轉(zhuǎn)基因大豆A5547—127品系成分LAMP快速檢測(cè)方法的建立-論文.pdf

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1、食品研究與并發(fā)2013年9月檢測(cè)分析FoodResearchAndDevelopment第34卷第17期69DOI:10.3969/j.issn.1005—6521.2013.17.018轉(zhuǎn)基因大豆A5547—127品系成分LAMP快速檢測(cè)方法的建立蔡穎,周廣彪‘,劉津,高東微,凌莉,劉靜字,易敏英,吳少云,李志勇,’(1.汕頭出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心,廣東汕頭,515031;2.廣東檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心,廣東廣州510623;3.華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院,廣東廣州510641)摘要:根據(jù)轉(zhuǎn)基因大豆A5547—1

2、27品系外源插入片段與植物基因組序列設(shè)計(jì)品系特異性引物,篩選最佳引物并對(duì)反應(yīng)體系和反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化,最終建立了轉(zhuǎn)基因大豆A5547—127品系成分特異性LAMP的快速檢測(cè)方法。對(duì)該方法進(jìn)行了特異性、靈敏度和穩(wěn)定性測(cè)試。結(jié)果表明:該方法能快速、特異性檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因大豆A5547—127品系成分,定性檢測(cè)低限為0.5%,穩(wěn)定性和特異性均能達(dá)到100%。關(guān)鍵詞:環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增;品系特異性;轉(zhuǎn)基因大-~,-A5547—127品系;檢測(cè)DevelopmentofLoop-mediatedIsothermalAmplificat

3、ion(LAMP)MethodforRapidDetectionofTransgenicSoybeanA5547-127ComponentCAIYing,ZHOUGuang-biao,LIUJin,GAODong-wei2,LINGLi,LIUJing-yu,YIMin-ying,WUShao-yun,LIZhi-yong'(1.InspectionandQuarantineTechnologyCenter,ShantouCIQ,Shantou515031,Guangdong,China;2.GuangdongIn

4、spectionandQuarantineTechnologyCenter,Guangzhou510623,Guangdong,China;3.CollegeofLightIndustryandFoodSciences,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510641,Guangdong,China)Abstract:Accordingtoexogenousinsertsequencesconnectionwiththeplantgenomesequencesoftr

5、ansgenicsoybeanA5547-127,severaleventspecificprimersetsweredesigned.Theoptimumwasselectedfromthesecandidates,thenthereactionsystemandreactionconditionswereoptimized.Finallyaloop-mediatedisothermalamplification(LAMP)methodforrapidlydetectingtransgenicsoybeanA55

6、47—127componentwasdeveloped.Theperformances,includingspecificity,sensitivityandstabilityweretestedwiththismethod.TheresultsshowedthatthemethodcanspecificallydetecttransgenicsoybeanA5547—127componentrapidly,withlimitofdetection(LOD)aslowas0.5%,stabilityandspeci

7、ficitybothof100%.Keywords:loop-mediatedisothermalamplification;eventspecific;transgenicsoybeanA5547—127;detec-tion轉(zhuǎn)基因大豆A5547—127品系是美國(guó)拜爾公司研發(fā)的抗草胺磷除草劑的轉(zhuǎn)基因大豆品種,1998年已獲基金項(xiàng)目:出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定計(jì)劃項(xiàng)目:出口食品中轉(zhuǎn)美國(guó)官方批準(zhǔn)使用,并相繼在墨西哥、加拿大、日本、阿基因成分環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(IAMP)檢測(cè)方法(2011B286k);廣東省科根廷、巴西等

8、國(guó)家獲準(zhǔn)進(jìn)行商業(yè)化種植或作為食品原技計(jì)劃項(xiàng)目(2009B0627):食品轉(zhuǎn)基因成分快速檢驗(yàn)?zāi)芰ㄔO(shè)(粵科料進(jìn)口Ilj。該品系在我國(guó)未批準(zhǔn)許可進(jìn)口及使用,為非函財(cái)字[20091627號(hào));廣東檢驗(yàn)檢疫局科技計(jì)劃項(xiàng)目:主要轉(zhuǎn)基因食品法轉(zhuǎn)基因大豆品系。(20O9GDK45)我國(guó)每年從國(guó)外進(jìn)口大量的大豆,2011年進(jìn)口量作者簡(jiǎn)介:蔡穎(1974一),男(漢),副主任

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