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《犬細小病毒病PCR檢測方法的建立及應(yīng)用-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、生物災(zāi)害科學(xué)2013，36(4399—402http：／／xuebao．jxau．edu．cnBiologicalDisasterScience，Vo1．36，No．4，2013swzhkx@163．comDOI：10．3969／j．issn．2095-3704．2013．04．012犬細小病毒病PCR檢測方法的建立及應(yīng)用陶明江，張祥華，孫明，余恩超，陸家卿，王萍，何后軍，鄔向東，戴益民(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌330045)摘要：犬細小病毒病感染是由犬細小病毒(cPv)引起犬只死亡的最重要傳染病之一，目前診斷該病的方法主要是膠體金快速檢測試板法，雖然檢測方法較簡便快速，但其敏感
2、性較差。通過對NCBI網(wǎng)站GenBank發(fā)表的CPV-2基因組序列的分析，選擇該病毒VP2基因保守序列設(shè)計引物，通過對陽性病料擴增及擴增產(chǎn)物測序，與NCBI發(fā)表的相關(guān)基因?qū)Ρ龋葱栽?9．8％100％，成功建立了特異性、靈敏度高的PCR方法，最低只需2．5PgDNA模板。在對28例可疑CPV病例檢測中，本方法檢出25例陽性、3例陰性，陽性率為89．28％；膠體金檢測板檢測出20例陽性、8例陰性，陽性率為71．42％，證實PCR方法比膠體金檢測更敏感。關(guān)鍵詞：犬細小病毒；PCR；檢測方法中圖分類號：$852．655文獻標(biāo)志碼：A文章編號：2095．3704(2013)04．0399．04Est
3、ablishmentandApplicationofPCRDetectionMethodsofCanineParvovirusTAOMing-jiang，ZHANGXiang-hua，SUNMing，YUEn-chao，LUJia—qing，WANGPing，HEHou-jun，WUXiang．dong，DAIYi．min(CollegeofAnimalScienceandTechnology,JiangxiAgriculturalUniversity,Nanchang330045，China)Abstract：Canineparvo~msinfectionIScausedbycamnepar
4、vovlrus(cPv)，andISoneofthemostimportantinfectiousdiseasescausingdogdeaths．Thecurrentdiagnosisofthediseasemainlyusesthecolloidalgoldrapiddetectiontestplatemethod．Althoughthisdetectionmethodismuchsimpleandrapid,butitssensitivityispoor．BasedontheanalysisofCPV-2genomesequencepublishedinthewebsiteNCBIGen
5、Bank，theauthorselectedthegeneconservedsequenceofthevirusVP2，thendesignedprimerstoampli~thematerialthroughpositivediseasesandsequencingofPCRproducts，andcomparedthemwithrelatedgenespublishedinNCBI．Wefoundtheywerehomologousfrom99．8％to100％．a(chǎn)ndsuccessfullyestablishedthePCRmethod、)l，ithspecificityandhighs
6、ensitivity,andthemimmumwasjust2．5PgDNAtemplate．In28casesofsuspiciousCPVcasedetection，thismethoddetected25casesaspositive，and3asnegative，wjth89．28％positiverate；thecolloidalgoldassayplatesdetected20casesaspositive，and8asnegative，with71．42％positiverate．ThisconfirmedthatthePCRmethodwasmoresensitivethant
7、hecolloidalgoldassaytest．Keywords：canineparvovirus；PCR；detectionmethods收稿日期：2013．09．29基金項目：江西省教育廳重點項目(GJJ10017)和江西省南昌市科技支撐項目(2012．KJZC-NY-002)作者簡介：陶明江，男，碩士，主要從事動物傳染病診斷與防治的研究，E-mail：740971666@qq．com；通信
