不同菊花品種高效直接再生體系的構(gòu)建

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1、一52一江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)2013年第41卷第11期徐式近，徐忠傳．不同菊花品種高效直接再生體系的構(gòu)建[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41(11)：52—54，100不同菊花品種高效直接再生體系的構(gòu)建徐式近，徐忠傳(1．蘇州大學(xué)金螳螂建筑與城市環(huán)境學(xué)院，江蘇蘇州215123；2．常熟理工學(xué)院生物與食品工程學(xué)院，江蘇常熟215500)摘要：以9個(gè)菊花品種葉片、莖段為外植體，用6種分化培養(yǎng)基與3種生根培養(yǎng)基直接再生不定芽，研究激素組合及外植體對(duì)不同菊花品種直接再生的影響。結(jié)果表明，9個(gè)品種的莖段與6個(gè)品種的葉片都有較高的再生能力，但品種“28”“5—17”的葉片未分化出不定芽，品種“11”的葉片

2、再生率也不高；多數(shù)菊花品種莖段的再生能力高于葉片；再生率為84％～100％，繁殖系數(shù)為2．3～9．4，可應(yīng)用于工廠化快繁與基因工程育種。關(guān)鍵詞：菊花；葉片；莖段；直接再生中圖分類(lèi)號(hào)：$682．11文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002—1302(2013)11—0052—03菊花(Dendranthemamorifolium)為菊科菊屬多年生宿根1．3方法草本植物，是我國(guó)十大傳統(tǒng)名花之一，也是世界四大切花之1．3．1組培苗擴(kuò)繁為了擴(kuò)繁保存組培苗，將9個(gè)菊花品種一，其花色豐富、花形優(yōu)美、品種多樣，具有較高的觀賞、藥用的組培苗剪成帶1個(gè)節(jié)的莖段與莖尖，接種到培養(yǎng)基(4)中，價(jià)值。菊花再生體系研究

3、起源于20世紀(jì)60年代，目前已每瓶接種6～8個(gè)莖段或莖尖，3周左右分化出不定芽，之后經(jīng)建立了以葉片、葉柄、莖尖”、莖段、花不定芽增多長(zhǎng)大，6周后分離不定芽，接種到MS培養(yǎng)基中，使器官’等為外植體的菊花再生體系。菊花再生體系研究其生長(zhǎng)生根，長(zhǎng)到5CII'I左右后再重復(fù)上述操作，如此重復(fù)，直中，常以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，6一BA與NAA為生長(zhǎng)調(diào)至獲得充足的材料。節(jié)劑，“。菊花再生受基因型限制，再生體系沒(méi)有1．3．2不定芽誘導(dǎo)選擇生長(zhǎng)健壯、整齊一致的組培苗，剪普遍性’。。”。愈傷組織再生不定芽容易產(chǎn)生遺傳變?nèi)№敳?—6張葉面積大于0．5cm的幼嫩葉片’，沿著異與嵌合體，直接再生不定芽能保持

4、遺傳性狀、簡(jiǎn)化程序、縮垂直于主脈方向剪2個(gè)刀口，正面朝上，水平放入分化培養(yǎng)短繁殖周期。本試驗(yàn)以9個(gè)菊花品種的葉片、莖段為外基，每瓶接種6～7張葉片。剪取長(zhǎng)約0．5cm左右?guī)?個(gè)植體，以6一BA、NAA為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑直接誘導(dǎo)不定芽，旨在建節(jié)的莖段，剪掉葉片，留少許葉柄以免損傷葉腋，形態(tài)學(xué)上端立高效、簡(jiǎn)單、穩(wěn)定的菊花直接再生體系。朝上，垂直插入分化培養(yǎng)基，每瓶接種4—5個(gè)莖段。每個(gè)處理至少10個(gè)外植體，重復(fù)3次。42d后統(tǒng)計(jì)長(zhǎng)度為0．5cm1材料與方法以上不定芽個(gè)數(shù)(不包括玻璃化芽)，再生率與繁殖系數(shù)計(jì)算1．1材料公式如下：再生率=分化出不定芽的外植體數(shù)／接種的外植體以9個(gè)菊花切花品種的組培

5、苗為試材(張家港駿馬科技數(shù)×100％；繁殖系數(shù)：分化出的不定芽數(shù)／分化出不定芽的有限公司)，用編號(hào)替代品種名：?3?3—2”“28”“5—17”外植體數(shù)?！?7”“2”?9“?6“11”。外植體為葉片與莖段。1．3．3生根以“3”“3—2”“5—17”3個(gè)品種為例，當(dāng)不定1．2培養(yǎng)條件芽長(zhǎng)至3cm左右時(shí)，剪下生長(zhǎng)健壯、整齊一致的不定芽接種除生根試驗(yàn)以1／2MS?！弊鳛榛九囵B(yǎng)以外，其他試驗(yàn)到生根培養(yǎng)基，每瓶接種4—5個(gè)不定芽。每個(gè)處理取8—10均以MS作為基本培養(yǎng)基，添加3Og／L蔗糖與8g／L瓊脂，pH個(gè)外植體，重復(fù)2次。14d后統(tǒng)計(jì)生根率、生根數(shù)、根長(zhǎng)。值為5．8～6．0，其中分化

6、培養(yǎng)基分別附加：(1)6一BA2結(jié)果與分析0．5mg／L+NAA0．1mg／L；(2)6一BA1．0mg／L+NAA0．1mg／L；(3)6一BA2．0mg／L+NAA0．1mg／L；2．1激素組合對(duì)菊花莖段直接再生的影響(4)6一BA2．0mg／L+NAA0．2ⅡlL；(5)6一BA2．0mg／L+將9個(gè)菊花品種的莖段接種于6種分化培養(yǎng)基中，1周NAA0．5mg／L；(6)6一BA3．0me／L+NAA0．5mg／L。后莖段基部膨大，葉腋處發(fā)出1個(gè)腋芽，2周后分化出不定生根培養(yǎng)基分別附加：(7)NAA0mL；(8)NAA芽，少數(shù)不能分化出不定芽或不定芽玻璃化(芽體透明、扭0．05mg

7、／L；(9)NAA0．1mg／L-61；(10)NAA曲、易碎)，3周后不定芽迅速增多，形成叢生芽。由表1、表20．2HL；(11)NAA0．4me／L，。培養(yǎng)溫度(25±2)℃，日可知，在6種分化培養(yǎng)基上，9個(gè)品種均能形成不定芽。激素光燈光源，光照度21—24Ixmolf(m2·s)，光照時(shí)間為12h／d。組合對(duì)菊花莖段的再生率影響不大。綜合考慮芽的生長(zhǎng)情況與成本，9個(gè)菊花品種莖段的最適分化培養(yǎng)基分別為：?3’“5—17”為培養(yǎng)基(2)，“3