可視芯片檢測(cè)大豆、水稻和玉米中的轉(zhuǎn)基因成分-論文.pdf

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1、現(xiàn)代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2013，Vo1．29，No．3可視芯片檢測(cè)大豆、水稻和玉米中的轉(zhuǎn)基因成分成曉維1,2王小玉29胡松楠，許喜林，馮家望，鄺筱姍，游淑珠，唐食明(1．華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東廣州510640)(2．珠海出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，廣東珠海519015)摘要：本研究選取9種常見轉(zhuǎn)基因食品外源基因，設(shè)計(jì)了引物對(duì)與探針，并制備可視芯片。通過PCR對(duì)樣品核酸進(jìn)行擴(kuò)增，將擴(kuò)增產(chǎn)物與固定于可視芯片的特異性探針進(jìn)行雜交分析，驗(yàn)證了芯片的特異性和重

2、復(fù)J勝，并對(duì)檢測(cè)芯片靈敏度進(jìn)行測(cè)試。該方法可以一次檢測(cè)出5種的常見轉(zhuǎn)基因植物，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法高效、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、高通量、實(shí)用性強(qiáng)，靈敏度可達(dá)O．1％，并擺脫了基因芯片在雜交結(jié)果分析階段對(duì)熒光掃描儀的依賴，雜交結(jié)果明顯直觀關(guān)鍵詞：可視芯片；轉(zhuǎn)基因食品；檢測(cè)文章篇號(hào)：1673．9078(2013)3．654-659Detecti0nf0rGeneticallyModifiedCompositionofSoybean．RiceandCornbyThin．．filmBiosensorChipsCHENG)【ia

3、O_weil‘2、)I，ANGXiaO，u2HUSong-Nan2XUXi-Lin，F(xiàn)ENGJia-Wang2KIANGⅪa-Shan2，，，，YoUShu-Zhu．TANGShi-Ming"(1．CollegeofLightIndustryandFoodSciences，SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510640，China)(2．TheInspectionTechnicalCenterofZhuhaiEntry—ExitInspectionandQu

4、arantineBureau，Zhuhai519015，China)Abstract：NineexogenousDNAfragementwereselectedastargetgenes．Theirprimersandprobesweredesignedandsynthesized,andthentheprobeswereimmobilizedintheThin-FilmBiosensorChips．PCRWasusedtoamplifythetargetsequenceinfoodsampleDNA，an

5、dthentheBioehipWashybridizedwithPCRproduct．Thechipdisplayedthehybridizationresult．ThemethodCandetect5kindsofcommonmodifiedplant．ItWaseficient,accurate，simple，high-throughput，practical，sensitive(0．1％)，andgotridofthedependenceoffluorescencescanner．Keywords：t

6、hin-filmbiosensorchips；genetically-modifiedfood；detection轉(zhuǎn)基因食品是指以轉(zhuǎn)基因生物為食物或?yàn)樵霞永怼Ｄ壳皣?guó)際上常用的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)方法主要有酶工生產(chǎn)的食品。轉(zhuǎn)基因食品對(duì)人和動(dòng)物的健康及對(duì)生聯(lián)免疫檢測(cè)(ELIsA)、PCR-電泳檢測(cè)、熒光定量PCR態(tài)環(huán)境的影響，已成為世界各國(guó)關(guān)注的焦點(diǎn)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，檢測(cè)等技術(shù)[2]，這些方法在對(duì)含有多種轉(zhuǎn)基因成分的1996年轉(zhuǎn)基因作物的種植面積為170萬}l，2011年樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，容易漏檢，通量低。已達(dá)到1．6億hI

7、I12，增長(zhǎng)94倍【lJ，已有大豆、玉米、基因芯片技術(shù)具有快速、準(zhǔn)確、高通量、平行化油菜等15種轉(zhuǎn)基因作物批準(zhǔn)商品化，據(jù)估計(jì)，用這些等優(yōu)點(diǎn)，是近年來迅速發(fā)展的一項(xiàng)高新生物技術(shù)，在轉(zhuǎn)基因作物生產(chǎn)加工的食品全世界有近萬種【2J?；虬üI(yè)和環(huán)境微生物學(xué)、人類及動(dòng)植物疾病診斷學(xué)、工程掌握的不確定性及不可預(yù)測(cè)性，使得轉(zhuǎn)基因食品微生物生態(tài)學(xué)等許多生命科學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用【5，普通基安全問題成為目前人類在發(fā)展過程中必須面對(duì)的一個(gè)因芯片技術(shù)又因?yàn)椴僮鲝?fù)雜，還需要專業(yè)的掃描儀器棘手的環(huán)境問題【3J。歐盟、美國(guó)、日本等國(guó)家先后出

8、分析結(jié)果，大大限制了它在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用【7¨。臺(tái)了相應(yīng)的法律和管理辦法，對(duì)轉(zhuǎn)基因食品實(shí)行強(qiáng)制可視芯片與傳統(tǒng)芯片相比，它通過肉眼就可以觀察到標(biāo)識(shí)或自愿標(biāo)識(shí)。我國(guó)于2002年7月開始實(shí)施《轉(zhuǎn)基芯片雜交的信號(hào)，更有利于在基層實(shí)驗(yàn)室推廣使用，因食品衛(wèi)生管理?xiàng)l例》，對(duì)轉(zhuǎn)基因食品產(chǎn)品進(jìn)行標(biāo)識(shí)管可以廣泛地在只有PCR儀之類的基本分子生物學(xué)設(shè)收稿日期：2012—11-02備的個(gè)體實(shí)驗(yàn)室或研究站投入使用u¨。本研究旨在建基金項(xiàng)目