轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2成分現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)方法的建立-論文.pdf

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1、第33卷第4期大豆科學(xué)Vol_33NO.42014矩8月S0YBEANSCIENCEAug.2014轉(zhuǎn)基因大豆GTS40—3—2成分現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)方法的建立王永,蘭青闊,朱珠,趙新,陳銳,郭永澤,程奕(I.天津市農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所,天津300381;2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,河北保定071001;3.天津大學(xué)化工學(xué)院,天津300072)摘要:轉(zhuǎn)基因大豆GT,~0—3—2轉(zhuǎn)化體是種植面積最廣的轉(zhuǎn)基因大豆品種,根據(jù)GTS40—3-2轉(zhuǎn)化體特異性序列設(shè)計(jì)引物,應(yīng)用可視化環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),對(duì)其進(jìn)行快

2、速擴(kuò)增及可視化判斷;同時(shí)建立轉(zhuǎn)基因成分人工污染的食品模型,比較了LAMP法與定性PCR方法檢測(cè)的敏感性。結(jié)果表明:該方法僅對(duì)GT,~0-3—2轉(zhuǎn)化體產(chǎn)生特異性擴(kuò)增,靈敏度高達(dá)0.001%。所建立的GTS40—3·2轉(zhuǎn)化體特異性現(xiàn)場(chǎng)可視化篩查方法具有較高的特異性與靈敏性,操作簡(jiǎn)單、快速,可用于轉(zhuǎn)基因大豆GTS40—3—2成分污染的現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)。關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)基因大豆GTS40—3—2;轉(zhuǎn)化體特異性;環(huán)狀等溫?cái)U(kuò)增技術(shù);現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)中圖分類號(hào):$565.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:ADOI:10.11861/j.issn.10

3、00-9841.2014.04.0570DevelopmentofVisualLoop-MediateIsothermalAmplificationAssayforHerbi-cide-resistantSoybeanGTS40-3-2andItsDerivatesWANGYong一,LANQing.kuo,ZHUZhu,ZHAOXin,CHENRui,GUOYong.ze,CHENGYi(1.TianjinInstituteofAgriculturalQualityStandardandTestingTe

4、chnology,Tianjin300381,China;2.CollegeofPlantProtection,AgricuhuralUniversityofHebei,Baoding071001,China;3.SchoolofChemicalEngineeringandTechnology,TianjinUniversity,Tianjin300072,China;4.TianjinAgriculturalU-niversity,Tianjin300384,China)Abstract:ItiSimpo

5、rtanttodetectherbicide.resistantsoybeanGTs40.3-2anditsderivatesinfoodorfoodmaterialsinordertopreventtheillegaldiffusion.Arapidvisualloop—mediatedisothermalamplification(L~MP)methodassayforGTS40—3-2event—specificdetectionwasdeveloped.Asetofprimersweredesign

6、edaccordingtothenucleotidesequenceofthetarget,8genetical—lymodifiedorganisms(GMO)weredetectedbyLAMPformethodspecificity,andmeanwhilethemodeofartificiallycontamina.tedfoodwasconstructedtoevaluatethesensitivityofLAMPassayandqualitativePCRmethod.Theresultssho

7、wedthattheGTS40—3.2eventhadspecificamplification.butthenon.CpTIGM0submittednegativereactions.SensitivityofLAMPassayforGTS40.3-2was0.0o1%.Inconclusion,theLAMPassaydevelopedinthepresentstudyisaspecific.sensitive,simpleandconvenientmethodfortherapidscreeningo

8、fGTS403-2incontaminatedfoods.Keywords:Herbicide—resistantsoybeanGTS40—3-2;Eventspecific;Loop—mediatedisothermalamplification;Visualizationtechnology據(jù)國際農(nóng)業(yè)生物技術(shù)應(yīng)用服務(wù)組織(ISAAA)報(bào)熱循環(huán)儀,不適用于加工車間或市場(chǎng)抽查的現(xiàn)場(chǎng)快道,2012年全球種植轉(zhuǎn)基因作

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