大黃牡丹湯含藥血清對(duì)脂多糖刺激的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264．7中TRIF和TRAM表達(dá)的影響-論文.pdf

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1、122ChineseJournalofClinicalMedicine，2014．Vo1．21，No．2中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)2014年4月第21卷第2期●論著大黃牡丹湯含藥血清對(duì)脂多糖刺激的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264．7中TRIF和TRAM表達(dá)的影響劉軍承解靜楊曉燕楊潔王麗敏孫燕妮(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院急診內(nèi)科，上海200062)摘要目的：研究大黃牡丹湯含藥血清對(duì)細(xì)菌脂多糖(1ipopo1ysaccharide，LPS)刺激的小鼠巨噬細(xì)胞株RAW264．7中Toll白介素受體相關(guān)調(diào)節(jié)因子(Toll—interleukin1receptor—domain—

2、containingadapterinducinginterferon-b，TRIF)及TR1F相關(guān)的接頭分子(TRIF-relatedadaptormolecule，TRAM)表達(dá)的影響。方法：2O只SD大鼠隨機(jī)分為4組：對(duì)照組以及中藥高、中、低濃度組，每組5只。各組大鼠分別相應(yīng)地以0．9％氯化鈉液或高、中、低濃度大黃牡丹湯(13．2、6，6、3．3g／kg)連續(xù)灌胃7d，末次灌胃給藥2h后行心臟采血并處死，分離血清(即含藥血清)。體外培養(yǎng)RAW264．7細(xì)胞，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組(LPS處理組)以及中藥高、中、低濃度組。除對(duì)照組外，其他組均用5

3、／~g／mLLPS刺激RAW264．7細(xì)胞24h，3個(gè)中藥組同時(shí)給予相應(yīng)濃度大黃牡丹湯含藥血清進(jìn)行干預(yù)，分別采用RT—PCR和Westernblotting法檢測(cè)各組細(xì)胞中TRIF和TRAM的mRNA和蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果：模型組細(xì)胞TRIF和TRAM的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組(P<0．01)，中藥中、高濃度組細(xì)胞TRIF和TRAM的mRNA表達(dá)水平均顯著低于中藥低濃度組及模型組(P<0．01)，中藥中、高濃度組TRIF和TRAM的蛋白表達(dá)水平也明顯低于低濃度組(P

4、S刺激后RAW264．7細(xì)胞中TRIF和TRAM的表達(dá)。關(guān)鍵詞大黃牡丹湯；含藥血清；巨噬細(xì)胞；Toll白介素受體相關(guān)調(diào)節(jié)因子；TRIF相關(guān)的接頭分子中圖分類號(hào)R563．9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼AEffectsofDahuangmudanTangDrugSerumonExpressionofTRIFandTRAMinLipopolysaccharide-Stimula—tedRAW264．7MurineMacrophagesLUJunCHENGJejingYANGXiaoyanYANGJieW_ANGLiminSUNYanniDepartmentofEmergen

5、cyMedicine，PutuoHospital，ShanghaiUniversi—tyofTraditionalChineseMedicine，Shanghai200062，ChinaAbstractObjective：ToinvestigatetheeffectofDahuangmudanTangdrugserumontheexpressionofToll—interleukin1re—ceptor—domain-containingadapter—inducinginterferon-h(TRIF)andTRIF—relatedadaptorm

6、olecule(TRAM)inlipopolysaccha—ride-stimulatedRAW264．7murinemacrophagecellline．Methods：TwentySDratswererandomlydividedintocontrolgroup，DahuangmudanTanglowconcentrationgroup，DahuangmudanTangmoderateconcentrationgroup，DahuangmudanTanghighconcentrationgroup。withfiveratsineachgroup．

7、Allratsunderwentgastricperfusiondailywith0．9sodiumchloridesolu—tion，DahuangmudanTanginlow，moderateorhighconcentrations(13．2，6．6and3．3g／kg)，respectively．Bloodwasdrawnfromrats’hearts2hafterendingperfusiononthe7thday，andtheserum(thatisthedrugserum)wasisolatedfortesting。RAW264．7cel

8、lswereculturedandequallydividedintocontrolgroup，modelg