實(shí)驗(yàn)-土壤中細(xì)菌的分離與純化.ppt

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1、實(shí)驗(yàn)十微生物的分離與純化一、目的要求掌握土壤微生物的分離純化方法和無(wú)菌操作技術(shù)；初步掌握微生物的鑒定技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理自然界中各種微生物混雜生活在一起，要研究某種微生物的特性，首先須使該微生物處于純培養(yǎng)狀態(tài)。從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或一株微生物的過(guò)程稱為微生物的分離與純化。土壤是微生物生活的大本營(yíng)，可以從中分離到很多有價(jià)值的菌株。本實(shí)驗(yàn)將采用三種不同的培養(yǎng)基從土壤中分離不同類型的微生物。三、實(shí)驗(yàn)器材土樣：采集校園土壤培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基——細(xì)菌高氏Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基——放線菌馬丁氏培養(yǎng)基——真菌其他：無(wú)菌的培養(yǎng)皿、盛90mL無(wú)菌水并帶玻璃

2、珠的三角瓶、盛9mL無(wú)菌水的試管、小鐵鏟、吸頭、移液器、無(wú)菌玻璃涂棒、接種環(huán)、顯微鏡、染色液等。四、操作步驟（1）制備土壤稀釋液涂布平板培養(yǎng)挑菌落平板劃線分離轉(zhuǎn)入斜面觀察菌落特征、制片鏡檢菌體形態(tài)菌種保藏1.制備土壤稀釋液四、操作步驟（2）2.涂布四、操作步驟（3）四、操作步驟（4）3.培養(yǎng)：高氏Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基平板和馬丁氏培養(yǎng)基平板倒置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3~5d，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板倒置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3d。四、操作步驟（5）4.挑菌落接種和分離工具1.接種針；2.接種環(huán)；3.接種鉤；4.5.玻璃涂棒；6.接種圈；7.接種鋤；8.小解剖刀四

3、、操作步驟（6）5.平板劃線分離平板劃線分離的方法1.斜線法；2.曲線法；3.方格法；4.放射法；5.四格法四、操作步驟（6）平板劃線法四、操作步驟（6）平板劃線分離斜面接種時(shí)的無(wú)菌操作(1)接種滅菌;(2)開(kāi)啟棉塞;(3)管口滅菌;(4)挑起菌苔;(5)接種;(6)塞好棉塞四、操作步驟（7）6.轉(zhuǎn)入斜面試擬出從土壤中分離芽孢桿菌的主要實(shí)驗(yàn)步驟。如何檢驗(yàn)平板上某個(gè)單菌落是不是純培養(yǎng)？六、思考題