不同血清培養(yǎng)基對cik細(xì)胞表型與功能的影響

不同血清培養(yǎng)基對cik細(xì)胞表型與功能的影響

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1、技術(shù)方法不同細(xì)胞培養(yǎng)基與血清對細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞功能的影響高群1,2,王菲1,3,王麗萍2,楊黎1,張震1,2,岳冬麗1,2,王盟1,4,張毅1,2,3,5(1.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生物細(xì)胞治療中心,河南鄭州450052;2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科,河南鄭州450052;3.鄭州大學(xué)生命科學(xué)院,河南鄭州450001;4.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科,河南鄭州450052;5.河南省高等學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)重點學(xué)科開放實驗室,河南鄭州450052)[基金項目]國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81171986,No.81271815)。Projectsupp

2、ortedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No.81171986,No.81271815).衛(wèi)生部科研攻關(guān)基金(No.20110110001)。ProjectsupportedbyResearchGrantfromtheChineseMinistryofHealth(No.20110110001).河南省科技廳基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究基金(No.112300410153,No.122300410155)。ProjectsupportedbytheBasicandAdvancedTechnologyRes

3、earchFoundationfromScienceandTechnologyDepartmentofHenanProvince(No.112300410153,No.122300410155).河南省科技廳科技創(chuàng)新人才計劃(No.124200510006)。ProjectsupportedbyNaturalScienceFundofHenanProvince(No.124200510006).鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院院內(nèi)創(chuàng)新團隊基金。ProjectsupportedbytheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUnivers

4、ity.[作者簡介]高群(1988-),女,黑龍江省齊齊哈爾市人,碩士生,主要從事腫瘤的生物細(xì)胞免疫治療研究。Email:qungao1988126@126.com[通信作者]張毅(ZhangYi,correspondingauthor),Email:chyizhang@gmail.com[摘要]目的:探討不同細(xì)胞培養(yǎng)基及血清對細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(cytokine-inducedkiller,CIK)細(xì)胞功能的影響。方法:采集6例肺癌患者外周血,分離獲得單個核細(xì)胞,按照不同血清與培養(yǎng)基分為8組:GT-T551培養(yǎng)基加入患者自體血清組、GT-T551培養(yǎng)基

5、加入健康人血清組、GT-T551培養(yǎng)基加入FBS組、GT-T551培養(yǎng)基組、RPMI1640培養(yǎng)基加入患者自體血清組、RPMI1640培養(yǎng)基加入健康人血清組、RPMI1640培養(yǎng)基加入FBS組,及RPMI1640培養(yǎng)基組。采用CFSE染色法檢測細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞術(shù)檢測CIK細(xì)胞CD3+CD8+T細(xì)胞及CD3+CD4+T細(xì)胞GranzymeB、IFN-γ的分泌情況及CD3+CD56+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞及CD3+CD8+T細(xì)胞表面CD107a的表達(dá)。結(jié)果:GT-T551培養(yǎng)基加入患者自體血清組的CIK細(xì)胞,其增殖指數(shù)顯著高于其他培養(yǎng)條件組(P

6、<0.05)。在細(xì)胞殺傷功能實驗中檢測CD3+CD56+NKT細(xì)胞顯示,GT-T551培養(yǎng)基[(7.10±1.94)%vs(2.73±0.79)%,P<0.0001]或RPMI1640培養(yǎng)基[(4.45±1.96)%vs(2.52±0.76)%,P=0.021]中加入患者自體血清組CD3+CD56+NKT細(xì)胞表面CD107a的表達(dá)顯著高于加入健康人血清組。GT-T551培養(yǎng)基[(22.85±3.50)%vs(13.28±1.75)%,P<0.0001]或RPMI1640培養(yǎng)基[(22.57±3.45)%vs(15.37±4.08)%,P<0.0001]中

7、加入患者自體血清組CD4+T細(xì)胞顆粒酶B的分泌水平顯著高于加入健康人血清組,而且GT-T551培養(yǎng)基中加入患者自體血清組CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ的能力顯著高于加入健康人血清組[(16.55±3.53)%vs(11.17±4.91)%,P=0.007]。結(jié)論:GT-T551培養(yǎng)基加入患者自體血清更有利于CIK細(xì)胞的增殖,及發(fā)揮殺傷功能,為優(yōu)化CIK細(xì)胞培養(yǎng)體系提供實驗依據(jù)。[關(guān)鍵詞]:CIK(細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷)細(xì)胞;培養(yǎng)基;血清;功能[中圖分類號]:R730.3Effectsofdifferentcellculturemediumandserumon

8、thefunctionofcytokine-inducedkillercells

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