用低血清培養(yǎng)基和常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞對fmdv增殖影響的比較

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1、·試驗研究·-47-用低血清培養(yǎng)基和常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞對FMDV增殖影響的比較張龍，武春芳，李建林，任偉，王占云，陳春艷，馬德標(biāo)(金宇保靈生物藥品有限公司，內(nèi)蒙古呼和浩特010030)摘要：對15批用低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞與用常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行口蹄疫病毒增殖培養(yǎng)對比試驗，結(jié)果表明：兩者之間在FMDV增埴指標(biāo)上，LD50和TCID50無明顯差別；低血清培養(yǎng)基比常規(guī)培養(yǎng)基病變時間短1h。關(guān)鍵詞：低血清培養(yǎng)基細(xì)胞；常規(guī)培養(yǎng)基細(xì)胞；FMDV增殖比較中圖分類號：S828文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1001-0769(2012)02-0047-2細(xì)胞培養(yǎng)中使用的常規(guī)培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加

2、1.3.1LD50/0.2mL測定10％的犢牛血清，由于動物血清提取的局限性，給細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)按常規(guī)方法進(jìn)行乳鼠半數(shù)致死量LD50的測定準(zhǔn)化帶來困難，同時也存在細(xì)胞培養(yǎng)表達(dá)產(chǎn)品分離純化難的問1.3.2TCID50/0.1mL測定題，如果低血清培養(yǎng)基能在生產(chǎn)中投入使用，不僅可以降低生產(chǎn)按常規(guī)方法進(jìn)行TCID50病毒感染性的測定成本，更主要的是可以減少血清用量，使血清的批間差數(shù)量減少2結(jié)果或影響降低，減少制品的純化損失，提高產(chǎn)品質(zhì)量等等。同時低2.1實驗組LD50(X1)與對照組LD50(X2)的對比，在細(xì)胞培養(yǎng)口血清培養(yǎng)基必須在細(xì)胞增殖速率、細(xì)胞密度、細(xì)胞活力及目的產(chǎn)蹄疫病毒增殖LD5

3、0測定中，低血清培養(yǎng)基和常規(guī)培養(yǎng)基差異不物的產(chǎn)率上符合工業(yè)化生產(chǎn)的要求，本文希望能為低血清培養(yǎng)明顯(表1)?；谕茝V使用中提供一點參考。1材料和方法1.1材料1.1.1常規(guī)培養(yǎng)基用45％乳漢液(本公司自配)和45％MEM(北京天大清一生物技術(shù)有限公司制)另加10％的犢牛血清(本廠提供)。1.1.2低血清培養(yǎng)基MEMSLM培養(yǎng)基(產(chǎn)品代碼：SLM120)(北京天大清一生物技術(shù)有限公司制)1.1.3細(xì)胞株連續(xù)傳代的常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)的BHK21細(xì)胞，連續(xù)傳代的低2.2實驗組TCID50(X1)與對照組TCID50(X2)的進(jìn)行對比，在細(xì)胞血清培養(yǎng)基(MEMSLM培養(yǎng)基)培養(yǎng)的BHK21細(xì)胞

4、(加血清培養(yǎng)口蹄疫病毒增殖TCID50測定中，低血清培養(yǎng)基和常規(guī)培養(yǎng)3％～4％)，由本單位生產(chǎn)?；町惒幻黠@(表2)。1.1.4毒株本公司生產(chǎn)中用的OR毒株。1.1.5實驗動物母鼠、2～3日齡乳鼠由本公司自繁自養(yǎng)。1.2方法1.2.1將配制好的維持液按相同的接毒量分別接入常規(guī)培養(yǎng)基和低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)成熟的細(xì)胞中，調(diào)pH至7.6～7.8，觀察病變時間。當(dāng)CPE達(dá)75％～90％時收獲、凍融。1.2.2把用低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的病毒收獲液設(shè)為實驗組(X1)，把用常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的病毒收獲液設(shè)為對照組(X2)。2.3實驗組病變時間(X1)與對照組病變時間(X2)進(jìn)行統(tǒng)計對1.2.3分別對

5、X1和X2做LD50和TCID50檢測(表1和表2)。比，在口蹄疫病毒增殖中，低血清培養(yǎng)基病變時間比常規(guī)培養(yǎng)基1.2.4在收獲時分別記錄X1和X2的收獲時間(表3)?？?h，差異不顯著(表3)。1.3檢測3討論第32卷第2期總179期2012年2月25日出版-48-·試驗研究·乳鴿生長及嗉囊乳營養(yǎng)水平分析何志華*，丁家桐*，沈曼曼，李曉榮，周坤，吳曼(揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州225009)摘要：為探索乳鴿機(jī)體的生長與其鴿乳營養(yǎng)水平的變化規(guī)律[0]，本研究測定了0～3日齡和1、2、3及4周齡乳鴿的體重及嗉囊乳的營養(yǎng)水平。結(jié)果表明：乳鴿體重在2周齡前生長速度最快，2周齡后明

6、顯減慢；其嗉囊乳中的粗蛋白、粗脂肪和水分含量均隨周齡的增加而下降，分別為45.89％、30.86％、28.02％、13.06％、18.41％，37.65％、7.43％、4.40％、1.41％、2.47％和51.16％、46.99％、44.62％、35.64％、27.50％；乳鴿體重生長強(qiáng)度與鴿乳粗蛋白、粗脂肪含量呈正相關(guān)。關(guān)鍵詞：鴿乳；粗蛋白質(zhì)；粗脂肪;生長強(qiáng)度；相關(guān)系數(shù)中圖分類號：S836文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C文章編號：1001-0769(2012)02-0048-3隨著社會發(fā)展和居民膳食結(jié)構(gòu)的改善，人們對美味食品的的營養(yǎng)成分和氨基酸組成進(jìn)行了分析，結(jié)果表明自然鴿乳的成需求日益增長?！耙?/p>

7、鴿勝九雞”的美譽(yù)及其味美、低脂肪、高蛋白分主要有水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分。根據(jù)KirkBaer和的特色，刺激了養(yǎng)鴿業(yè)的崛起。乳鴿抗病能力強(qiáng)、生長快、飼養(yǎng)期Thomas(1996)的研究結(jié)果，出雛后3d內(nèi)鴿乳中的干物質(zhì)、脂肪、短，3～4周齡就可出售，市場價格一直看好；但乳鴿上市前全靠蛋白質(zhì)及各種脂肪酸含量保持不變。鴿乳干物質(zhì)含量在泌乳親鴿哺喂，限制了鴿的繁殖速度。目前國內(nèi)市場生產(chǎn)的乳鴿，品第1天為30％，第27天為73％。以干物質(zhì)計，粗蛋白的相應(yīng)含質(zhì)規(guī)格參差不齊，在