植物遺傳轉(zhuǎn)化方法和轉(zhuǎn)基因植株的鑒定

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1、·24·陜　西　農(nóng)　業(yè)　科　學(xué)2000(1)植物遺傳轉(zhuǎn)化方法和轉(zhuǎn)基因植株的鑒定金萬(wàn)枚　鞏振輝　李桂榮　張桂華(西北農(nóng)業(yè)大學(xué)　陜西楊陵　712100)提　要　對(duì)現(xiàn)有主要植物遺傳轉(zhuǎn)化方法和轉(zhuǎn)基因植株的鑒定進(jìn)行了比較分析,并對(duì)它們?cè)谥参镞z傳轉(zhuǎn)化中的前景進(jìn)行了展望。關(guān)鍵詞　植物;遺傳轉(zhuǎn)化方法;轉(zhuǎn)基因植株;轉(zhuǎn)基因植株鑒定　　人們可通過(guò)有性雜交,物理化學(xué)誘變或自要求的外源目的基因?qū)胧荏w植株,并通過(guò)對(duì)然變異來(lái)創(chuàng)造新物種和新品種。但常常存在著轉(zhuǎn)化植株的鑒定選擇,從而創(chuàng)造出人類(lèi)所需要雜交不親和或雜種不育而造成的生殖隔離,也的新品種或新物種。

2、植物遺傳轉(zhuǎn)化方法和轉(zhuǎn)基存在誘變的非定向性。采用遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù),將所因植株的鑒定是植物遺傳轉(zhuǎn)化的重要環(huán)節(jié)。關(guān)3國(guó)家自然科學(xué)基金資助,項(xiàng)目編號(hào)39770522。優(yōu)質(zhì)小麥品質(zhì)的決定性因素;其次要有較強(qiáng)的院小麥中心的初步研究表明,小麥覆膜后籽粒生活力,保證營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)健壯。容重有不同程度提高;蛋白質(zhì)含量與正常露地3.3.2　播種　研究表明,適當(dāng)晚播和增加密度播種沒(méi)有差異;覆膜不影響不同生態(tài)類(lèi)型品種能在穩(wěn)定產(chǎn)量的基礎(chǔ)上提高小麥品質(zhì)。根據(jù)我的干、濕面筋值和沉淀值;但不同生態(tài)類(lèi)型品種省實(shí)際,關(guān)中優(yōu)質(zhì)專(zhuān)用小麥播量應(yīng)控制在每畝之間籽粒容重、蛋白質(zhì)含

3、量、干、濕面筋值和沉淀6～8kg,渭北應(yīng)控制在9kg。播期可依據(jù)實(shí)際情值存在較大差異。優(yōu)質(zhì)專(zhuān)用小麥可以采用地膜栽況較當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)適播期推遲2～3d。提倡機(jī)械以培,但不應(yīng)忽視地膜覆蓋后對(duì)小麥生育期及農(nóng)藝精量半精量播種。性狀的影響,比如植株增高,應(yīng)采取化控措施,在3.4　灌水小麥返青～起身期,噴施壯豐安防止倒伏;再如部灌水對(duì)小麥品質(zhì)的影響比較復(fù)雜,尤以抽分病蟲(chóng)害發(fā)生的提前與危害加重問(wèn)題,應(yīng)及時(shí)開(kāi)穗至成熟期間影響最大,此期灌水會(huì)降低蛋白展病蟲(chóng)防治,減少對(duì)產(chǎn)量和品質(zhì)的影響。同時(shí)提供質(zhì)含量,對(duì)沉淀值等加工品質(zhì)也不利,但如果氮麥?zhǔn)涨耙粋€(gè)月揭

4、膜,減少地膜污染。量充足或灌水與施氮結(jié)合則蛋白質(zhì)含量不下降3.6　病蟲(chóng)害防治或下降很慢。因而施肥上的前氮后移也為后期優(yōu)質(zhì)專(zhuān)用小麥病蟲(chóng)害的防治,應(yīng)盡量減少合理灌水提供了條件。中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)曾研究出化學(xué)藥品殘苗,不要影響食用品質(zhì)。應(yīng)堅(jiān)持綜合一套節(jié)水高產(chǎn)栽培技術(shù),小麥春季可只灌一次,防治的原則,要采用農(nóng)業(yè)防治、物理防治和生物并將灌水時(shí)期移至孕穗期;若特別干旱,可在拔防治措施,減少化學(xué)藥劑防治次數(shù);選用高效低節(jié)期和開(kāi)花期分別灌水。這種灌水制度與前氮毒低殘留農(nóng)藥;收獲前20d以?xún)?nèi)嚴(yán)禁施藥;使用后移的施肥方法配合起來(lái),有利于優(yōu)質(zhì)專(zhuān)用小農(nóng)藥

5、增效劑,提高防治效果。麥生產(chǎn)。3.7　收獲3.5　地膜覆蓋收獲是優(yōu)質(zhì)專(zhuān)用小麥栽培的最后一個(gè)環(huán)地膜覆蓋栽培能使小麥產(chǎn)量大幅度提高,節(jié);也是比較關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。要做到單收、單貯、單對(duì)品質(zhì)的影響這方面研究還較少。陜西省農(nóng)科獨(dú)銷(xiāo)售,實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)優(yōu)價(jià)優(yōu)加工。2000(1)陜　西　農(nóng)　業(yè)　科　學(xué)·25·于植物遺傳轉(zhuǎn)化方法的研究報(bào)道頗多,不同轉(zhuǎn)plasmid)上的T-DNA插入到宿主植物基因化方法的轉(zhuǎn)化率差異較大,同一轉(zhuǎn)化方法在不組中,這一點(diǎn)與Ti質(zhì)粒相類(lèi)似。轉(zhuǎn)移機(jī)制也類(lèi)同植物上的轉(zhuǎn)化率亦有明顯差異;此外,不同學(xué)似,所不同的是vir區(qū)和T-DNA

6、區(qū)所含基因[2]者在對(duì)轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行鑒定的策略和方法上所采及其同源性不同。發(fā)根農(nóng)桿菌由于宿主植物用的選擇標(biāo)記基因、報(bào)告基因,以及外源基因在損傷部位產(chǎn)生的酚類(lèi)化合物而附著在植物的細(xì)受體植物上的不同表達(dá)水平所采用的鑒定方法胞壁上,virA的產(chǎn)物是一種跨膜蛋白,進(jìn)一步亦有差異。因此,本文試圖通過(guò)對(duì)植物遺傳轉(zhuǎn)化激活virG的產(chǎn)物。T-DNA區(qū)的TL區(qū)具有較方法及轉(zhuǎn)化植株鑒定策略與方法的綜合分析,高的穩(wěn)定性,TR區(qū)具有與生長(zhǎng)表合成有關(guān)的基旨在為進(jìn)一步研究和應(yīng)用高效遺傳轉(zhuǎn)化體系,因tms1和tms2及農(nóng)桿堿或甘露堿合成基因。提高轉(zhuǎn)化植株的

7、準(zhǔn)確性,研究植物基因與表達(dá)TR區(qū)可進(jìn)行改造,這樣Ri通過(guò)農(nóng)桿菌細(xì)胞膜的關(guān)系提供參考。特定“孔道”進(jìn)入宿主植物細(xì)胞核,進(jìn)而使T-DNA整合到植物基因組中?；谝陨显?生1　植物遺傳轉(zhuǎn)化方法物技術(shù)工作者,先將目的基因分離和鑒定,然后選擇適宜的遺傳轉(zhuǎn)化方法是提高遺傳轉(zhuǎn)化構(gòu)建植物表達(dá)載體,最終將目的基因插入T-率的重要環(huán)節(jié)之一。盡管轉(zhuǎn)基因的方法很多,但DNA區(qū),通過(guò)農(nóng)桿菌Ti或Ri質(zhì)粒介導(dǎo),將外從遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)來(lái)說(shuō),可分為兩大類(lèi),一類(lèi)是以源目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,以獲得轉(zhuǎn)基因植株。[3][4][5]載體為媒介的遺傳轉(zhuǎn)化,另一類(lèi)是外源目

8、的這種方法目前在油菜、大豆、甘藍(lán)、黃[6][7]DNA的直接轉(zhuǎn)化。瓜、秈稻等植物中獲得成功。1.1　載體法現(xiàn)將農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化常采用的1.1.1　農(nóng)桿菌Ti或Ri質(zhì)粒介導(dǎo)法　農(nóng)桿菌方法,簡(jiǎn)要介紹如下。[8]Ti或Ri質(zhì)粒介導(dǎo)法是迄今植物基因工程應(yīng)用1.1.2　葉盤(pán)法　葉盤(pán)法是雙子葉