資源描述：
《腸道病毒EV71 IgM抗體參考品的建立-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展2014年6月第42卷第3期ProginMicrobiolImmunol，Jun．2014，Vo1．42No．3·13··論著·腸道病毒EV71IgM抗體參考品的建立范行良，高加梅，葛勝祥，劉艷，趙慧，國泰，李長貴，徐飛海，夏寧邵，王軍志1．中國食品藥品檢定研究院，北京100050；2．國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心，福建廈門361005摘要：目的建立腸道病毒EV71IgM抗體檢測用參考血清盤。方法通過收集手足口病感染早期患者的咽拭子和血清，對咽拭子病毒進(jìn)行分離、鑒定、基因分型，通過血清中和試驗及酶聯(lián)免
2、疫吸附試驗(捕獲法)的驗證，確定EV71IgM抗體陽性樣品，組建EV71IgM抗體參考血清盤，并經(jīng)3家實驗室對該參考血清盤進(jìn)行協(xié)同標(biāo)定和確認(rèn)。結(jié)果12名患兒的咽拭子中均分離到EV71病毒，在RD細(xì)胞上引起細(xì)胞病變。通過套式PCR擴(kuò)增、序列測定后進(jìn)化樹分析確認(rèn)均為流行的c4基因亞型。每名患兒的雙份血清均可中和Ev71病毒，抗體效價為1：512～1：2048。通過捕獲法進(jìn)行EV71IgM抗體檢測結(jié)果均為陽性。以此12份樣品為原料制備EV71IgM抗體陽性參考品，同時以12份EV71IgM抗體陰性血清制備陰性參考品，建立了由12份陽性參
3、考品、12份陰性參考品、1份最低檢出限參考品和1份精密性參考品組成的腸道病毒Ev71IgM抗體參考血清盤。通過3家實驗室協(xié)同標(biāo)定，各實驗室間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論建立了EV71IgM抗體檢測參考血清盤，為相關(guān)檢測試劑的質(zhì)量控制和評價提供了參考標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)鍵詞：EV71；IgM抗體；國家參考品中圖分類號：R373．2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：ADOI：10．13309／j．cnki．pmi．2014．03．003EstablishmentofthereferencepanelforEV71IgMantibodiestestingFANXing—li
4、ang，GAOJia·mei，GESheng—xiang，LIUYan，ZHAOHui，GUOTai，LIChang—gui，XUFei—hal，XIANing—shao，WANGJun·zhiNationalInstituteforFoodandDrugControl，Beijing100050，ChinaCorrespondingauthor：WANGJun—zhi，E—mail：wangfl@n卸．org．cnAbstract：ObjectiveTodevelopthenewnationalreferencepanelfor
5、testingintestinalvirusEV71IgMantibody．Meth-odsTheserumsamplesandthroatswabsfromHFMDpatientswerecollected，andtheswabsampleswereusedforfurthervirusisolating，identifyingandgenotyping．TheEV71IgMantibodypositivesampleswereverifiedbyneutralizationtestandELISA(capturemethod)
6、toestablishEV71IgMantobodypositivesamplesandconstructthenationalreferencepane1．Re-suitsTheEV71virusfromswabswereallisolatedin12patients．ThesevirusresultedinthepathologicalchangesofRDcells．TheisolatedviruswereconfirmedasepidemicG4subtypevirusbythenestedPCR，sequencingan
7、dphylogenetictreeanalysis．ThedoublesamplesfromeachpatientcouldneutralizetheEV71virus．Theantibodytitersrangedfrom1：512to1：2048．a(chǎn)ndthetestedresultsofIgMantibodiesagainstEV71viruswereallpositive．TheEw1IgMantibodypositivereferencewasdevelopedusing12positiveselqlmsamplesas
8、rawmaterials，andatthesametime，thenegativereferenceforEV71IgMantibodytestingwasalsodeveloped．Newnationalreferencepanelfortest
