黃芪多糖通過(guò)激活線粒體凋亡途徑誘導(dǎo)食管癌EC9706細(xì)胞的凋亡并增加其對(duì)順鉑的敏感性.pdf

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1、中華實(shí)驗(yàn)外科雜志2013年3月第30卷第3期Chin‘JExpSurg·539·March2013,V0l1_30,No.3,·實(shí)驗(yàn)研究·黃芪多糖通過(guò)激活線粒體凋亡途徑誘導(dǎo)食管癌EC9706細(xì)胞的凋亡并增加其對(duì)順鉑的敏感性盧創(chuàng)新羅執(zhí)芬周建煒崔勇霞周云【摘要】目的觀察黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖與順鉑聯(lián)合對(duì)EC9706細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法采用噻唑藍(lán)(MTF)比色法及流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)人食管癌EC9706細(xì)胞對(duì)黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑的藥物敏感性差異;應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中B淋巴細(xì)胞/白血病一

2、2(bcl-2)、bc12相關(guān)x蛋白(bax)及核因子一KB(NF—KB)蛋白的表達(dá)。結(jié)果黃芪多糖和順鉑單藥對(duì)食管癌EC9706細(xì)胞的增殖呈濃度依賴性的抑制作用,聯(lián)合組誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率為41.3%,高于單藥黃芪多糖組的18.7%及單藥順鉑組的27.6%(P<0.05);黃芪多糖能下調(diào)EC9706細(xì)胞中bcl一2、NF'KB蛋白的表達(dá),灰度值分別為179.22-4-12.47、131.664-18.83,對(duì)照組灰度值分別為142.11±13.35、140.214-14.75,上調(diào)bax蛋白的表達(dá),其灰度值為185.5

3、4±11.27,對(duì)照組灰度值為199.67±15.43。結(jié)論黃芪多糖通過(guò)激活線粒體凋亡途徑來(lái)促進(jìn)細(xì)胞凋亡,并通過(guò)抑制NF—KB的表達(dá)來(lái)促進(jìn)EC9706細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性?!娟P(guān)鍵詞】食管癌;黃芪多糖;順鉑;脫噬作用;耐藥Mitochondrialapoptosispathwaycontributestopolysaccharideofastragalus-inducedapoptosisofEC9706cellsandenhancestheirsensitivtytocisplatinLUChuang—xin,LU

4、OZhi一尼n,ZHOUJian—wei,CUIYong—xia,ZHOUYun.DepartmentofOneology,People’sHospitalofZhengzho~University,Zhengzhou450003,ChinaCorrespondingauthor:YUNZhou,Email:syzlk2010@yahoo.corn.cn【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheantiproliferative,cytotoxic,apoptogenicactivit

5、iesofpoly—saccharideofastragalus(APS)anditssynergisticeffectswithcisplatinininducingapoptosisofesophagealcarcinomacells.MethodsMethylthiazoltetrazolium(MTI")assaywasusedtodetecttheantiproliferativeeffectofAPSandcisplatinonEC9706cells,AnnexinV—fluoresceineisot

6、hiocyanate(FITC)/propidiumio—dide(PI)stainedfluorescence—activatedcellsorter(FACS)wasusedtodetecttheapoptosisrate,andim—munocytochemistrywasusedtoexaminecellularlocalisationandBlymphocytes/leukemia一2(bcl一2),bcl一2associatedXprotein(bax),nuclearfactor-KB(NF—KB)

7、proteinlevels.ResultsAPSandcisplatinpro—duceddose—dependentinhibitionofEC9706cellgrowth.TheapoptosisrateinAPS+cisplatingroup(41.3%)washigherthaninAPSgroup(18.7%)orcisplatingroup(27.6%).APScouldup—regulatethegreyvaluesofBaxprotein(185.54±l1.27),anddown—reguate

8、thoseofbcl-2(179.22±12.47)andNF—KB(131.66±18.83)proteins.ThegreyValuesbcl-2,NF—KBandBaxincontrolgroupwere142.114-13.35,140.214-14.75and199.674-15.43,respectiely.ConclusionMitochondrialapo

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