蛹蟲(chóng)草子實(shí)體蟲(chóng)草多糖提取工藝的優(yōu)化.pdf

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1、江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)2014年第42卷第7期·-——277-——殷東林，王銳麗，段鴻斌．蛹蟲(chóng)草子實(shí)體蟲(chóng)草多糖提取工藝的優(yōu)化[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(7)：277—279蛹蟲(chóng)草子實(shí)體蟲(chóng)草多糖提取工藝的優(yōu)化殷東林，王銳麗，段鴻斌(信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院，河南信陽(yáng)464000)摘要：以蛹蟲(chóng)草子實(shí)體為材料，研究蟲(chóng)草多糖的提取工藝，探討熱水浸提法、超聲波助提法、微波助提法和索氏提取法4種提取方法的效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，微波助提法是蟲(chóng)草多糖的最佳提取方法。通過(guò)正交試驗(yàn)考察了微波助提法中微波功率、微波時(shí)間、提取次數(shù)、料液比4個(gè)因素對(duì)蟲(chóng)草多糖提取效率的影響，建立

2、了提取蟲(chóng)草多糖的最佳工藝，即微波功率420W、微波處理時(shí)間4min、提取次數(shù)3次、料液比1g：40mL，此時(shí)提取率可達(dá)9．34％以上。關(guān)鍵詞：蛹蟲(chóng)草；蟲(chóng)草多糖；提取工藝；正交試驗(yàn)；優(yōu)化中圖分類(lèi)號(hào)：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002—1302(2014)07—0277—02蛹蟲(chóng)草[Cordycepsmilitaris(Linn．)Link]為子囊菌亞門(mén)1．1材料麥角。菌目麥角菌科蟲(chóng)草屬的模式種?，是一種藥食兩用的名1．1．1試劑無(wú)水乙醇、濃硫酸、蒽酮，均為市售分析純；蒸貴食用菌。蛹蟲(chóng)草所含的蟲(chóng)草多糖、蟲(chóng)草酸和蟲(chóng)草菌素均高餾水。

3、于冬蟲(chóng)夏草，其獨(dú)特藥理作用已日益引起藥學(xué)界的高度重視。1．1．2器材用具高速粉碎機(jī)，80目篩，電子天平(上海越研究表明，蟲(chóng)草多糖是一種半乳甘露聚糖，它能促進(jìn)淋巴細(xì)胞平科學(xué)儀器有限公司)，微量移液器(上海求精生化試劑儀器轉(zhuǎn)化，提高血清IgG的抗體含量和機(jī)體的免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體有限公司)，數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海梅香儀器有限公司)，自身抗癌、抑癌的能力。它不僅能激活T、B淋巴細(xì)胞、巨噬JY92一Ⅱ超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(浙江寧波新芝生物科技股份有細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞，還能活化補(bǔ)體、促進(jìn)細(xì)胞因子包括腫瘤限公司)，微波爐(廣東省佛山市順德區(qū)格蘭仕微波爐電

4、器有壞死因子和白細(xì)胞介素生成，從而對(duì)免疫系統(tǒng)發(fā)揮多方面的限公司)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE52—86A(上海亞榮生化儀器廠(chǎng))，調(diào)節(jié)作用。此外，多糖還具有抗炎作用，且效果明顯，其DHG一9023AS型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(浙江寧波東南儀器有發(fā)酵液中有抗菌活性物質(zhì)，對(duì)金黃色葡萄球菌馬鈴薯芽孢桿限公司)，TU一1810紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京普析通用儀菌等均有明顯的抑制作用，在研制新型殺菌劑和保鮮劑方面器有限責(zé)任公司)。有良好的應(yīng)用前景J。1．1．3材料蛹蟲(chóng)草由信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院生物技術(shù)系實(shí)驗(yàn)室培目前，蟲(chóng)草多糖的提取方法有熱水浸提法、堿提取法、稀養(yǎng)。蛹蟲(chóng)草子

5、實(shí)體干燥后粉碎，過(guò)8O目篩。酸浸提法和酶提取法等。其中，最常用、最簡(jiǎn)單有效的方法是1．2方法熱水浸提法，首先用蒸餾水浸潤(rùn)物料，再用熱水浴浸提，然后1．2．1蟲(chóng)草多糖的提取用單因素分析法確定蟲(chóng)草多糖最利用多糖易溶于水而不溶于高濃度乙醇的性質(zhì)，用無(wú)水乙醇佳提取方法：(1)熱水浸提法。取干質(zhì)量1g蛹蟲(chóng)草粉，加入沉淀得到多糖，即采用水提醇沉的辦法。30mL蒸餾水，80℃水浴提取2h，提取結(jié)束后抽濾提取液，為了進(jìn)一步提高提取率、縮短提取時(shí)間，可用超聲波輔助用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將濾液濃縮到適當(dāng)體積。(2)超聲波助提浸提和微波輔助浸提，這2種方法操作簡(jiǎn)

6、單且不會(huì)引入雜質(zhì)。法。取干質(zhì)量1g蛹蟲(chóng)草粉，加入55mL蒸餾水，用超聲波細(xì)超聲波能破壞細(xì)胞和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，增加細(xì)胞內(nèi)容物通過(guò)細(xì)胞胞破碎儀400W處理9O次，每次58，然后轉(zhuǎn)入水浴8O℃提膜的穿透能力，有助于多糖的釋放與溶出，超聲波使提取液不取2h，提取結(jié)束后抽濾提取液，用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將濾液濃斷振蕩，有助于溶質(zhì)擴(kuò)散，縮短提取時(shí)間，提高有效成分的提縮到適當(dāng)體積。(3)微波助提法。取干質(zhì)量Ig蛹蟲(chóng)草粉，加取率和原料的利用率；微波透過(guò)提取溶劑到達(dá)物料內(nèi)部，入80℃蒸餾水40mL，靜置20min濕潤(rùn)物料，微波功率為使之快速升溫，進(jìn)而使其細(xì)胞內(nèi)部

7、壓力增大。當(dāng)壓力超過(guò)細(xì)420W下輻射1min，問(wèn)隔1min后再輻射1rain，如此間隔輻胞壁所能承受的能力時(shí)，細(xì)胞壁破裂，胞內(nèi)有效成分易流出，射直至總輻射時(shí)間達(dá)到4min，然后轉(zhuǎn)入水浴溫度為8O℃下從而易進(jìn)人提取溶劑。本研究采取單因素分析法和多因提取1h，提取結(jié)束后抽濾提取液，用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮到素正交分析法，對(duì)蟲(chóng)草多糖提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，旨在為蟲(chóng)草多適當(dāng)體積。(4)索氏提取法。取干質(zhì)量1g蛹蟲(chóng)草粉，用糖的提取提供一套快速、高效的方法。120mL蒸餾水于80～100℃下熱回流3次，收集提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至適當(dāng)體積。以上4種方法均

8、做3個(gè)重復(fù)，1材料與方法結(jié)果取平均值。得到的提取液濃縮到適當(dāng)體積后，加入3倍體積的無(wú)水乙醇，靜置過(guò)夜，進(jìn)行醇析，所得沉淀在45℃條件下烘干；再用60℃蒸餾水將沉淀溶解，并定容到100mL，即收稿日期：2o13—10—24