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《禽流感病毒LAMP快速診斷方法的建立-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報ActaAgriculturaeZhefiangensis，2014，26(3)：576—580http：／／www．zjnyxbCn王辰雨，胡敬東，史玉穎，等．禽流感病毒LAMP快速診斷方法的建立[J]．浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報，2014，26(3)：576．580．DOI：10．3969／j．issn．1004-1524．2014．03．07禽流感病毒LAMP快速診斷方法的建立王辰雨，胡敬東，史玉穎，宋敏訓(xùn)，，張鶴曉，(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院泰安271000；山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所濟(jì)南250023；北京檢驗檢疫局技術(shù)中心
2、北京100026)摘要：參考禽流感病毒(AIV)基質(zhì)蛋白(M)基因設(shè)計了兩對引物，特異性識別其6個不同位點，建立了基于顏色判定的環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增反應(yīng)(LAMP)方法。試驗對不同禽源病毒進(jìn)行了測試，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該方法僅特異性地檢出禽流感病毒(H9和H5亞型)核酸，對AIV病毒的檢測極限為10EID人工感染病料檢測結(jié)果與雞胚病毒分離法的符合率為96．7％。數(shù)據(jù)表明，建立的LAMP方法特異、敏感、簡便，在禽流感的診斷中具有很大的臨床應(yīng)用潛力。關(guān)鍵詞：禽流感病毒；基質(zhì)蛋白基因；環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增反應(yīng)中圖分類號：S851．347．2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章
3、編號：1004—1524(2014)03—0576-05Establishmentofrapidloop-mediatedisothermalamplificationmethodfordetectionofavianinfluenzavirusWANGChen．yu，HUJing—dong，SHIYu．ying，SONGMin．xun'，ZHANGHe．xiao，(ShandongAgriculturalUniversity，Taian271000，China；InstituteofPoultryScience，Shandong
4、AcademyofAgriculturalScience，n0n250023，China；BeifngInspectionandQuarantineTestingCenter，Beijing100026，China)‘Abstract：WithreferencetOthematrixproteingeneofAvianInfluenzaVirus(AIV)，wedesignedtwopairsofprimerstospecificallyrecognizeitssixdifferentsites，andestablishedthe
5、Loop—mediatedIsothermalAmplificationReaction(LAMP)methodbasedonthedeterminedcolor．Withdifferentavianvirusestested，theresultsshowedthatthemethodonlyspecificallydetectedAIV(H9andH5subtype)nucleicacids，andthedetectionlimitforAIVwas10EID50．Wealsodetectedthesamplesforartif
6、icialinfectionsanddiscoveredthatthecoincidencerateofLAMPtothevirusisolationwas96．7％，Theexperimentaldatademonstratedthattheestablishedmethodswerespecific．sensitive，andsimple，whichhadgreatpotentialforclinicalapplication．Keywords：avianinfluenzavirus；matrixproteingene；loo
7、p—mediatedisothermalamplification禽流感的臨床癥狀和病理變化因感染禽的等不同而表現(xiàn)不同¨J。因此禽流感診斷必須依種類、年齡、病程長短、并發(fā)感染及感染毒株毒力賴于病原鑒定、血清學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)等。病毒分離、RT—PCR及熒光定量RT．PCR方法相繼收稿日期：20131l-19用于禽流感病毒的檢測，但這些方法均因確診時基金項目：“山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目資助”，質(zhì)檢公間過長、儀器設(shè)備要求高等，很難滿足快速、簡益性行業(yè)科研專項(201010067)作者簡介：王辰雨(1988一)，男，山東省濟(jì)南市人
8、，碩士研究生，便、經(jīng)濟(jì)的臨床需求J。環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增反應(yīng)研究方向為動物傳染病。E—mail：milan8804@163．con(1oop-mediatedisothermalamplification，LAMP)技$通訊作者，宋敏訓(xùn)，E-mail：m
