闡明LDH基因的功能,從擬南芥種質(zhì)資源中心獲得了兩個(gè)T-DNA插入LDH基因的突變體ldh—J和ldh.2。本文研究了擬南芥野生型和突變體ldh—J『和ldh.2對(duì)非生物脅迫包括滲透、過(guò)氧化氫和重金屬脅迫響應(yīng)的特征。結(jié)果證實(shí)突變體ldh.J和ldh.2與野生型相比,在滲透脅迫和鎘脅迫下沒(méi)有出現(xiàn)明顯的表型差異,而在鉛脅迫下,突變體ldh—J和ldh.2則表現(xiàn)出比野生型更加敏感。通過(guò)對(duì)LDH基

5、因表達(dá)模式分析發(fā)現(xiàn),LDH基因可以被鉛誘導(dǎo)表達(dá),在各組織中表達(dá)具有差異性,在花中的表達(dá)量最高,而在根中的表達(dá)量最低。組織中鉛含量測(cè)定發(fā)現(xiàn),ldh.J、ldh一2突變體鉛含量顯著高于WT。AtPDRl2、ACBPI和GSH等三個(gè)鉛脅迫相關(guān)響應(yīng)基因的表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)鉛處理的Idh.J、ldh.2突變體AtPDRl2,和ACBPl的表達(dá)量低于野生型,而GSH表達(dá)量無(wú)差異,加之BSO未使表型差異發(fā)生顯著的放大,說(shuō)明LDH對(duì)鉛的響應(yīng)可能不涉及到GSH途徑,可能與AtPDRl2和ACBPl表達(dá)增加有關(guān)。此外,抗氧化酶系的活

6、性測(cè)定及DAB對(duì)HzOz的組化檢測(cè)說(shuō)明LDH對(duì)由鉛脅迫介導(dǎo)的ROS也具有一定耐受性。以上研究結(jié)果表明LDH基因通過(guò)激活A(yù)tPDRl2外泵鉛以及對(duì)ROS的清除來(lái)參與重金屬鉛脅迫的耐受調(diào)節(jié)。關(guān)鍵詞:擬南芥,LDH基因,重金屬鉛脅迫FunctionalanalysisofthegeneinvolvedintheregulationofleadstressresponseinArabidopsisAbstractHeavymetalpollutionsgreatlyaffectthedevelopmentalgro

7、wthofplants,whichisoneofthemainfactorsdecreasingtheyieldsofcropsinagriculture.Itisgreatlyacademicandsignificantlyeconomictoimprovethetoleranceofcropstoabioticstressbyusingtransgenictechniques.However,thekeyworkistoclonethekeygenesinolvedintheabioticstressr

8、esponsesandtounderstandtheirmolecularmechanismsinplants.WiththeaccomplishmentoftheArabidopsisgenomeandthereleaseofgeneexpressionmicroarrayanalysisdata,reversegeneticshasbecomeanimportantwaytounderstandgenefun

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