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《納豆激酶液體發(fā)酵條件優(yōu)化的研究-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、研究報告中國釀造2013年第32卷第12期總第261期·83·納豆激酶液體發(fā)酵條件優(yōu)化的研究王艷艷，鄧啟華(北京燕京啤酒股份有限公司技術中心，北京101300)摘要：通過正交試驗和響應面分析法對納豆激酶液體發(fā)酵條件進行了系統(tǒng)研究。由納豆芽孢桿菌的生長曲線確定出18h～20h為適宜的種齡。采用正交試驗法對發(fā)酵培養(yǎng)基的組成進行優(yōu)化，確定出發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳配方：玉米淀粉2‰動物蛋白胨4‰MgSO4·7H20O．05％，CaCIO．01％，K2HPO／KH：PO40．3％／0．1％。通過響應面分析法對發(fā)酵條件進行優(yōu)化，確定出液體發(fā)酵最佳條件：初始pH值為6．8，裝液
2、量50mL／500mL錐形瓶，接種量3．10／0I發(fā)酵溫度36％。經(jīng)過優(yōu)化，發(fā)酵48h后的納豆激酶酶活從12．47kU／mL提高為32．73kU／mL。關鍵詞：納豆激酶；納豆芽孢桿菌：正交試驗；響應面分析中圖分類號：Q939．97文獻標識碼：A文章編號：0254—5o71(2Ol3)12—0083—05OptimizationofliquidfermentationconditionsofnattokinaseproductionWANGYanyan，DENGQihua(TechnologycenterofBeijingYanjingBreweryLimit
3、edCompany,Beijing101300China1Abstract：Liquidfermentationconditionsofnattokinaseproductionwerestudiedbyoahogon~testandresponsesurfaceanalysis(RSA)．ThegrowthcurveofBacillussubtilisNattoshowedthatcultivationfor18h-20hwasthebeststrainage．O~hogonaltestwasusedtooptimizethecomponentsofthe
4、culturemedium．Resultsrevealedthattheoptimumformulaofculturemediumwasasfollows：Cornstarches2％，animalpeptone4％，MgSO4"7H20O．05％，CaC120．01％，K2HPO~KHzPO4O．3％／0．1％．ThefermentationconditionswereoptimizedbyRSA．Itrevealedthattheoptimumliquidfermenta-tionconditionswereasfollows：initialpH6，83
5、，volumeofliquid50ml／500ml，inoculationamount3，14％，fermentationtemperature36．05℃．The叩一timizedconditionsallowednattokinaseactivityincreasedfrom12．47kU／mlto32．73kU／m1．Keywords：nattokinase；BacillussubtilisNatto；o~hogonaltest；responsesurfaceanalysis納豆激酶(Na~okinase)是1987年由日本學者從納豆對發(fā)酵條件進行了優(yōu)
6、化，利用BoxBenhnken的中心組合試中提取的一種絲氨酸蛋白酶，該酶不僅具有明顯的溶栓能驗設計，對試驗數(shù)據(jù)進行響應面分析【“2]，并對擬合數(shù)學模力，還可以激活體內(nèi)的纖溶酶原，從而增加內(nèi)源性纖溶酶型進行了較為詳細的描述，最終對納豆激酶液體發(fā)酵工藝的量與作用【。目前臨床上使用的治療心腦血管栓塞的藥進行了優(yōu)化。品如尿激酶(urokinase，UK)，鏈激酶(streptokinase，SIO，1材料與方法組織型纖溶酶原激活物(tissue—typeplasminogenactivator，1．1材料與試劑tpA)等均在不同程度上存在一定的缺陷(毒性較強，副作1
7、．1．1菌種用較大；體內(nèi)半衰期短，難以發(fā)揮藥效；來源緊缺，價格昂納豆芽孢桿菌來自于燕京中發(fā)生物技術有限公司。貴)，而納豆激酶有望彌補這些缺陷，成為新一代的溶栓1．1．2試劑藥物。納豆激酶是納豆芽孢桿菌(BacillussubtilisNatto)蚓激酶：中國藥品生物制品檢定所；凝血酶、纖維蛋白的代謝產(chǎn)物，納豆激酶的生產(chǎn)普遍采用固體發(fā)酵大豆制備原：中國食品藥品檢定研究院；瓊脂糖、葡萄糖、木糖、玉米納豆，然后從納豆中分離純化的方法得到，而在固體發(fā)酵淀粉、大豆蛋白胨、動物蛋白胨、KH~PO4、K2HPO、CaC12及過程中染菌，散熱問題一直未能得到很好的解決。相對
8、MgSO4~7H20等均為國產(chǎn)試劑。而言，納豆激酶液
