紫甘薯膳食纖維的提取及對(duì)自由基的清除作用.pdf

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1、第32卷第2期沈陽(yáng)師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)Vo1．32No．22014年4月Journal0_，’ShenyangNormalUniversity(NaturalScienceEdition)Apr．2014文章編號(hào)：1673—5862(2014)02—0206—04紫甘薯膳食纖維的提取及對(duì)自由基的清除作用李潤(rùn)國(guó)，高巖，單秀峰(1．沈陽(yáng)師范大學(xué)糧食學(xué)院，沈陽(yáng)110034；2．遼寧水利職業(yè)學(xué)院，沈陽(yáng)110122)摘要：以紫甘薯為材料，設(shè)計(jì)4因素3水平的正交實(shí)驗(yàn)，酶法提取膳食纖維。結(jié)果表明紫甘薯粉中膳食纖維提取的最佳工

2、藝參數(shù)為0．7的混合酶(其中a一淀粉酶：糖化酶為6：1)，酶解溫度7O℃，處理時(shí)間80min，0．6蛋白酶。以體外實(shí)驗(yàn)研究不同質(zhì)量濃度(2O～140mg／mL)的膳食纖維鮮樣對(duì)1，1二苯基一2一苦昧?；杂苫?DPPH)、超氧陰離子自由基(O·)、羥自由基(·OH)的清除效果。結(jié)果表明紫薯膳食纖維對(duì)DPPHO·、·OH都有明顯的清除效果，在2O～140rag／mE的膳食纖維的濃度范嗣內(nèi)，其清除自由基的效果隨著膳食纖維的濃度增大而增強(qiáng)，但當(dāng)濃度增加到一定程度后，對(duì)DPPH、超氧陰離子自由基的清除能力趨于平緩，對(duì)·OH的

3、清除效果呈直線上升；其清除能力順序?yàn)椋篋PPH自由基>超氧陰離子自由基>羥自由基。關(guān)鍵詞：紫甘薯；膳食纖維；自由基；清除中圖分類號(hào)：TS202．1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：Ad0j：10．3969／i．issn．1673—5862．2014．02．0160引言膳食纖維指不能被人體消化但對(duì)人體健康有某種特殊功能作用的多糖類和木質(zhì)素的物質(zhì)總稱Ⅲ。它可以促進(jìn)人體內(nèi)對(duì)糖類、脂類的代謝，限制人體對(duì)膽固醇的吸收、降低心血管疾病的發(fā)生機(jī)率、緩解便秘。因此把膳食纖維稱為“第七營(yíng)養(yǎng)素”[2]。自由基衰老理論認(rèn)為使人體衰老及某些慢性病發(fā)生的主要原因是

4、自由基對(duì)人體組織或器官的破壞作用，當(dāng)體內(nèi)的自由基過(guò)多時(shí)，細(xì)胞和組織就會(huì)受到攻擊，使其結(jié)構(gòu)和功能受到破壞，從而加速人體的衰老(或)誘發(fā)疾病的產(chǎn)生嘲。膳食纖維以獨(dú)特的方式可清除某些外源性有害物質(zhì)【4]。對(duì)某些自由基的清除效果也較明顯引。本實(shí)驗(yàn)選擇紫甘薯為材料，采用多酶酶解法提取膳食纖維l6]，并研究了紫甘薯膳食纖維對(duì)DPPH、07·、·OH等3種自由基的清除作用。1材料與方法1．1材料與試劑紫甘薯：購(gòu)自沈陽(yáng)市某農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)；a一淀粉酶(2000U／g)、糖化酶(1×lOU／mL)：購(gòu)自江蘇銳陽(yáng)生物科技公司；木瓜蛋白酶(6×l

5、OU／g)：由國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司提供；DPPH：Sigma公司。1．2儀器與設(shè)備手持式粉碎機(jī)、干燥箱，恒溫水浴鍋，752S紫外可見分光光度計(jì)，離心機(jī)。1．3實(shí)驗(yàn)方法1．3．1紫甘薯膳食纖維的提取先將紫甘薯切成薄片，經(jīng)干燥后，粉碎成細(xì)粉，過(guò)40目篩。每組實(shí)驗(yàn)稱取5g此干粉，分別加入蒸餾水45mL，先用混合酶(即a一淀粉酶粉，糖化酶)在一定的溫度下酶解80min，漂洗至中性；再加入蒸餾水25mL，加入木瓜蛋白酶在60℃下處理60min，漂洗至中性，將所得物置于60~70℃下烘干至恒收稿日期：2014—01—20?；痦?xiàng)

6、目：遼寧省科技廳自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2Ol102197)。作者簡(jiǎn)介：李潤(rùn)國(guó)(1965一)，男，遼寧鳳城人，沈陽(yáng)師范大學(xué)教授。第2期李潤(rùn)國(guó)，等：紫甘薯膳食纖維的提取及對(duì)自由基的清除作用207重，計(jì)算膳食纖維的得率_7呻]。以膳食纖維的得率為考察指標(biāo)，以混合酶比例(一淀粉酶粉：糖化酶，m／m)、混合酶用量、混合酶酶解溫度及蛋白酶用量為影響因素，通過(guò)L。(3)正交實(shí)驗(yàn)方法找出提取紫甘薯粉膳食纖維的最佳工藝參數(shù)。其因素水平分別為混合酶比例(4：1、5：l、6：1)；混合酶用量(O．5、0．6、0．7)；酶解溫度(6OoC、

7、70℃、80℃)；蛋白酶用量(0．4、0．5、0．6)。1．3．2測(cè)定不同體系中薯粉膳食纖維粉清除自由基的能力以正交實(shí)驗(yàn)中最佳條件提取膳食纖維，將膳食纖維分別配制成濃度為20、40、6o、8o、100、120、140mg／mL的7種樣品，分別進(jìn)行清除自由基的體外實(shí)驗(yàn)l6。1．3．2．1DPPH清除能力利用比色法對(duì)清除效果進(jìn)行測(cè)定[。取適量的DPPH，用95的乙醇制成1×10mol／mL溶液，分別取5mL該溶液置于7只試管中，分別向試管中加入0．5mL的不同濃度的(2O、40、60、80、100、120、140mg／m

8、L)膳食纖維溶液，在25℃下恒溫3Orain，4000r／rain離心10rain，取上清液，在51nm波長(zhǎng)下分別測(cè)定吸光值為A1；用5mL的95乙醇替代上述5mL的DPPH溶液，重復(fù)上述操作，分別測(cè)定吸光值為A1；再測(cè)定DPPH溶液(5mL)與蒸餾水(O．5mL)的混合液的吸光度為A3。1．3．2．2超氧陰離子自由基體系采用鄰苯三酚自氧化法：