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1、現(xiàn)代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2010,Vol.26,No.4纖維素降解菌的篩選和鑒定12222張濤,皮雄娥,劉偉,朱立穎,王欣(1.浙江師范大學(xué)生化學(xué)院,浙江金華321000)(2.浙江省農(nóng)科院植微所,浙江杭州310000)摘要:從石油勘探采取的土樣中,初篩分離出了9株能夠降解纖維素的真菌,然后利用濾紙條降解實(shí)驗(yàn)和cellulose-azure降解實(shí)驗(yàn)進(jìn)行復(fù)篩,篩選出了2株降解纖維素效果比較好的真菌,命名為f1和f2。經(jīng)酶活測(cè)定f1的CMCase酶活和FPase酶活分別為1.06IU、0.7IU;f2的CMCase酶活和FPase酶活分別為1.
2、06IU、0.7IU。并對(duì)這2株真菌纖維素酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了探索。最后經(jīng)過分子生物學(xué)對(duì)其鑒定、比對(duì),這2株菌為產(chǎn)紫青霉菌和煙曲霉。關(guān)鍵詞:纖維素酶;菌株篩選;分子鑒定文章篇號(hào):1673-9078(2010)4-418-420ScreeningandIdentificationofCellulose-decomposingMicroorganisms12222ZHANGTao,PEIXiong-e,LIUWei,ZHULi-yi,WANGXin(1.CollegeofChemistryandLifeScience,ZhejiangNormalUniversity,Jinhua321000,
3、China)(2.InstituteofPlantProtectionandMicrobiology,ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences,Huangzhou310000)Abstract:Ninefunguswithcellulose-degradationcapabilitywerescreenfromsoilsamples,amongwhichtwostrainsshowedmuchhighercellulose-degradationactivitiesandwerenamedasf1andf2.TheCMCasandFPaseeactivi
4、tiesoff1were1.06IUand0.7IU,respectively.AndtheCMCaseandFPaseactivitiesoff2were0.81IUand0.15IU,respectively.ThetwofungusweredefinedasPenicilliumpurpurogenumandAspergillusfumigatus.Keywords:cellulase;screeningofstrain;molecularidentification纖維素資源是地球上最大的可再生資源,地球上時(shí)的深層土壤。1212每年光合作用的產(chǎn)物高達(dá)1.5×10~2.0×10t,
5、其中901.2培養(yǎng)基[1][4]%以上為木質(zhì)纖維素類物質(zhì)。我國(guó)的纖維素資源極為初篩培養(yǎng)基:(NH4)2SO40.17g,KH2PO40.2g,8豐富,每年農(nóng)作物秸稈的產(chǎn)量達(dá)5.7×10t,約相當(dāng)于我MgSO4·7H2O0.03g,CaCl20.03g,Yeastextract0.1g,國(guó)北方草原年打草量的50倍。目前這部分資源尚未得FeSO4·7H2O0.1mg,ZnCl20.08mg,MnSO40.05mg,到充分的開發(fā)利用,主要用于燃料,畜牧飼料與積肥,CoCl2·6H2O0.05mg,蒸餾水100mL,碳源分別為:玉[2]不僅利用率低,還對(duì)環(huán)境造成一定的污染。隨著世界米芯粉0.5g
6、;avicel0.5g;濾紙條0.5g。[5]人口迅速增長(zhǎng)、糧食、礦產(chǎn)資源日漸枯竭,開發(fā)高效分離培養(yǎng)基:NaNO30.2g,K2HPO40.04g,轉(zhuǎn)化木質(zhì)纖維素類可再生資源的微生物技術(shù),利用工MgSO4·7H2O0.05g,F(xiàn)eSO40.002g,KCl0.005g,農(nóng)業(yè)廢棄物等發(fā)酵生產(chǎn)人類急需的燃料、飼料及化工Glucose3g,Agar2g,蒸餾水100Ml。[6]產(chǎn)品,即化工原料的“綠色化”,具有極其重大的現(xiàn)實(shí)意復(fù)篩培養(yǎng)基:(NH4)2SO40.17g,KH2PO40.2g,[3]義和光明的發(fā)展前景。MgSO4·7H2O0.03g,CaCl20.03g,Yeastextract0
7、.1g,F(xiàn)eSO4·7H2O0.1mg,ZnCl20.08mg,MnSO40.05mg,1材料和方法CoCl2·6H2O0.05mg,濾紙條0.5g,蒸餾水100mL。1.1樣品的來源發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基:(NH4)2SO40.17g,KH2PO40.2g,用于篩選纖維素降解真菌的土樣采自石油勘探MgSO4·7H2O0.03g,CaCl20.03g,Yeastextract0.1g,收稿日期:2009-12-23FeSO4·7H2O0.1