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1、第一部分微生物培養(yǎng)技術(shù)實驗一培養(yǎng)基（medium,media,culturemedia）的制備1實驗一培養(yǎng)基的制備技術(shù)1.前期準(zhǔn)備:1）確定和選擇配方-MSM;LB細(xì)菌—真菌—放線菌—2實驗一培養(yǎng)基的制備技術(shù)培養(yǎng)基（medium,media,culturemedia）的制備1.前期準(zhǔn)備:2）準(zhǔn)備試劑,器皿和設(shè)備等；①常用試劑等材料:基本試劑:牛肉膏；蛋白胨；瓊脂；NaCl；pH試紙；HCl和NaCl調(diào)整pH使用商品化干燥培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂，細(xì)菌培養(yǎng)基等②玻璃器皿等試管；錐瓶；燒杯；培養(yǎng)皿；量筒；玻棒；漏斗；鐵支架；自制棉塞（紗布，棉花，線）；角
2、匙；標(biāo)簽紙或者記號筆；牛皮紙(或者報紙)；鍋（配置培養(yǎng)基，處理污染物等）；火柴(打火機)；接種環(huán)；③儀器等天平;電爐（電磁爐）；高壓蒸汽滅菌器(鍋)；電烘箱（干熱滅菌箱）；培養(yǎng)箱（后期培養(yǎng)時使用）；恒溫水浴箱（培養(yǎng)基恒溫）等；3實驗一培養(yǎng)基的制備技術(shù)2.基本流程(1)自行配置培養(yǎng)基按照配方稱取藥品↓調(diào)pHpH7.2-7.4;用NaOH↓分裝按照規(guī)定量裝入容器，例如試管，三角瓶，加棉塞(自己做）↓包扎牛皮紙（報紙等），線繩，橡皮筋等↓滅菌↓分裝到培養(yǎng)皿、試管、小三角瓶↓擺斜面（試管）↓無菌檢查/存放備用4實驗一培養(yǎng)基的制備技術(shù)3滅菌1）高壓蒸汽
3、滅菌器(鍋)；適用范圍：配置的培養(yǎng)基，制備無菌水等的滅菌；使用條件:恒溫121.3℃，維持20min;注意事項：高壓容器注意安全操作；開始檢查水位和密封圈；升至100℃，關(guān)掉出氣閥門。5實驗一培養(yǎng)基的制備技術(shù)3滅菌2）干熱滅菌（電烘箱）；適用范圍;玻璃器皿耐熱物體的滅菌;使用條件:恒溫160℃，維持2hr;恒溫170℃,維持1hr注意事項：高溫設(shè)備，注意安全操作；6實驗一培養(yǎng)基的制備技術(shù)4分裝倒平板過程：制備固體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基冷卻到約50℃倒平板持皿法：疊皿法：7實驗一培養(yǎng)基的制備技術(shù)4分裝液體培養(yǎng)分裝過程：制備培養(yǎng)基；培養(yǎng)基冷卻到約50℃分
4、裝到小三角瓶8第一部分微生物培養(yǎng)技術(shù)實驗二接種和培養(yǎng)（inoculationandcultivation)9試驗前液體接種液培養(yǎng)：3個菌種，每種1瓶，1瓶3菌種種混合。每組一瓶；（共4個組，每組5個人）培養(yǎng)基準(zhǔn)備：MSM培養(yǎng)基。每人2個培養(yǎng)皿（固體培養(yǎng)），2個三角瓶（液培）（上個實驗已經(jīng)準(zhǔn)備好的）具體工作：給液體和固體培養(yǎng)基接種每天測定—鏡檢，OD值測定產(chǎn)出：菌種生長曲線（細(xì)菌個數(shù)，OD值）10實驗二接種和培養(yǎng)1、平板培養(yǎng)接種1）平板劃線(streakplate)；使用材料和用具：培養(yǎng)皿、酒精燈、接種環(huán)等：11實驗二接種和培養(yǎng)2）稀釋涂布平板
5、法(spreadplate)：使用材料和用具：培養(yǎng)皿、酒精燈、涂布器（玻棒制作）等：12實驗二接種和培養(yǎng)3）倒平板法用于菌濃度稀釋的方法之一13實驗二接種和培養(yǎng)2、液體培養(yǎng)接種1）菌塊接種從平板培養(yǎng)中切下菌斑，放入三角瓶中2）孢子懸浮液接種14實驗二接種和培養(yǎng)3、培養(yǎng)方法---impossibleisnothing.試管(斜面)-靜至于冰箱；用于菌種保存培養(yǎng)皿（平板）-靜至于一定溫度；15實驗二接種和培養(yǎng)3、培養(yǎng)方法---impossibleisnothing.錐瓶（液體培養(yǎng)基）-震蕩，一定溫度；16
