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1、山西農(nóng)業(yè)科學(xué)2013，41(9)：919—923JournalofShanxiAgriculturalSciencesdoi：10．39696．issn．1002-2481．2013．09．08轉(zhuǎn)基因大豆GTS40—3—2定量測(cè)定的不確定度分析王東，宋君，葉先林，雷紹榮，劉文娟，常麗娟，尹全，張富麗(四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測(cè)試中心，四川成都610066)摘要：為了迅速在轉(zhuǎn)基因生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室推廣測(cè)量不確定度評(píng)定工作，對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆定量檢測(cè)結(jié)果的不確定度進(jìn)行了初步評(píng)定。結(jié)果表明，A類(lèi)不確定度(“)為0．000
2、8，B類(lèi)不確定度(u)為0．002，合成不確定度(“)為0．002；在置信水準(zhǔn)為95％時(shí)，包含因子()取1．96，擴(kuò)展不確定度()為0．02。不確定度評(píng)估結(jié)果表明，微量液體轉(zhuǎn)移量的偏差是本次測(cè)量不確定度的主要來(lái)源，在以后的轉(zhuǎn)基因生物檢測(cè)中，應(yīng)盡量減小微量液體轉(zhuǎn)移的偏差。關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因大豆；不確定度估算；評(píng)估中圖分類(lèi)號(hào)：$565．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1002—2481(2013)09—0919—05UncertaintyAnalysisinMeasuringofGeneticallyModifie
3、dSoybeanGTS40-3-2byQuantitativeRealTimePCRWANGDong，SONGJun，YEXian-lin，LEIShao-rong，LIUWen-juan，CHANGLi-juan，YINQuan，ZHANGFu-li(CenterofAnalysisandTest，SiehuanAcademyofAgriculturalSciences，Chengdu610066，China)Abstract：Apreliminaryassessmentofmeasurementu
4、ncertaintyofquantitativeresultsoftransgenicsoybeanwasmadeinthispa-pertopromoteevaluationofmeasurementuncertaintyrapidlyinGMOdetectionlaboratory．Uncertainty(nA)oftypeAwasO．0008，typeBwas(uB)0．002，andthecombineduncertainty(Uc)was0．002；whenconfidencelevelwa
5、s95％andthecoveragefactor(k)was1．96，theexpandeduncertainty(U)wasO．02．Theexperimentaluncertaintyestimatesshowedthetraceamountofliquidtransferwasthemajorsourceofmeasurementuncertaintyinthisexperimentandmoreattentionshouldbepaidtotransrringtraceamountofliqu
6、idinfuturetoreducetheerroroftransrring．Keywords：geneticallymodifiedsoybean；measurementuncertainty；estimate從1993年國(guó)際上發(fā)布《測(cè)量不確定度表示指基因生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有開(kāi)展測(cè)量不確定度評(píng)估南》到2012年我國(guó)發(fā)布新版《測(cè)量不確定度評(píng)定與工作。近年來(lái)，歐盟的轉(zhuǎn)基因生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室摒棄表示)(JJF1059．1—20l2)超過(guò)10a里，不確定度理了靈敏度不高的EndPointPCR(終點(diǎn)多聚酶鏈?zhǔn)椒凑?/p>
7、研究與評(píng)定實(shí)踐在我國(guó)得到了長(zhǎng)足發(fā)展『1卅。相對(duì)應(yīng))方法，而用靈敏度較高的Quantitativerealtime于計(jì)量與校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室，不確定度評(píng)估在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室PCR(實(shí)時(shí)定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的應(yīng)用相對(duì)較少，主要原因可能在于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的并評(píng)估其測(cè)量不確定度。國(guó)際上轉(zhuǎn)基因生物測(cè)量不檢驗(yàn)報(bào)告涉及眾多參數(shù)，測(cè)量不確定度的計(jì)算非常確定度評(píng)估，主要采用TopDown或BottomUp[翻。繁瑣等[51。本研究采用BottomUp途徑，參考《測(cè)量不確定轉(zhuǎn)基因成分定量檢測(cè)是國(guó)際上主流的轉(zhuǎn)基因度評(píng)定與表示)
8、)(JJF1059．1—2012)【”1，評(píng)估了樣品檢測(cè)方法，它通過(guò)測(cè)量指數(shù)時(shí)期擴(kuò)增后的外源DNA中轉(zhuǎn)基因大豆(GTS40—3—2)含量的不確定度，以期數(shù)量，然后根據(jù)數(shù)學(xué)公式計(jì)算出樣品中外源DNA為轉(zhuǎn)基因生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室不確定度評(píng)估提供參考。的原始拷貝數(shù)量[6-91。由于該技術(shù)操作步驟繁多、微1材料和方法量轉(zhuǎn)移液體誤差大、熒光基團(tuán)易降解等原因，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室之間檢測(cè)結(jié)果差異較大。目前，我國(guó)尚未出1．1材料臺(tái)轉(zhuǎn)基因生物及產(chǎn)品定量標(biāo)識(shí)閾值“1，大多數(shù)轉(zhuǎn)本試驗(yàn)以含量
