川東地區(qū)南方紅豆杉藥用部位紫杉醇含量變化研究-論文.pdf

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1、LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2012VOL．23NO．9時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥2012年第23卷第9期川東地區(qū)南方紅豆杉藥用部位紫杉醇含量變化研究方應(yīng)權(quán)，謝仲德，陳鴻源(重慶三峽中藥研究所，重慶萬(wàn)州404020)摘要：目的用HPLC法考察了川東地區(qū)南方紅豆杉(Taxusyunnanensis)不同部位中紫杉醇的含量，以及不同生長(zhǎng)年限對(duì)川東地區(qū)紅豆杉枝葉中紫杉醇含量的影響。方法采用HPLC法，HypersilODS2色譜柱，流動(dòng)相為甲醇一水(60：40)，柱溫25℃，檢測(cè)波長(zhǎng)227nm，比較南方紅豆杉的樹(shù)皮、針葉、

2、小枝和樹(shù)根中紫杉醇的含量，以及不同生長(zhǎng)年限對(duì)川東地區(qū)南方紅豆杉枝葉中紫杉醇含量的影響，取川東地區(qū)南方紅豆衫1～7年樹(shù)種，分別測(cè)定其藥用部分根及根皮、莖皮、小枝、葉紫杉醇的含量。結(jié)果7年、6年生和5年4年生含量無(wú)明顯差異，3年以下生含量明顯偏低。紫杉醇含量莖皮最高。枝葉次之，根皮最低無(wú)明顯差異。結(jié)論三峽庫(kù)區(qū)紅豆杉藥用部位紫杉醇含量分布各不相同。關(guān)鍵詞：南方紅豆杉；紫杉醇；高效液相色譜法D0I標(biāo)識(shí)：doi：10．3969／j．issn．1008-0805．2012．09．055中圖分類(lèi)號(hào)：R284．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1008-0805(2012)09—

3、2237—02南方紅豆杉Taxusmairei，又稱(chēng)美麗紅豆杉，是松杉綱、紅豆2．4供試品溶液的制備供試樣品自然干燥，粉碎成細(xì)粉，過(guò)80杉科、紅豆杉屬的一個(gè)種。自20世紀(jì)70年代美國(guó)科學(xué)家從短葉目篩，40~C減壓干燥。稱(chēng)取藥材細(xì)粉約2—4g，精密稱(chēng)定，置人具紅豆杉(TaxusbreoColia)樹(shù)皮中提取抗癌藥物——紫杉醇(Taxo1)塞三角瓶中，加乙酸乙酯一丙酮(1：1)30ml，25℃超聲提取6O以來(lái)，紅豆杉屬植物備受人們的重視。近四十多年來(lái)一直成為世m(xù)in，濾過(guò)殘?jiān)偻ǔ曁崛?次。合并上清液，減壓蒸干。殘界上天然藥物研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。紫杉醇也被認(rèn)為

4、是目前發(fā)現(xiàn)的渣加入石油醚萃取3次，超聲洗滌3次，離心分離。殘?jiān)鼡]干石抗癌效果最好的藥物?。南方紅豆杉主要分布于我國(guó)黃河以南油醚后加入氯仿20ml，分4次萃取，超聲振蕩，離心分離。上清廣大地區(qū)，包括廣東北部、廣西北部、四川西部、重慶東南部、湖北液合并，減壓濃縮，作為待用樣品。取固相萃取小柱，依次加入甲西部、云南東部、貴州中部和東部、安徽南部和西南部、河南西部醇12ml，抽干；0．叭mol／L的乙酸銨緩沖溶液12m1，抽干。將樣(伏牛山)、陜西南部(秦嶺)、浙江、福建和臺(tái)灣等17個(gè)省市區(qū)。品溶于少量80％的乙酸銨甲醇溶液中，上柱，抽干，依次用一般多集中分布分布

5、在海拔800—1600m的山地或溪谷，近幾0．01mol／L的乙酸銨12ml、50％的乙酸銨甲醇溶液12ml淋洗抽年在重慶三峽庫(kù)區(qū)發(fā)現(xiàn)天然林南方紅豆杉群落，三峽庫(kù)區(qū)忠縣、干，再加入80％的乙酸銨甲醇溶液12ml。洗脫，收集洗脫液，減豐都等海拔1500in以上的高山地區(qū)生長(zhǎng)著野生紅豆杉，由于三壓蒸發(fā)，殘?jiān)眉状既芙?，定容?ml，甲醇液經(jīng)0．45m微孑L濾峽庫(kù)區(qū)特殊的地理環(huán)境，三峽庫(kù)區(qū)的野生紅豆杉的紫杉醇的含量膜濾過(guò)，作為供試品溶液。與其它地方南方紅豆杉有所不同。2．5精密度實(shí)驗(yàn)取紫杉醇對(duì)照品溶液(0．0506mg／m1)，重復(fù)1儀器與材料進(jìn)樣6次，測(cè)得峰面

6、積分別為1381．73659，1280．4452，1．1儀器AngilentHPllO0高效液相色譜儀；LCZ1一CL4010紫1376．8065，1384．5592，1360．9456，1360．949，RSD為外檢測(cè)器；KH2200E型超聲儀；固相萃取小柱(GH—cleanext—0．85％，表明儀器精密度良好。SPE—C18)；固相萃取裝置(美國(guó)JTBaker公司)。2．6穩(wěn)定性試驗(yàn)取5年生枝葉供試品溶液，每隔2h進(jìn)樣測(cè)定1．2藥物藥材均采自三峽庫(kù)區(qū)忠縣天池農(nóng)場(chǎng)，由三峽中藥研究1次，共6次，測(cè)得其含量分別為0．0630％o、0．0629％。、0．06

7、3所付少志教授生藥室鑒定為三峽庫(kù)區(qū)紅豆杉(Taxusyunnanensis)5％。、0．0644‰、0．0637％e、0．0638％。，RSD為0．95％，表明樣品的樹(shù)皮、根、枝葉。溶液在10h內(nèi)測(cè)定穩(wěn)定。1．3試劑紫杉醇(20100615)，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；2．7重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取5年生枝葉5份，按“2．4”項(xiàng)下方法分別提甲醇、為色譜純，水為高純水；其余試劑均為分析純。取，精制，測(cè)定，含量分別為0．06294％e，0．0652‰，0．0629‰，2方法及結(jié)果0．0619％口，0．0624％。。RSD為1．92％。2．1色譜柱HypersilOSD；

8、流動(dòng)相為甲醇一水(40：60)；柱溫：2．8加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱(chēng)取