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《大豆整體子葉節(jié)再生體系的建立及應(yīng)用于農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化初探-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第31卷第6期大豆科學(xué)V01．31No．62012正12月SOYBEANSCIENCEDec．2012大豆整體子葉節(jié)再生體系的建立及應(yīng)用于農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化初探張福麗，舒文濤，張怡，高丹，張麗，陸亞杰，羅祥，李成偉(1．周口師范學(xué)院生命科學(xué)系，植物遺傳與分子育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南周口466001；2．周口市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，河南周口466001)摘要：以中黃20、周豆02005、周豆11和周豆18整體子葉節(jié)為材料，以MSB為基本培養(yǎng)基，通過L(3)正交設(shè)計(jì)研究了6-BA、IBA和KT9種濃度組合對(duì)大豆整體子葉節(jié)叢
2、生芽再生的影響；并將大豆的整體子葉節(jié)應(yīng)用于農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化研究。結(jié)果表明：9種激素組合中以MSB+3．0mg·L6-BA+0．1mg·LIBA+0．5mg·LKT最適合周豆02005叢生芽的誘導(dǎo)，而MSB十3．5mg·LI16一BA+0．2mg·L。。IBA+0．2mg·LKT最適宜周豆11、周豆18和中黃2O的叢生芽誘導(dǎo)；4個(gè)大豆基因型中，以中黃2O的叢生芽數(shù)最多；叢生芽用于誘導(dǎo)生根時(shí)，IBA為0．8mg·L～、NAA為0．8—1．0mg·L時(shí)較適合大豆生根，其中以中黃20生根數(shù)最多。以中黃20整體
3、子葉節(jié)為材料，進(jìn)行了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化研究。PCR分析和GUS染色初步表明，外源基因轉(zhuǎn)入了大豆的基因組中，轉(zhuǎn)化率為7．8％，得到轉(zhuǎn)基因植株的周期為35～42d。關(guān)鍵詞：大豆；整體子葉節(jié)；再生；農(nóng)桿菌介導(dǎo)；遺傳轉(zhuǎn)化中圖分類號(hào)：$565．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1000—9841(2012)06-0865-04ClusterBudInductionofSoybeanWholeCotyledonaryNodeandApplicationinAgrobacterium--mediatedGeneticTran
4、sformationZHANGFu．1．i．，SHUWen．tao，ZHANGYi，GAODan，ZHANGLi，LUYa-jie，LU0Xiang，LICheng-wei(1．KeyLaboratoryofPlantGeneticsandMolecularBreeding，DepartmentofLifeScience，ZhoukouNormalUniversity，Zhoukou466001，Henan；2．Zhouk—ouAcademyofAgrieuhuralSciences，Zhoukou466
5、001，Henan，China)Abstract：Theeffectsofnineconcentrationcombinationsof6-BA，IBAandKTdesignedbyorthogonaldesign[L9(3)]wereevaluatedoninductionofsoybean『Glycinem(L．)Merrill1multi—shootfromwholecotyledonarynodes．Foursoybeangenotypes，includingZhouhuang20，Zhoudou
6、02005，Zhoudou11andZhoudou18，wereusedasplantmaterials，whileMSBwasusedasbasicmedium．Theresultsshowedthatnineconcentrationcombinationshaddifferenteffectsoninductionofmulti．shootforsoybeanwholeeotyledonarynodes．TheregenerationsystemwasfurtherusedtoAgrobacteri
7、um—mediatedgenetictransforma-ti0n．Forninec0ncentrati0ncombinations，MSB+3．0mg·L一6一BA+0．1mg．L一IBA+0．5mg·L一KTforZhoudou02005andMSB+3．5mg·L一6一BA+0．2mg·L一IBA+0．2mg·L一KTforZhouhuang20．Zhoudou11andZhoudoul8wereopti—mumtoinducemulti—shootthanothercombinations．For
8、fourgenotypes，theregenerationeficiencyofmulti—shootforZhou—huang20wasthehighest．Theconcentrationof0．8mg·L～forIBAand0．8-1．0mg·L一forNAAwasmuchmoresuitableforsoybeanrooting．a(chǎn)ndrootingefficiencyofZhonghuang20wasthehighe
