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《DDP對(duì)順鉑的敏感性-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、JSouthMedUniv,2013，33(12)：1727—1732doi10．3969~．issn．1673—4254．2013．12．04·工727·基礎(chǔ)研究E2F．1基因沉默可增強(qiáng)人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC．7901／DDP對(duì)順鉑的敏感性廉超，楊杰，王曉通，謝玉波，肖強(qiáng)廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸腺體外科，麻醉科，廣西南寧530021摘要：目的探討E2F轉(zhuǎn)錄因子1(E2Ftranscriptionfactor1，E2F．1)基因沉默對(duì)人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC．79O1／DDP對(duì)順鉑敏感性的影響及可能機(jī)制。方法將SGC．7901／DDP細(xì)胞接種
2、于六孔板，分為3組：以E2F．1沉默重組慢病毒顆粒(Lv—shRNA．E2F．1)感染SGC-7901／DDP，作為L(zhǎng)v．shRNA．E2F．1組；以陰性對(duì)照慢病毒顆粒(Lv．shRNA-NC)感染SGC一7901／DDP，作為L(zhǎng)v-shRNA-NC組；空白對(duì)照組不做任何處理。以MTT法測(cè)定轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞對(duì)DDP的半數(shù)抑制濃度(Ic。)，并以AxnnexinV-PE／7-AAD雙染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率及周期分布。應(yīng)用Westernblot和半定量RT-PCR技術(shù)分別對(duì)各組細(xì)胞中E2F-1、survivin、Bc1．2的mRNA及蛋白水
3、平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果與Lv．shRNA．NC組和空白對(duì)照組相比，Lv—shRNA-E2F一1組細(xì)胞對(duì)順鉑的Ic。顯著降低，細(xì)胞凋亡率顯著提高，細(xì)胞周期阻滯于GdG期，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸<0．05)；Lv·shRNA-E2F-1組E2F．1mRNA水平較Lv．shRNA．NC組和空白對(duì)照組分別下降45．0％和41．3％，蛋白水平分別下降66．7％和70．5％(均P<0．01)；Lv-shRNA-E2F一1組survivinmRNA水平較Lv．shRNA．NC組和空白對(duì)照組分別下降30．3％和28．7％，蛋白水平分別下降56．5％和53．6％(均P
4、<0．01)；Lv．shRNA．E2F．1組Bcl一2mRNA水平較Lv—shRNA．NC組和空白對(duì)照組分別下降76．6％和76．8％，蛋白水平分別下降74．6％和79．9％(均P<0．01)；Lv．shRNA．NC組與空白對(duì)照組比較，上述指標(biāo)差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0．05)。結(jié)論：沉默E2F．1基因可有效提高人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC．7901／DDP對(duì)順鉑的敏感性，其機(jī)制可能與survivin及Bcl一2表達(dá)下調(diào)有關(guān)，提示E2F．1可能成為胃癌藥物治療的新靶點(diǎn)。關(guān)鍵詞：E2F一1；胃癌；cisplatin；化療敏感性；survivin；Bc
5、l一2EffectsofE2F一1genesilencingoncisplatinchemosensitivityofhumangastriccancerSGC．7901／DDPcellsLNChaoS,YANGlie，WANGXiaotong，XIEYubo2,XIAOQiangDepartmentofGastrointestinalandGlandSurgery,DepartmentofAnesthesiology,FirstAfiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversit~Nanning530021，C
6、hinaAbstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofE2F一1genesilencingonthechemosensitivityofhumangastriccancerSGC一7901／DDPcellstocisplatinandexploretheunderlyingmechanism．MethodsGastriccancerSGC一7901／DDPcellsweretransfectedwiththerecombinantlentiviriIllSvectorLv—shRNA—E2F一1forE2
7、F一1geResilendng,withcellstransfectedwiththecontrolrecombinantlentivirirusvectorLv—shRNA—NCasthenegativecontro1．MTTassaywasusedtoevaluatecisplatinchemosensitivitvofthecells,andthecellapoptosisrateandcellcycledistributionweredetectedbyflowcytometry．ThemRNAandproteinexpressions
8、ofE2F一1andapoptosis—relatedgenes(survivinandBd一21weredetectedbyRT—PCRandWes
