納豆激酶生產(chǎn)菌BSNK-5鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化-論文.pdf

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1、生物技術(shù)通報·研究報告·BIOTECHNoLoGYBULLETIN2013年第2期納豆激酶生產(chǎn)茵B(yǎng)SNK-5鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化李淑英聶瑩杜歡趙仲麟袁超李燕。宋曉燕4唐選明(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,北京100193;2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院,鄭州450002;3.鄭州輕工業(yè)學(xué)院食品與生物工程學(xué)院鄭州450002;4.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院,鄭州450002)摘要:對分離的納豆激酶生產(chǎn)茵B(yǎng)SNK.5進(jìn)行初步鑒定;并對其液體發(fā)酵產(chǎn)酶條件進(jìn)行了初步研究,旨在提高納豆激酶的產(chǎn)量。通過鑒定BSNK一5為枯草芽孢桿菌屬菌株。試驗優(yōu)化了發(fā)酵培養(yǎng)基的最適氮源和碳源種類

2、及百分含量,發(fā)酵培養(yǎng)基的起始pH值,最適種子接種量,發(fā)酵溫度,培養(yǎng)時間等。最終確定了兩個最適的產(chǎn)酶條件,在該條件下,BSNK一5通過液體發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶的活力高達(dá)1160U/mL,比優(yōu)化前提高283%。關(guān)鍵詞:枯草芽孢桿菌納豆激酶液體發(fā)酵Identification0fBSNK一5andOptimization0fthet1一IermentaUJ●0n,0nn1l●UJ●0nSLiShuyingNieYingDuHuanZhaoZhonglin。YuanChaoLiYanSongXiaoyan4TangXuanming(1.InstituteofAgro-produc

3、tsProcessingScienceandTechnology,ChineseAcademyofAgricuhuralSciences,Beijing100193;2.CollegeofSciences,HenanAgriculturalUniversity,Zhengzhou450002;3.SchoolofFoodandBiologicalEngineering,ZhengzhouUniversityofLightIndustry,Zhengzhou450~2;4.CollegeofFoodScienceandTechnology,HenanAgricultu

4、ralUniversity,Zhengzhou450002)Abstract:NattokinaseproductionbacteriaBSNK一5waspreliminarilyidentified.TheefectsofliquidfermentationonnattokinaseactivityproducedbyBSNK一5werestudiedinordertoimproveproductionyield.BSNK-5isaBacillussubtilis.Differentcarbonsources,nitrogensources,●pH,inocula

5、tesize;temperature,andtimewereoptimized.Twooptimumcultureconditionswereobtained.Thenattokinaseactivitywas1160U/mEundertheoptimumcultureconditions,whichwas283%timesoftheformercultureconditions.Keywords:BacillusnattoNattokinaseLiquidfermentation納豆激酶(SubtitisinNAT)是由枯草芽孢桿菌與臨床應(yīng)用的溶栓藥物相比,納豆激

6、酶具有溶纖活分泌表達(dá)的高效纖維蛋白溶解酶,最早從傳統(tǒng)的日性高、安全可靠、無毒副作用、半衰期長、在胃腸本大豆發(fā)酵產(chǎn)品納豆中發(fā)現(xiàn)?。納豆激酶對纖維蛋道中穩(wěn)定性好等優(yōu)點。該蛋白除了靜脈注射外,還白顯示了極高的底物特異性,其血栓溶解活性是可以口服,生產(chǎn)成本低廉’,具有重要的開發(fā)價值。纖溶酶的4倍’。納豆激酶可以直接溶解交聯(lián)狀優(yōu)化培養(yǎng)基組成和發(fā)酵工藝,可以明顯提高芽的血栓塊,還可以催化血纖維蛋白溶酶原轉(zhuǎn)化為血孢桿菌的納豆激酶產(chǎn)量。本試驗對分離篩選的纖維蛋白溶酶,增加體內(nèi)血栓溶解因子的合成,失納豆激酶生產(chǎn)菌BSNK.5進(jìn)行了菌落形態(tài)觀察和分活纖維蛋白溶解抑制劑等一J。納豆激酶除

7、了溶解子鑒定;并采用單因素和正交試驗對篩選菌株產(chǎn)納血栓外,還可以降血壓、血脂和膽固醇,誘導(dǎo)晚豆激酶的液體發(fā)酵條件進(jìn)行了初步研究,以期提高期玻璃體分解,治療玻璃體視網(wǎng)膜紊亂病人等。納豆激酶產(chǎn)量,為該酶的進(jìn)一步擴大培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)。收稿日期:2012—09—29基金項目:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技經(jīng)費項目(201211)作者簡介:李淑英,女,博士,助理研究員,研究方向:微生物生化與分子生物學(xué);E-mail:lishuying@caas.net.cn通訊作者:唐選明,男,副研究員,研究方向:食品科學(xué);E—mail:tangxuanming@caas.net.cn2013年第2期李

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