木瓜蛋白酶制備大豆抗癌活性肽的條件優(yōu)化-論文.pdf

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1、1482012,Vo1.33,No.07食品科學(xué)※生物工程木瓜蛋白酶制備大豆抗癌活性肽的條件優(yōu)化吳非,于勝男,葛錫娟,劉暢,李響(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院,黑龍江哈爾濱150030)摘要:用木瓜蛋白酶對(duì)大豆分離蛋白進(jìn)行酶解,制備大豆抗癌活性肽,并對(duì)其細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率、水解度和木瓜蛋白酶的最優(yōu)作用條件進(jìn)行研究。結(jié)果表明:在整個(gè)酶解過程中,大豆抗癌活性肽都具有明顯的抗癌作用,但水解度與大豆抗癌活性肽的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率之間不呈線性關(guān)系。底物質(zhì)量濃度、酶用量、酶解溫度、酶解時(shí)間和反應(yīng)pH值都影響大豆抗癌活性肽的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。木瓜蛋白酶制備大豆抗癌活性肽的最優(yōu)酶解條件為:底物大豆抗癌活性肽的濃度6g/100

2、mL、酶用量7000U/g、酶解溫度55℃、酶解時(shí)間4h、反應(yīng)pH7.5,在此條件下得大豆抗癌活性肽細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率為28.13%。關(guān)鍵詞:木瓜蛋白酶;大豆抗癌活性肽;最優(yōu)條件OptimizationofPreparationConditionsforSoybeanAnticancerPeptidesbyPapainHydrolysiswUFei,YUSheng—nan,GEXi-juan,LIUChang,LIXiang(CollegeofFoodScience,NortheastAgriculturalUmve~ity,Harbin150030,China)Abstract:Inthiss

3、tudy,operatingconditionsfortheenzymaticpreparationofanticancerpeptidesfromsoybeanproteinisolatewimpapainwereoptimizedformaximuminh~imryrateagainstthegrowthofhumangastriccancerSGC一7901cells.Peptideswiththehighestanticanceractivitywereobtainedafter4hofhydro~satpH7.5and55℃withpapainatadoseof7000U/gand

4、asubstrateconcentrationof6g/100mL.Allhydrolysatescollectedatselectedtimepointsduringthehydrolysisprocesshadobviousanficanceractivity,whilenolinearrelationshipbetweendegreeofhydrolysisandcellgrowthinhibitoryrateWasfound.Allsubstrateconcentration,enzymedose,hydrolysistemperature,hydrolysistimeandpHco

5、uldaffectcellgrowthinh~itionrateofhydrolysates.Keywords:papain;soybeananti—cancerpeptides;optimalconditions中圖分類號(hào):Q814.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1002—6630(2012)07.0148.05大豆是中國(guó)古老的作物之一,含有35%~40%的蛋肽具有十分重要的意義。大豆抗癌活性肽安全性高、毒白質(zhì),是食物蛋白的一種重要來源。大豆肽是指大豆蛋副作用小、容易吸收、易于制備【-s】。本實(shí)驗(yàn)對(duì)生產(chǎn)大白經(jīng)蛋白酶作用后,再經(jīng)過特殊處理所得到的蛋白質(zhì)的豆抗癌活性肽的酶解條件和水解度與抗癌活性之

6、間的關(guān)分解產(chǎn)物[1.。大豆肽具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,同時(shí)也具有系進(jìn)行研究,以為開發(fā)大豆抗癌活性肽產(chǎn)品、預(yù)防和較高的功能活性如抗氧化、抗疲勞和抗高血壓等[3-4】。前輔助治療疾病、促進(jìn)大豆精深加工提供參考。期實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,用蛋白酶作用于大豆分離蛋白,l材料與方法可以制備大豆抗癌活性肽;在眾多的蛋白酶中,木瓜蛋白酶的作用效果最明顯。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)制備大豆抗癌活1.1材料、試劑與儀器性肽酶解條件的研究較少。大豆分離蛋白由國(guó)家大豆工程技術(shù)研究中心提供。癌癥是當(dāng)今發(fā)病率最高的疾病,我國(guó)每年約有130胃癌細(xì)胞SGC.7901由教育部國(guó)家乳品科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)多萬人死于癌癥,而且其發(fā)病率和死亡率還在逐年遞室提供;

7、木瓜蛋白酶無錫杰能科生物有限公司;其增。合成的抗癌藥物雖能有效地控制疾病,但同時(shí)它他試劑均為分析純。也能造成免疫系統(tǒng)損傷、骨髓受抑制等副作用【。我國(guó)快速離心機(jī)北京醫(yī)用離心機(jī)廠;凱氏定氮儀上是大豆的主產(chǎn)國(guó),大豆資源豐富,研究大豆抗癌活性海新嘉電子有限公司;冷凍干燥機(jī)上海醫(yī)用離心機(jī)收稿日期:201I-04.19基金項(xiàng)目:黑龍江省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(GA09B401.2)作者簡(jiǎn)介:吳非(1968一),女,教授,博士,

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