戊四氮致癇幼鼠不同腦區(qū)腦損傷研究.pdf

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1、蕉墾至蘭堂塑2014JuneJFuiianMedUniv,v?。148N。u。147戊四氮致癇幼鼠不同腦區(qū)腦損傷研究陳瑯，陳巧彬，方瓊，婁五斌。，高學杰。，周俊香摘要：目的研究S100B蛋白、堿性髓鞘蛋白(MBP)和神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)在戊四氮(PTZ)誘導致癇幼鼠海馬、額葉、中腦和血清中的動態(tài)改變，評鑒癲癇(EP)造成不同腦區(qū)的神經(jīng)損傷。方法雄性SD幼鼠6O只，隨機分對照組(10只)和實驗組(50只)。實驗組腹腔注射(IP)PTZ50mg／kg1次，A組IP生理鹽水。根據(jù)EP發(fā)作分級，O～1級9只視為B組，立即取腦；2級以上

2、發(fā)作41只，于EP發(fā)作后0h(C—lO)、6h(D—l1)、24h(E—lO)、72h(F一10)斷頭，分別取下海馬、中腦和額葉皮質(zhì)，斷頭前抽取軀干血。采用ELISA法檢測血清和各腦區(qū)S100B和MBP，采用EIA法檢測血清和各腦區(qū)NSE值。結果EP發(fā)作后，海馬、額葉和血清S100B蛋白、MBP和NSE均明顯高于對照組。海馬和額葉的NSE峰值出現(xiàn)在中腦NSE之前。各腦區(qū)和血清S100B蛋白皆于EP后24h達高峰，而MBP于EP后72h達高峰。結論EP發(fā)作可以造成大腦不同腦區(qū)神經(jīng)元細胞、膠質(zhì)細胞和神經(jīng)髓鞘的損傷。關鍵詞：癲癇；戊四氮；腦

3、；磷酸’丙酮酸水合酶；$100蛋白質(zhì)類；髓磷脂堿性蛋白質(zhì)類；大鼠，Spragu~Dawley中圖分類號：R332；R322．81；R341；R742．1；R971．7；R977．6文獻標志碼：A文章編號：1672—4194(2014)03—0147一O4癲癇(Epilepsy，EP)是神經(jīng)系統(tǒng)常見病，發(fā)病取下海馬、中腦和額葉皮質(zhì)，斷頭前抽取軀干血。機制仍不明了，可以造成腦損傷導致反復慢性的發(fā)1．2標本采集及S100B蛋白、MBP和NSE測定作，并影響到智力和認知l_l]。為探討EP發(fā)作對大參見文獻[4—5]。全腦取下置沸生理鹽水煮10

4、min，腦神經(jīng)組織的損傷，利用戊四氮(Pentylenetetrazol，吸干水分后取下海馬、中腦和額葉皮質(zhì)，稱質(zhì)量后加PTZ)不造成腦損傷的特點，筆者采用PTZ誘導成入1mL冰醋酸(1mmol／L)制成勻漿，再加1mL功建立幼年大鼠的EP模型，采用EIA和ELISA法NaOH(1mmol／L)中和，4℃3500r／min離心檢測神經(jīng)元特異性烯醇酶(neuron—specificenolase，20min，取上清液置一70℃冰箱保存待檢。采用NSE)、S100B蛋白和堿性髓鞘蛋白(myelinbasicELISA法檢測血清和各腦區(qū)S1

5、00B和MBP，采用protein，MBP)，探討EP發(fā)作后不同腦區(qū)腦損傷是EIA法檢測血清和各腦區(qū)NSE值。神經(jīng)元損傷。1．3統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)以士s表示，采用SPSS13．0軟件處理。多組樣本均數(shù)比較采用單因素方1材料與方法差分析和方差齊性檢驗，均數(shù)兩兩比較采用Inde—1．1動物及分組參見文獻[3—5]。雄性SD幼鼠pendent—SamplestTest或LSD-t或Dunnett(方差(4～5周)60只[上海斯萊克實驗動物有限責任公不齊時)檢驗。P<0．05為差別有統(tǒng)計學意義。司，許可證號：SCxK(閩)20120001~，根據(jù)

6、隨機分組法分成對照組(10只)和實驗組(50只)。實驗組腹2結果腔注射(IP)PTZ50mg／kg1次，A組IP生理鹽水。2．1NSE值比較EP后，海馬、紋狀體、額葉和血根據(jù)EP發(fā)作分級，0～1級9只視為B組，立即取清中NSE均明顯高于對照組；即使無EP大發(fā)作、腦；2級以上發(fā)作41只，于EP發(fā)作后0h(C一10)、但有興奮癥狀的B組在上述區(qū)域和血NSE亦高于6h(D一11)、24h(E一10)、72h(F一10)斷頭，分別對照組。動態(tài)觀察可見EP后不同時間段海馬、紋狀體和額葉的NSE逐步降低，但中腦NSE卻在EP收稿日期：2014-0

7、4—22基金項目：福建省自然基金(2OlOJOl121)；福建省醫(yī)學創(chuàng)新基金后6h達到高值，后出現(xiàn)下降(表1)。(2009一CXB-8)2．2S100B蛋白測定結果比較EP后海馬、額葉、作者單位：1．福建醫(yī)科大學省立臨床醫(yī)學院，福建省立醫(yī)院兒科，福州350001；中腦及血清S100B蛋白呈動態(tài)升高的過程，其中海2．河南省新鄉(xiāng)市醫(yī)院兒科，新鄉(xiāng)453000；馬、額葉、血清S100B蛋白于6h開始升高，24h達3．福建省婦幼保健院兒科，福州350001；4．福建省寧德市醫(yī)院康復科，寧德352000高峰，72h降至正常，海馬、血清24h濃度顯

8、著高于作者簡介：陳瑯(1964一)，男，主任醫(yī)師，副教授通訊作者：陳巧彬．Email：ehenqiaobinl973@sina．corn對照組(表2)。148福建醫(yī)科大學學報2014年6月第48卷第3期2．3MBP測定結