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《兒茶素活性成分分子印跡聚合物的分子識(shí)別特性及固相萃取研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、第33卷分析化學(xué)（FENXIHUAXUE）研究簡報(bào)第6期2005年6月ChineseournaIofAnaIyticaIChemistry857~860兒茶素活性成分分子印跡聚合物的分子識(shí)別特性及固相萃取研究＊雷啟福鐘世安向海艷周春山于典（中南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，長沙4l0083）摘要以表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）為模板分子，!-甲基丙烯酸為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，合成EGCG分子印跡聚合物。利用該聚合物對(duì)EGCG及其異構(gòu)體和結(jié)構(gòu)類似物進(jìn)行分子識(shí)別特性研究。結(jié)果表明：分子印跡聚合物對(duì)模板分子具有較高的選擇性和識(shí)別能力，而空白聚合物卻不具
2、備這樣的特性。在此基礎(chǔ)上，把聚合物用于固相萃取茶葉提取物茶多酚，分離富集其中的兒茶素活性成分單體EGCG，獲得了滿意的效果。關(guān)鍵詞分子印跡聚合物，分子識(shí)別，固相萃取，表沒食子兒茶素沒食子酸酯1引言兒茶素活性成分是茶葉中的特有成分，主要包括表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigaIIocatechin-gaI-Iate，EGCG）、沒食子兒茶素沒食子酸酯（gaIIocatechin-gaIIate，GCG）、表兒茶素（epigaIIocatechin，EC）、兒茶素（catechin，C）、表兒茶素沒食子酸酯（epicatechinGaIIate，ECG）、兒茶素
3、沒食子酸酯（catechinGaI-［l］Iate，CG）、表沒食子兒茶素（epigaIIocatechin，EGC）和沒食子兒茶素（gaIIocatechin，GC）等。由于EGCG具有優(yōu)異的抗氧化、抗癌、防癌功能，其分離純化成為各國醫(yī)藥、食品界的研究熱點(diǎn)。分子印跡聚合物（MoIecuIarimprintedpoIymers，MIP）是為印跡分子量身定做的高分子聚合物，洗去模板分子以后，能留下在形狀、大小以及識(shí)別位點(diǎn)都與模板分子相匹配的空穴，該空穴能重新識(shí)別模板［2，3］分子。MIP已廣泛應(yīng)用于固相萃取（SPE），包括清除環(huán)境和生物樣品中的雜質(zhì)和從復(fù)雜樣品
4、中富集［4~6］［7］有效成分。最近，也有人開始把MIP用于固相萃取中藥中的有效成分。由于固相萃取對(duì)MIP的微粒單分散性要求不高，本研究采用本體聚合法合成對(duì)EGCG具有識(shí)別能力的分子印跡聚合物，并嘗試把該聚合物用于固相萃取茶葉提取物茶多酚（teapoIyphenoIs，TP）中的EGCG。2實(shí)驗(yàn)部分2.1儀器和試劑高效液相色譜（HPLC）系統(tǒng)：BT8l00泵、BT8200UV-VIS檢測器以及C-R6A數(shù)字積分記錄儀（德國Biotronik），ProdigyODSCl8色譜柱（250X4.60mm，5!m，美國Phenomenex）；TGL-l6G冷凍離心機(jī)
5、（上?？茖W(xué)儀器廠）；ZD-2調(diào)速多用振蕩器（江蘇望華科教儀器廠）。EGCG、GCG、EGC、ECG（長沙華欣科技開發(fā)有限公司）；偶氮異丁腈（AIBN，上海試劑廠）；甲基丙烯酸（MAA，天津市科密歐化學(xué)試劑廠）；乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA，上海和氏璧化工有限公司）。MAA和EGDMA使用前減壓蒸餾除去阻聚劑。乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。2.2EGCG分子印跡聚合物的制備將EGCG0.9l68（g2mmoI）、MAA0.6887g（8mmoI）溶解于適量的氯仿，靜置過夜。在加入EGD-MA7.9200（g40mmoI）、AIBN0.0657g（0.4m
6、moI）后，超聲處理20min，使其充分溶解。混合溶液中通入N2l5min后密封，于0C，366nm紫外燈光照下聚合48h，使聚合反應(yīng)完全，得堅(jiān)固的棒狀固體聚合物（MIP）。將該聚合物粉碎、過45!m篩，用91l的甲醇乙酸溶液（體積比）在索氏提取器中回流l8h，除去印跡分子，最后用乙腈反復(fù)沉降以除去細(xì)小顆粒，真空干燥，備用。制備空白聚合物（BP）時(shí)，除不2004-06-29收稿；2004-ll-08接受本文系湖南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.043080），國家中小企業(yè)創(chuàng)新基金項(xiàng)目（No.02C262l4300675）858分析化學(xué)第33卷加模板分子以外，其
7、它方法同上。2.3HPLC檢測條件EGCG、GCG、ECG、EGC等4種兒茶素單體均采用下列色譜條件檢測：色譜柱為ProdigyODSCl8柱（250mmX4.60mm，5!m），流動(dòng)相為甲醇1乙酸1水（24.510.5175，!"!），流速為0.8mL/min，進(jìn)樣量為6!L，檢測波長為278nm。定量分析方法見文獻(xiàn)［8］。2.4分子識(shí)別及固相萃取實(shí)驗(yàn)將40.0mg制得的干MIP于帶蓋的聚四氟乙烯瓶中，加入3mL不同濃度EGCG與GCG的混合乙腈溶液，在室溫下振蕩l2h，離心分離，取上清液用0.45!m的微濾膜過濾后，于HPLC上檢測各組分的平衡濃度。根據(jù)
8、結(jié)合前后溶液中濃度的變化分別計(jì)算聚合物對(duì)兩個(gè)底物的結(jié)
