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1、．——34．--——中國飼料添加劑2014年第7期(總第146期)輟零：不同鐵源對缺鐵仔豬鐵營養(yǎng)狀況及相關鐵轉運蛋白基因表達的影響李妍譯楊維仁校(山東農業(yè)大學動物科技學院，山東泰安271018)摘要：本試驗旨在比較在缺鐵仔豬飼糧中添加硫酸亞鐵(FeSO)和甘氨酸螯合鐵(Fe—Gly)對鐵營養(yǎng)狀況及鐵轉運相關基因表達的影響。本試驗選取18頭仔豬(杜x長×大；6．50±0．52kg)進行研究。階段1，所有試驗豬飼喂19d基礎日糧(舍鐵20．23mg／kg)，直至仔豬產生缺鐵性貧血。階段2，18頭仔豬隨機分為3個處理(每個處理6個重復，每個重復1頭仔豬)再飼喂10d。日糧處理如下：(1)對照組(基
2、礎日糧)；(2)硫酸亞鐵組(基礎日糧4-120mg／kgFeSO，以鐵計)；(3)甘氨酸螯合鐵組(基礎日糧4-120mg／kgFe—Gly，以鐵計)。試驗結束后，與對照組相比，飼喂甘氨酸螯合鐵或硫酸亞鐵的仔豬，心臟、肝臟和肺含鐵量顯著升高(P<0．05)，而血清總鐵結合力(TIBC)明顯降低(P<0．05)。與硫酸亞鐵組相比，甘氨酸螯合鐵組仔豬十二指腸和空腸的小肽轉運蛋白1(PEPT1)mRNA表達水平顯著升高(P<0．05)，膜鐵轉運蛋白(Ferroportin1)mRNA表達水平顯著降低(P<0．05)。但對仔豬生長性能無顯著影響(P>0．05)。綜上所述，研究結果表明，甘氨酸螯合鐵組與
3、硫酸亞鐵組相比，甘氨酸螯合鐵可更有效地改善缺鐵仔豬鐵營養(yǎng)狀況。并且，不同鐵源之間，鐵轉運相關基因的表達不同。結果還表明，PE1可能在甘氨酸螯合鐵的吸收中起著至關重要的作用。關鍵詞：硫酸亞鐵；甘氨酸螯合鐵；營養(yǎng)；缺鐵仔豬；小肽轉運蛋白1引言因此，目前用甘氨酸螯合鐵作為嬰兒奶制品和食物鐵是對動物的生長和健康最重要的微量元中的一個有效補鐵劑(Giorgini等，2001)。素之一。然而，對人類和動物而言，缺鐵是一個2材料和方法普遍的營養(yǎng)問題。補鐵是預防和治療缺鐵性貧2．1試驗動物和試驗設計血的恰當措施(Hurrell，1997)。據報道，金屬氨選取18頭2513齡的仔豬(杜×長×大；基酸螯合物具有
4、較高的生物學利用率(Feng等，6．50±0．52kg)進行試驗。參考仔豬的營養(yǎng)需求2OLO)。Yu等(2000)報道，氨基酸螯合鐵可提(NRC，1998)配制基礎日糧(缺鐵飼料，表1)。高斷奶仔豬血漿鐵濃度以及肝臟和脾中的鐵血日糧粗蛋白(984．13)、鈣(935．13)、磷(964．06)黃素和鐵蛋白含量。據Feng等(2007)報道，甘含量參考AOAC(1995)。13糧中賴氨酸和蛋氨氨酸螯合鐵含量90mg／kg的日糧與含硫酸亞鐵酸的含量采用L一8800氨基酸自動分析儀(日的日糧相比對斷奶仔豬的生長性能、血液系統(tǒng)功立，東京，日本)測定。13糧中鐵含量采用原子能和免疫功能提高作用顯著。甘
5、氨酸螯合鐵生吸收分光光度計(型號AA6501，ShimadzuLtd，京物學利用率更高可能是由于它易吸收，并且當人體都，13本)測定。試驗的第一階段(19d)，所有試內存在抑制鐵吸收因素(如植酸)的情況下，仍可保驗豬都飼喂基礎日糧。試驗的第二階段(10d)，持較高的生物學活性(Oscar和Ashmead，2001)。18頭仔豬隨機分為三個處理(每個處理6個重李妍，等：不同鐵源對缺鐵仔豬鐵營養(yǎng)狀況及相關鐵轉運蛋白基因表達的影響一35一復，每個重復1頭仔豬)，飼喂試驗日糧。試驗用組織酸消化然后比色的方法測定(Torrance和Et糧處理如下：(1)對照組(基礎日糧，表1)；Bothwell，19
6、68)。血清鐵含量和總鐵結合力測定(2)硫酸亞鐵組(基礎El糧+120mg／kg硫酸亞方法參考菲爾丁(1980)。鐵，以鐵計)；(3)甘氨酸螯合鐵組(基礎Et糧+2．4Real—TimePCR120mg／kgFe—Gly，以鐵計)。所有仔豬自由采DMT1，F(xiàn)erroportin1，PepT1和GAPDH(作食和飲水。在19d和29d分別稱量仔豬重并記為持家基因一外界條件改變時，其CT基本不錄采食量。變)，這幾個基因的引物用引物5．0(一種軟件)表1基礎日糧組成(干物質基礎)和基因庫設計(見表2)?？俁NA提取按照試劑成分克／千克成分克／千克盒操作說明書進行(南京建成生物工程研究所，玉米589
7、．0消化f~(MJ／kg)14．3南京，中國)。實時聚合酶鏈反應使用iQTW5實酪蛋白148．0粗蛋白185．0時多路復用系統(tǒng)管理(Bio—ltadIne，Hercules，乳糖80．0鈣8．3蔗糖50．0總磷6．5加利福尼亞，美國)。莫洛尼小鼠白血病病毒葡萄糖100．0賴氨酸12．3(MMLV)逆轉錄酶和益生元底物轉錄酶試劑盒纖維素10．0蛋氨酸4．9用于RNA反轉錄為cDNA。定量PCR熒光混合膽堿1．0
